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El papel del microambiente celular se reconoce como crucial para determinar el destino de células y la función en prácticamente todos los tejidos de los mamíferos del desarrollo a la transformación maligna. En particular, la interacción con estroma vecinos ha sido implicado en una gran cantidad de fenómenos biológicos, sin embargo, las técnicas convencionales de limitar la capacidad de interrogar a los elementos espaciales y la dinámica de estas interacciones.
En micromecánico Cultura Reconfigurable (RC), contamos con un sustrato de silicio micromecanizados con las piezas móviles para controlar dinámicamente interacciones célula-célula a través de mecánicas de reposicionamiento. Anteriormente, este método ha sido aplicado para investigar la comunicación intercelular en co-cultivos de hepatocitos y las células no parenquimatosas, lo que demuestra que dependen del tiempo y la interacción de una gama limitada de solubles de señalización 1.
A continuación, describimos en detalle la preparación y el uso del sistema de RC. Comenzamos demostrando el manejo de las piezas del dispositivo con unas pinzas, incluyendo accionamiento entre la brecha y configuraciones de contactos (las poblaciones de células separadas por un estrecho de 80 micras brecha, o en contacto íntimo directo). A continuación, detallamos el proceso de preparación de los sustratos para el cultivo y el proceso de siembra de varios pasos necesarios para la obtención de células monocapas confluentes de células. Mediante microscopía de vivir, entonces ilustrar manipulación en tiempo real de las células entre las diferentes configuraciones posibles experimental. Por último, demostrar los pasos necesarios con el fin de regenerar la superficie del dispositivo para su reutilización: tolueno y la limpieza de pirañas, revestimiento de poliestireno, y el tratamiento con plasma de oxígeno.