La investigación de los tejidos y órganos específicos de las respuestas fitocromo usando FACS asistida por células de tipo Perfiles de expresión específica en Arabidopsis thaliana</em

Resumen

La base molecular de las respuestas específicas de espacio-fitocromo está siendo investigado el uso de plantas transgénicas que presentan los tejidos y órganos específicos deficiencias fitocromo. El aislamiento de células específicas exhibir agotamiento inducido cromóforo fitocromo por fluorescencia de células activadas clasificación seguido por análisis de microarrays se está utilizando para identificar genes implicados en el espacio-las respuestas específicas de fitocromo.

Resumen

Media luz una serie de procesos de desarrollo y de adaptación a través del ciclo de vida de una planta. Las plantas utilizan la luz que absorben las moléculas llamadas fotorreceptores para percibir y adaptarse a la luz. El rojo / rojo lejano que absorbe la luz fotorreceptores fitocromo se han estudiado ampliamente. Fitocromos existir como una familia de proteínas con diferentes funciones y la superposición de todos los sistemas de plantas superiores en las que se han estudiado

Protocolo

1. Crecimiento de las Plantas

1. Confirmó UAS-GAL4 BVR X-GFP línea de trampas potenciador aislado como se describe ⁴ (Para un resumen ver fig. 1) y las líneas de tipo salvaje o de los padres se siembran en el suelo, es decir, ~ 2000 semillas esterilizadas por línea.
2. Las plantas son cultivadas durante 5 semanas en el suelo bajo una iluminación blanca de 100 μmolm ^-2 s ^-1 a 22 ° C y 70% de humedad.

2. Hoja de aislamiento de protoplastos (adaptado de Denecke Vitale y ⁹⁾

1. Para aislar protoplastos, preparar TEX buffer. Para 1 litro de amortiguación TEX, pese a cabo l....

Discusión

Perfiles de expresión génica mediante microarrays (1) ha indicado que más del 30% de los genes en plantas de Arabidopsis se regula la luz ¹¹ y (2) ha identificado un vasto grupo de genes que codifican proteínas de transducción de señales de luz que participan en la cascada de señalización fitocromo ^{12, 13} . Estos experimentos sugieren que la luz induce cambios rápidos y de largo plazo en la expresión génica. Cada grupo de fitocromos puede controlar sólo un subconjunto de respuestas de desarrollo y .......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Anticuerpo anti-BVR	QED Bioscience Inc.	56257-100
Cellulasa “Onozuka” R-10	SERVA Electrophoresis	MSPC 0930
Mezcla de sales basales B5 de Gamborg’s	Sigma-Aldrich	G5768
Macerozima R-10	SERVA Electrophoresis	PTC 001
MES, bajo contenido de humedad	Sigma-Aldrich	M3671
Sales de Murashige y Skoog	Caisson Laboratories	74904
Phytablend	Caisson Laboratories	28302
Kit Minielite RNeasy para plantas	Qiagen	16419