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Artículo de método

Basada en sondeos endomicroscopía Láser Confocal del tracto urinario: la técnica

20.5K vistas

DOI:

10.3791/4409

10 de enero de 2013

En este artículo

Resumen

Basada en sondeos endomicroscopía láser confocal permite en tiempo real de la microscopía del tracto urinario humano durante la cistoscopia, proporcionando imágenes dinámicas, intravital de estados patológicos como el cáncer de vejiga con resolución celular. Endomicroscopía puede aumentar la precisión diagnóstica de la endoscopia estándar de luz blanca y proporcionar orientación intraoperatoria en la imagen para mejorar la resección quirúrgica.

Resumen

Sonda basada en láser confocal endomicroscopía (CLE) es una tecnología emergente que permite formación de imágenes ópticas en tiempo real de microscopía in vivo de las superficies mucosas durante la endoscopia estándar. Con las aplicaciones actualmente en los tractos respiratorio y gastrointestinal 1, 2-6 CLE también se ha explorado en el tracto urinario para el diagnóstico de cáncer de vejiga. 7-10 morfología celular y la microarquitectura del tejido se puede resolver con la resolución escala del micrón en tiempo real, además de formación de imágenes dinámica de la vasculatura normal y patológica. 7

La sonda basada en CLE sistema (Cellvizio, Mauna Kea Technologies, Francia) consiste en una sonda de imagen reutilizable fibra óptica acoplada a una unidad de exploración de 488 nm láser. La sonda de imagen se inserta en los canales de trabajo de estándar endoscopios flexibles y rígidos. Un endoscopio basado CLE sistema (Optiscan, Australia), en la que el functionalit endomicroscopía confocaly está integrado en el endoscopio, se utiliza también en el tracto gastrointestinal. Dado el diámetro mayor alcance, sin embargo, la aplicación en el tracto urinario se limita actualmente al uso ex vivo. 11 de adquisición de imagen confocal se realiza a través del contacto directo de la sonda de imagen, con el tejido diana y se registró como secuencias de vídeo. Como en el tracto gastrointestinal, endomicroscopía del tracto urinario requiere un agente de contraste exogenenous-más comúnmente fluoresceína, que se puede administrar por vía intravenosa o por vía intravesical. Administración intravesical es un método bien establecido para introducir agentes farmacológicos localmente con toxicidad sistémica mínima que es única para el tracto urinario. Fluoresceína rápidamente las manchas de la matriz extracelular y tiene un perfil de seguridad establecido. 12 sondas de imagen de varios diámetros permitir la compatibilidad con endoscopios de diferentes calibres. Hasta la fecha, 1,4 y 2,6 mm sondas han sido evaluadas con flexible y ricistoscopia gid. disponibilidad reciente de 10 a <1 mm Sonda de imágenes 13 abre la posibilidad de CLE en el tracto urinario superior durante la ureteroscopia. Fluorescencia cistoscopia (diagnóstico fotodinámico es decir) y las imágenes de banda estrecha son adicionales basados ​​endoscopio modalidades de imágenes ópticas 14 que se pueden combinar con CLE para lograr imágenes multimodal del tracto urinario. En el futuro, CLE se puede acoplar con agentes de contraste molecular tales como péptidos marcados con fluorescencia 15 y anticuerpos para la obtención de imágenes endoscópicas de los procesos de enfermedad con especificidad molecular.

Protocolo

1. Preparación del paciente

  1. El consentimiento del paciente programado para la cistoscopia diagnóstica y otros procedimientos endourológicas como la resección transuretral de tumor vesical (RTU) para el CLE. Incluir en el consentimiento una descripción del uso de fluoresceína intravesical y / o intravenosa como el agente de contraste. Investigar la historia de reacción de hipersensibilidad a la fluoresceína.
  2. El paciente es colocado para la cistoscopia (típicamente en posición de litotomía) y preparado de forma estéril.
  3. Proceda con la norma cistoscopia con luz blanca (WLC) con un cistoscopio rígido o flexible a través de la uretra.
  4. <....

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Resultados

CLE imágenes se guardan como archivos de vídeo en escala de grises en la secuencia de 12 cuadros por segundo. Interpretación de las imágenes se realiza en tiempo real y puede ser utilizado para impactar toma de decisiones clínicas en virtud de un protocolo de investigación. Análisis fuera de línea, que incluye la revisión de la secuencia de vídeo, el procesamiento de imágenes adicionales, tales como mosaicos, 7 y la comparación con el estándar de patología, son importantes durante la fase de curva de aprendiz.......

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Discusión

Lograr y mantener un contacto sólido entre la cara en la sonda de imagen y la mucosa de la vejiga es el paso más crítico en la adquisición de una calidad de imagen óptima. Hay aproximadamente una curva paciente 3-5 aprendizaje para desarrollar la destreza para manipular la sonda de imagen y de mantener la sonda estable durante la adquisición de imagen. Además, ya que este procedimiento se lleva a cabo in vivo, los movimientos del paciente (es decir, respiratorio) y pulsaciones vasculares puede.......

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Divulgaciones

No hay conflictos de interés declarado.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer a Mauna Kea Technologies para obtener asistencia técnica. Los autores también agradecen a Shelly Hsiao para la asistencia técnica y Kathleen E. Mach para su examen crítico. Este trabajo fue apoyado en parte por el NIH R01CA160986 a JCL

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Nombre del reactivo Empresa Número de catálogo Comentarios (opcional)
Cellvizio 100 Series Mauna Kea Tecnologías 100 Series Incluye procesador confocal y LSU: F400-v2 a 488 nm
Cellvizio Confocal minisonda Mauna Kea Tecnologías Gastroflex UHD
AK-FLUOR 10% Akorn, Inc. NDC 17478-253-10

Referencias

  1. Thiberville, L., et al. Human in vivo fluorescence microimaging of the alveolar ducts and sacs during bronchoscopy. Eur. Respir. J. 33, 974-985 (2009).
  2. Dunbar, K. B., Okolo, P. 3rd, Montgomery, E., Canto, M. I.

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Imagen del tracto urinarioDiagn stico del c ncer de vejigaAgente de contraste de fluoresce naAdministraci n intravesicalCistoscopia r gidaMicroscop a in vivoAn lisis de la morfolog a celularT cnica de seccionamiento pticoImagen multimodal