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Artículo de método

Murino Trasplante corneal: un modelo para estudiar la forma más común de trasplante de órganos sólidos

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DOI:

10.3791/51830

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17 de noviembre de 2014

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En este artículo

Resumen

ratones se han utilizado como modelo para estudiar muchas formas de trasplante, incluido el trasplante de córnea. En este informe describimos un modelo murino para el trasplante de córnea tanto agudo como tardío.

Resumen

El trasplante de córnea es la forma más común de trasplante de órganos en los Estados Unidos, con entre 45,000 y 55,000 procedimientos realizados cada año. Si bien existen varios modelos animales para este procedimiento y los ratones son la especie que se utiliza con mayor frecuencia. Las razones para el uso de ratones son el costo relativo del uso de esta especie, la existencia de muchas cepas genéticamente definidas que permiten el estudio de las respuestas inmunes y la existencia de una amplia gama de reactivos que se pueden usar para definir aún más las respuestas en esta especie. Este modelo se ha utilizado para definir los factores en la córnea que son responsables del estado de privilegio inmune relativo de este tejido que permite a los aloinjertos corneales sobrevivir al rechazo agudo en ausencia de terapia inmunosupresora. También se ha utilizado para definir aquellos factores que son más importantes en el rechazo de tales aloinjertos. En consecuencia, gran parte de lo que sabemos sobre los mecanismos de aceptación y rechazo del aloinjerto corneal se debe a los estudios que utilizan un modelo murino de trasplante de córnea. Además de describir un modelo de rechazo agudo del aloinjerto corneal, también presentamos por primera vez un modelo de rechazo tardío del aloinjerto corneal.

Introducción

El trasplante de córnea es uno de los tipos más comunes de éxito y el trasplante realizados en seres humanos. Las razones por las que se realiza esta cirugía son resultado de una lesión, enfermedad infecciosa 1, u otras formas de enfermedad de la córnea no infecciosa 2. Las cifras de la Asociación de Bancos de Ojos de América indican que más de 46.000 se realizaron en 2011 (véase el sitio web en: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). Una indicación de su éxito es que las tasas de fracaso durante un año por injertos corneales alogénicas van desde 10 a 15% a los 5 años y el éxito es superior al 70% 3-8. Como muchos estudios han de....

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Protocolo

NOTA: Todos los animales utilizados en este procedimiento son tratados de acuerdo con la Asociación para la Investigación en Visión y Oftalmología declaración para el uso de animales en Oftálmica y Visión de Investigación, así como las directrices establecidas por el comité de supervisión de los animales en la Universidad de Saint Louis.
NOTA: Todos los instrumentos y soluciones quirúrgicas se esterilizan antes de la cirugía para limitar la infección microbiana del ojo. Cabe señalar que, si bien los animales experimentan un poco de dolor de este procedimiento, no nos empleamos a los analgésicos. La razón de esto se debe a que todos los analgésicos son antiinfl....

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Resultados

El modelo murino de trasplante de córnea ha sido utilizado durante más de 20 años con éxito para caracterizar los mecanismos tanto de rechazo del aloinjerto corneal 19-23 y la aceptación del aloinjerto de la córnea 13, 15,16,18, 24-27. Este modelo se utilizó para establecer la importancia de la expresión de FasL en la aceptación del aloinjerto corneal, en que los animales que carecen de FasL no fueron capaces de aceptar aloinjertos de córnea 15. También se ha utilizado para demostrar que.......

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Discusión

El modelo murino de trasplante de córnea aquí descrito permite al investigador estudiar el rechazo del aloinjerto corneal humano en un modelo que es predictivo de los factores que se asocian tanto con mejor rechazo 15,17,18,20, 26-30 y 21-25 de la aceptación de la córnea aloinjertos. A diferencia de trasplante de córnea humana, en el que los pacientes reciben tratamiento con esteroides, ya sea tópica o sistémica para tratar o prevenir el rechazo 31, este modelo se utiliza típicamente par.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen intereses financieros contrapuestos.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer a las muchas personas que han trabajado y perfeccionado esta técnica y han sido responsables de la generación de muchos manuscritos tanto en este laboratorio como en otros. Este trabajo contó con el apoyo de los Institutos Nacionales de Salud (NIH, por sus siglas en inglés) EY12707 y una subvención sin restricciones de Investigación para Prevenir la Ceguera del Departamento de Oftalmología.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Microscopio quirúrgico ZeissZeissRebuilt
1 ml JeringaBD 305122
3 ml JeringaBD 309657
10 ml JeringaBD309602
Vannus TijerasStortzE-3387
11-0 SuturasAlcon717939M
Trephine 2.0 mmKatenaK 2-7520
Trephine 1.5 mmKatenaK 2-7510
Clorhidrato de Tricaína 0.5%AlconNDC 0065-0741-12
HealonAbbottPinzas Healon OVD
FST11251-20
7-0 SuturasAlcon8065
2.5% Fenilefrina HClAlconNDC 61314-342-02
1% TropicamidaBausch & LombNDC-24208-585-59
Jeringa HamiltonHamilton 7654-01
aguja de calibre 33Hamilton90033
Colador de celdas (100 μ m nylon)BD Falcon352360
HemocitómetroCardinal HealthB3175
Trypan BlueSigmaT8154

Referencias

  1. Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
  2. Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (201....

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