Artículo de método

Ratón cromafín aislamiento de células

DOI:

10.3791/129

⸱

5 de enero de 2007

 ,  ,  ,  , 
1Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI), 2Department of Physiology and Biophysics, University of Southern California, Keck School of Medicine, 3Zilkha Neurogenetic Institute, University of Southern California, Keck School of Medicine, 4Department of Developmental and Cell Biology, University of California, Irvine (UCI)

En este artículo

Resumen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Médula suprarrenal cromafines sistemas de cultivos celulares son muy útiles para el estudio del acoplamiento excitación-secreción en el establecimiento in vitro. Este protocolo se ilustra el método utilizado para diseccionar las glándulas suprarrenales y luego aislar a la región medular al eliminar la corteza suprarrenal. La digestión de la médula en una sola las células cromafines se demostró entonces.

Resumen

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Médula suprarrenal cromafines sistemas de cultivos celulares son muy útiles para el estudio del acoplamiento excitación-secreción en el establecimiento in vitro. Este protocolo se ilustra el método utilizado para diseccionar las glándulas suprarrenales y luego aislar a la región medular al eliminar la corteza suprarrenal. La digestión de la médula en una sola las células cromafines se demostró entonces.

Protocolo

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Abreviaturas:
ACC - adrenal de células cromafines, E. sol. - solución de la enzima, E. DMEM - Modificado enriquecido Dulbecco Medio Eagle

  1. Preparación
    1. Añadir la papaína a la cantidad deseada de E. sol. (40 unidades de papaína / 1 ml E. sol.)..
    2. Activar la papaína con carbogen durante unos 15 minutos en hielo. Buffer oxigenar de Locke sobre el hielo también.
  2. Disección
    1. El uso del ratón 8-10 semanas.
    2. Antes de la digestión eliminar oxigenada búfer de Locke y el lugar en el hielo. <....

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