Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Evaluación ecocardiográfica de la parte derecha del corazón en ratones

23.3K visualizaciones

⸱

DOI:

10.3791/50912

⸱

27 de noviembre de 2013

 ,  ,  , 

En este artículo

Resumen

Este artículo proporciona un protocolo para la evaluación ecocardiográfica del tamaño ventricular derecha e hipertensión pulmonar en los ratones. Las aplicaciones incluyen la determinación del fenotipo y la evaluación de serie en modelos de ratón inducido por la toxina de la cardiomiopatía y la enfermedad vascular pulmonar transgénicos y.

Resumen

Transgénicos y modelos tóxicos de la hipertensión arterial pulmonar (HAP) son ampliamente utilizados para estudiar la fisiopatología de la HAP y para investigar las posibles terapias. Dado el costo y el tiempo necesarios para la creación de modelos animales de la enfermedad, es fundamental que los investigadores tengan herramientas para evaluar con precisión la expresión fenotípica de la enfermedad. La disfunción ventricular derecha es la principal manifestación de la hipertensión pulmonar. La ecocardiografía es el pilar de la evaluación no invasiva de la función del ventrículo derecho en modelos de roedores y tiene la ventaja de definir de forma sencilla a los seres humanos en los que se utiliza la misma herramienta. Protocolos de ecocardiografía Publicado en modelos murinos de PAH son insuficientes.

En este artículo, se describe un protocolo para evaluar la RV y la función vascular pulmonar en un modelo de ratón de la HAP con una mutación dominante negativa BMPRII, sin embargo, este protocolo es aplicable a cualquier enfermedad que afectan a la vasculatura pulmonar o cardiaca derecha. Nosotrosproporcionar una descripción detallada de la preparación de los animales, adquisición de imágenes y cálculo hemodinámico del volumen sistólico, el gasto cardíaco y una estimación de la presión arterial pulmonar.

Introducción

Presión pulmonar elevada y ventrículo derecho (VD) disfunción son las características de la enfermedad vascular pulmonar en modelos animales y pacientes humanos con hipertensión arterial pulmonar (HAP). Modelos tóxicos (por ejemplo monocrotalina o hipoxia) Transgénicos y de HAP son ampliamente utilizados para estudiar la fisiopatología de la HAP y para investigar las posibles terapias. Dado el costo y el tiempo necesarios para la creación de modelos animales de la enfermedad, es fundamental que los investigadores tengan herramientas para evaluar con precisión la expresión fenotípica de la enfermedad.

La ecocardiografía es el pila....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

1. Equipo de preparación

  1. Examine el transductor de ultrasonidos para detectar defectos. Dependiendo del equipo utilizado, este paso puede no ser necesario.
    1. Si se observa una burbuja de aire, extraiga el tornillo situado en el lado derecho de la cabeza del transductor, y añadir agua estéril a través del agujero con una aguja de 26. Las burbujas de aire en el interior del cabezal del transductor son comunes. Se impedirá la adquisición de imágenes de calidad.
    2. Compruebe la membrana que cubre la sonda en busca de fugas o agujeros. Reemplace si es necesario.
  2. Abra el software e inicializar la sonda.
    1. Elija el paquete....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

Los principales objetivos de este protocolo son para cuantificar el tamaño y la función del VD, y para comprender el grado en que la vasculatura pulmonar está enfermo. La preparación adecuada de los equipos tanto en el ratón y la ecocardiografía es esencial para obtener resultados exactos y reproducibles. Los ratones deben tener su pecho depilado y las extremidades asegurado a la plataforma de imágenes con cinta adhesiva. Anestesia, en este caso de isoflurano, se administra a través de cono de la nariz. El transductor d.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

Los modelos de ratón de la enfermedad, ya sea transgénica o relacionados con la toxina, requieren la validación fenotípica que el modelo de realidad recapitula la enfermedad humana que se pretende imitar. Esta validación a menudo se puede lograr por la presencia o ausencia de una característica particular, por ejemplo el desarrollo de un tumor. Sin embargo, los modelos que dan lugar a alteraciones hemodinámicas, como los modelos de constricción de la aorta de la hipertrofia ventricular izquierda o nuestro modelo transgé.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Sistema de microultrasonido de alta resolución Vevo 770Visualsonics Inc.obtenga más información en www.visualsonics.com/products
RMV (Microvisualización en tiempo real) 704B 40 mH Cabeza de escaneo con transductor encapsuladoVisualsonics Inc.obtenga más información en www.visualsonics.com/products
Sistema de rieles integrado de Vevo, incluido el sistema de monitoreo fisiológicoVisualsonics Inc.obtenga más información en www.visualsonics.com/products
Monitor de computadora configurado para su uso con el Vevo770DELL u otro Mouse
configurado para usar con el software Vevo770Paquete
cardíaco Vevo770Visualsonics Inc.obtenga más información en www.visualsonics.com/products
VetEquip Máquina de Anestesia Portátil de Mesa con Vaporizador de IsofluranoVetEquipobtenga más información en
vetequip.com Contenedores de Gases Residuales de Carbón ActivadoVetEquip/Vaporguard931401obtenga más información en vetequip.com
Ungüento para los ojos PuralubeHenry Scheinobtenga más información en henryschein.com
Ecogel 100 Gel de UltrasonidoEcoMed Pharmaceuticals30GBMás información en
ecomed.com Cinta Transpore 3MFisher Scientific1527-0Más información en fishersci.com
Destornillador de cabeza plana pequeñoProveedor general Estéril
H2ODDI H2O del grifo y luego autoclave
6 en algodón Aplicadores con puntaFisher Scientificobtenga más información en fishersci.com
Nair (crema depilatoria)Proveedor
2 en x 2 en esponjas de gasaFisher Scientificobtenga más información en fishersci.com
de computadora de proveedor general de proveedor general general

Referencias

  1. Urboniene, D., Haber, I., Fang, Y. H., Thenappan, T., Archer, S. L. Validation of high-resolution echocardiography and magnetic resonance imaging vs. high-fidelity catheterization in experimental pulmonary hypertension. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 299, 401-412 (2010).
  2. Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Explorar más artículos

EcocardiografíaVentrículo derechoArteria pulmonarModelo de ratónVolumen sistólicoGasto cardíacoPresión de la arteria pulmonarFunción ventricular derechaEnfermedad vascular pulmonarCálculo hemodinámico