Este método fue desarrollado con el objetivo de ofrecer una solución de fármaco constante a través de la arteria carótida, para evaluar la farmacocinética de nuevos fármacos en modelos de ratón.
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Artículo de método
Infusiones de la arteria carótida para farmacocinéticas y farmacodinámicas Análisis de taxanos en ratones
En este artículo
Resumen
Resumen
Al proponer el uso de un fármaco, combinación de fármacos, o la administración de fármacos en un sistema novedoso, se debe evaluar la farmacocinética del fármaco en el modelo de estudio. Como el uso de modelos de ratón son a menudo un paso vital en el descubrimiento de fármacos y desarrollo de fármacos preclínica 1-8, es necesario diseñar un sistema para introducir fármacos en ratones en una manera uniforme, reproducible. Idealmente, el sistema debería permitir la recogida de muestras de sangre a intervalos regulares durante un curso de tiempo establecido. La capacidad de medir las concentraciones de fármaco por espectrometría de masas, ha permitido a los investigadores a seguir los cambios en los niveles de fármaco en plasma con el tiempo en ratones individuales 1, 9, 10. En este estudio, el paclitaxel se introdujo en ratones transgénicos como una infusión continua a lo largo de tres arterial hora, mientras que las muestras de sangre fueron tomadas simultáneamente por sangrados retro-orbital en los puntos de tiempo establecidos. Infusiones arteria carótida son una alternativa potencial para infusiones vena yugular, cuando factores tales comotumores mamarios u otros obstáculos hacen infusiones yugulares poco práctico. Usando esta técnica, las concentraciones de paclitaxel en el plasma y el tejido lograron niveles similares en comparación con la infusión yugular. En este tutorial, vamos a demostrar cómo cateterizar con éxito la arteria carótida mediante la preparación de un catéter optimizado para el modelo individual del ratón, a continuación, mostrar cómo insertar y asegurar el catéter en la arteria carótida del ratón, pase el extremo del catéter a través de la parte posterior del cuello del ratón, y conectar el ratón a una bomba para suministrar una velocidad controlada de afluencia de drogas. Múltiples bajo volumen hemorragias retro-orbital permiten el análisis de las concentraciones plasmáticas del fármaco a través del tiempo.
Introducción
Infusión de medicamentos a través de la carótida se puede realizar de forma fiable y reproducible por el equipo y la técnica la optimización. El procedimiento no es complicado, aunque sí requiere un control preciso y la atención al detalle. Superior cuidado y destreza se necesitan para aislar la arteria carótida e insertar el catéter, lo que generalmente se puede adquirir a través de la práctica. Cirugía por un técnico con experiencia no debe ser superior a una hora. Después de la cirugía con éxito, el ratón debe aparecer normal y saludable (aunque el ratón puede reaccionar a la infusión de fármaco real), y el fármaco (s) pueden administrarse en una forma controlada,....
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Protocolo
Este protocolo ha sido aprobado por el Comité de Animales Cancer Center Institucional de Cuidado y Uso de Fox Chase y por el Fondo para los Animales de Laboratorio, y se encontró que de acuerdo con las directrices institucionales para el tratamiento humanitario de los animales.
1. Preparación Preliminar
- Preparación de catéter: Preparar un catéter de una longitud corta de tubo de polietileno, modificado para formar un adelgazada, el extremo romo (Figura 3A). Hacer múltiples catéteres con antelación y guardar indefinidamente.
- Enciende un mechero Bunsen, y ajuste para establecer una llama estable bajo. So....
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Resultados
Paclitaxel distribución sigue patrones predecibles durante un régimen de dosificación 3 h de una infusión de 15 min de alta velocidad, seguido de una infusión de 165 min a baja velocidad.
La Figura 1 muestra una comparación de la vena de la infusión de paclitaxel concentraciones de plasma yugular y la arteria carótida-infusiones. Las concentraciones de paclitaxel caen rápidamente en los primeros 15 minutos después de una infusión inicial de alto volumen, y luego se estabiliz.......
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Discusión
Infusión de la arteria carótida es una técnica importante en este estudio de farmacocinética de paclitaxel. Infusión de la arteria carótida es un método para distribuir rápidamente drogas en todo el sistema circulatorio 14. El 3 hr de infusión es un imitador más cerca de la administración clínica de los medicamentos tales como taxanos que las inyecciones en bolo. La cirugía se puede realizar de forma fiable por una sola persona, el tiempo de cirugía es relativamente corto, y las tasas de éxito son> 75%. De.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Nos gustaría reconocer el Fondo FCCC Animales de Laboratorio, por su apoyo en este proyecto. Damos las gracias a Wolfe Laboratories, Inc. por su asistencia en el análisis de los niveles de paclitaxel en el plasma y el tejido. Esta labor fue apoyada por los Institutos Nacionales de Salud subvenciones K01CA120091 a EHB, y CA06927 a Fox Chase Cancer Center.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Tubo de polietileno 0.024" Diámetro exterior x 0,011" ID | Braintree Scientific, Inc. | PE10 | |
| 3 Agujas desafiladas (calibre 30) | Braintree Scientific, Inc. | NB-30 | |
| Enchufe de puerto de acero inoxidable (calibre 28) | Braintree Scientific, Inc. | PP-28 | Ligeramente más grande que el diámetro interior del tubo de PE, para ajustarse perfectamente y mantener un sello hermético. |
| 2 enchufes de conector de acero inoxidable (calibre 30) | Braintree Scientific, Inc. | C-30 | |
| Tres jeringas de 1 cc | Becton, Dickinson and Co. | ||
| Solución salina estéril al 0,9% | Hospira | 0409-7984-37 | |
| Cath-Loc HGS Solución de heparina/glicerol | Braintree Scientific, Inc. | HGS | |
| Braintree Scientific, Inc. | SUT-S 113 | ||
| Tijeras Vanna (microtijeras) | World Precision Instruments | 14122 | Este modelo tiene una punta curvada, pero las tijeras de punta recta también funcionan. |
| Pinzas hemostáticas Hartman Mesquito | World Precision Instruments | 501705 | |
| Betadine Swabsticks | Perdue Products L.P. | BSWS1S | |
| Bupivacaína | Hospira | 0409-1160-01 | Puede ser reemplazado con lidocaína o anestesia local similar. |
| Paclitaxel | LC Laboratories | P-9600 | |
| Metanol | Sigma-Aldrich | 32213 | |
| Tubos capilares de microhematocrito, heparinizados | Fisher Scientific | 22-362-566 | |
| Sellador de tubos microcapilares | Ratones Fisher Scientific | 02-678 | |
| C57BL/6J | Fox Chase Cancer Center, Instalación de animales de laboratorio | ||
| internamente | Biosystems Applied Biosystems |
Referencias
- Gallo, J. M., Li, S., Guo, P., Ma Reed, K., J, The Effect of P-Glycoprotein on Paclitaxel Brain and Brain Tumor Distribution in Mice. Cancer Research. 63 (16), 5114-5117 (2003).
- Sonnichen, D. S., Relling, M. V. Clinical Pharmacokinetics of Paclitaxel. Clinical Pharmaco....
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Reimpresiones y permisos
Etiquetas
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