En este artículo se presenta un protocolo general para medir la duración de la vida de los nematodos mantienen en medios sólidos con UV-muertos alimentaria bacteriana.
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Artículo de método
Medición Caenorhabditis elegans Duración de la vida en el medio sólido
En este artículo
Resumen
Resumen
El envejecimiento es un proceso degenerativo caracterizado por un deterioro progresivo de los componentes celulares y orgánulos que resulta en la mortalidad. El nematodo
Protocolo
Parte 1: Preparar nematodo crecimiento de los medios (NGM) placas
En esta sección se describe la preparación de los platos NGM sólida para su uso en el experimento de vida. Un experimento de vida útil básica requiere dos tipos de placas: las placas estándar NGM, que no contienen aditivos, y las placas Amp / FUDR, que tienen la ampicilina (Amp) y fluorodesoxiuridina (FUDR) añadido a la NGM. La ampicilina se utiliza para prevenir la contaminación bacteriana externa. FUDR inhibe la división celular, reduce la producción de huevos, y evita que los huevos de incubar. El uso de FUDR para el análisis de la longevidad no afecta vida adulta y elimin....
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Discusión
El control genético de la longevidad se ha estudiado extensamente en C. elegans, en gran parte debido a la facilidad y rapidez con que puede ser tiempo de vida determinado. El protocolo discutido en este artículo se describe un marco básico para la obtención de datos reproducibles esperanza de vida en C. elegans y también se puede aplicar a las especies relatednematode. 2 Al hacer algunos cambios sencillos estos procedimientos pueden ser adaptados para medir duración de la vida bajo una vari.......
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Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por una Glenn / AFAR avances en la concesión de Gerontología y Subvenciones del NIH 1R01AG031108-01 a MKGS es apoyado por el NIH formación conceder P30AG013280. MK es una Ellison Medical Foundation de Nueva Académico en el envejecimiento.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios | |
|---|---|---|---|---|
| Agar | Reactivo | Fisher Scientific | DF0145-17-0 (214530) | |
| Ampicilina | Reactivo | MidSci | 0339 | |
| BactoTryptone | Reactivo | Fisher Scientific | DF0123-17-3 (211705) | |
| BactoPeptona | Reactivo | Fisher Scientific | DF0118-17-0 (211677) | |
| CaCl2 | Reactivo | Fisher Scientific | NC9699248 (1332-01) | |
| Carbenicilina | Reactivo | Gold Biotechnology | C0109 | |
| Colesterol | Reactivo | Sigma-Aldrich | C75209 | |
| Fluorodesoxiuridina (FUDR) | Reactivo | Sigma-Aldrich | F0503 | |
| Isopropilo β-d-Tiogalactopiranósido (IPTG) | Reactivo | Gold Biotechnology | I2481C5 | |
| KPi dibásico | Reactivo | Fisher Scientific | 5087862 (3252-01) | |
| KPi monobásico | Reactivo | Fisher Scientific | 5087861 (3246-01) | |
| MgSO₄4 | Reactivo | Fisher Scientific | NC9561800 (2500-01) | |
| NaCl | Reactivo | Fisher Scientific | S251 | |
| Tris | Reactivo | Sigma-Aldrich | T1503 | |
| Extracto de levadura | Reactivo | Fisher Scientific | DF0886-17-0 (288620) |
Referencias
- Wood, W. B. The Nematode Caenorhabditis elegans. Wood, W. B. , Cold Spring Harbor Laboratory Press. Cold Spring Harbor, NY. 1-16 (1988).
- Sutphin, G. L., Kaeberlein, M. Dietary restriction by bacterial deprivation increases life span in wild-derived nematodes. Exp Gerontol. 43, 130-135 (2008).....
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Reimpresiones y permisos
