Un modelo de ratón estándar de la hemorragia subaracnoidea por el Círculo de Willis intraluminal perforación se describe. Perforación de vasos y hemorragia subaracnoidea son monitoreados por el monitoreo de la presión intracraneal. Además diversos parámetros vitales se registran y se controlan para mantener las condiciones fisiológicas.
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Artículo de método
Un modelo murino de hemorragia subaracnoidea
En este artículo
Resumen
Resumen
En esta publicación de vídeo se presenta un modelo estandarizado de ratón de la hemorragia subaracnoidea (HSA). El sangrado es inducida por el Círculo endovascular de perforación Willis (CWP) y probado por (ICP) de control de presión intracraneal. De este modo se consigue una distribución homogénea en la sangre espacios subaracnoideos que rodean la circulación arterial y fisuras del cerebelo. Fisiología animal es mantenido por la intubación, ventilación mecánica y monitorización continua en línea de diversos parámetros fisiológicos y cardiovasculares: la temperatura corporal, la presión arterial sistémica, la frecuencia cardíaca y saturación de la hemoglobina. De este modo la presión de perfusión cerebral se puede monitorizar bien que resulta en un volumen de menos variable de sangre extravasada. Esto permite una mejor estandarización de perforación filamento endovascular en ratones y hace que todo el modelo altamente reproducible. Por lo tanto, es fácilmente disponible para estudios farmacológicos y fisiopatológicos en tipo salvaje y genéticaLY alterado ratones.
Introducción
SAH es el subtipo tiempos con el resultado menos beneficioso para los pacientes: el 40% de los pacientes mueren dentro de un mes después de que el sangrado 1 y sobrevivientes raramente tienen un desenlace clínico favorable.
La gran mayoría del SAHS espontáneos (80%) son causados por la ruptura de aneurismas intracraneales, que se encuentran principalmente a lo largo de la anterior y la arteria comunicante posterior, la arteria basilar, y la arteria cerebral media (ACM) 2.
Tales aneurismas son difíciles de modelar en los animales y por lo tanto los modelos animales de la HSA se llevan a ....
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Protocolo
Todos los procedimientos quirúrgicos fueron sometidos a una evaluación ética y aprobados por el Gobierno de la Alta Baviera (número de referencia: 55.2-1-54-2532.3-13-13 y -2532-136-11). Los animales son macho C57BL / 6 ratones con un peso corporal de aproximadamente 25 g.
1. Preparación de los animales
- Inducir la anestesia al poner el ratón en una cámara. Limpie la cámara con el 5% de isoflurano hasta que el animal pierda el conocimiento.
- Inyectar anestésicos premezclados por vía intraperitoneal: fentanilo (0,05 mg / kg), midazolam (5 mg / kg) y medetomidina (0,5 mg / kg). Compruebe los reflejos antes y periódicament....
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Resultados
Mortalidad
Una vez que la técnica de cirugía que se domina el procedimiento no provoca ninguna mortalidad intraoperatoria. También sangrado se puede lograr en casi todos los animales. La mortalidad postoperatoria es del 30-40%, con la mayoría de los animales mueren en el día 1 después de la cirugía (Figura 5).
ICP valora después de la HSA
El ICP antes del sangrado es de alrededor de 4 mmHg. Sangrado resultado en un fuerte a.......
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Discusión
Las opciones de tratamiento después de la HSA son escasos y en su mayoría ineficaces. Por lo tanto la fisiopatología del daño cerebral post-hemorrágica necesita ser entendido más con el fin de identificar nuevas dianas terapéuticas y desarrollar nuevos enfoques terapéuticos. Estandarizados y modelos animales bien reproducibles en animales modificados genéticamente, es decir, ratones, son cruciales para tales investigaciones. El modelo de CWP se ha convertido en un modelo ampliamente utilizado para HSA ya que se.......
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Divulgaciones
Los autores tienen nada que revelar.
Agradecimientos
La investigación actual está financiada por la Fundación para la Investigación Solorz-Zak.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Equipment | |||
| operation microscopio | Vaporizador | KL2500 | |
| Vaporizador | de Harvard Instruments | ||
| respirador | Hugo Sachs | Microcapnógrafo Minivent 845 | |
| Hugo | Sachs Controlador de | temperatura Tipo 340 | |
| Controlador | temperatura FHC DC taladro | ||
| dental | Paggen | Labset- N | |
| monitor ICP | Codman | Monitor | |
| monitor de presión arterial | AD Instruments | Bridge Amp FE221 | |
| bomba de jeringa | Precision Instruments | ||
| Kent | Scientific MouseSTAT | ||
| analógico LDF | Perimed | Periflux 5000 | |
| AD Instruments | Power Lab 16/35 | ||
| Material | |||
| para la fijación de sondas ICP | cemento | Speiko | |
| para la fijación de sondas LDF | Pegamento de cianoacrilato Bob Smith Industries (Maxi Cure e Insta Set) | ||
| catéter venoso | Johnson Johnson | Jelco alado por vía intravenosa; Tubo | intubación modificado |
| para catéter femoral | Smiths Medical | ; ID 0,28 mm, OD 0,61 mm; REF 800/100/100 | filamento cortado a 30 cm |
| de longitud para la perforación de vasos | Ethicon | Prolene 5-0 | cortado a 12 mm de longitud |
| quirúrgico | Fine Scientific Instruments | pinza médica #5, tijera para vasos de 8 cm, mandíbula |
Referencias
- Cahill, J., Zhang, J. H. Subarachnoid hemorrhage: is it time for a new direction. Stroke. 40, 86-87 (2009).
- van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. Subarachnoid haemorrhage. Lancet. 369, 306-318 (2007).
- Lin, C. L., et al.
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Reimpresiones y permisos
