Caracterización del tejido después de un nuevo método de desagregación para la piel micro-injertos Generación

Summary

El protocolo describe un nuevo método para desagregar los tejidos humanos y para crear autólogas micro-injertos que, combinado con esponjas de colágeno, dan lugar a complejos biológicos humanos listos para su uso en el tratamiento de lesiones de la piel. Además, este sistema preserva la viabilidad celular de micro-injertos en diferentes momentos después de la disgregación mecánica.

Abstract

Varios de los nuevos métodos han sido desarrollados en el campo de la biotecnología para obtener suspensiones celulares autólogas durante la cirugía, con el fin de proporcionar uno tratamientos paso para lesiones de la piel agudas y crónicas. Por otra parte, el tratamiento de las heridas agudas crónicas, sino también como resultado de un traumatismo, diabetes, infecciones y otras causas, sigue siendo un reto. En este estudio se describe un nuevo método para crear autólogas micro-injertos de tejido cutáneo de un solo paciente y su aplicación clínica. Por otra parte, también se llevó a cabo la caracterización biológica in vitro de tejido cutáneo derivadas de la piel, la dermis de-epidermized (DED) y la dermis de múltiples órganos y / o donantes de múltiples tejidos. Todos los tejidos se desagregan por este nuevo protocolo, que nos permite obtener micro-injertos viables. En particular, se informó de que este innovador protocolo es capaz de crear bio-complejos compuestos por autólogas micro-injertos y esponjas de colágeno lista para ser aplicada sobre lesiones en la piel. el CliniTambién se informó de aplicación cal de autólogas bio-complejos en una lesión de la pierna, mostrando una mejora tanto de proceso de re-epitalization y suavidad de la lesión. Además, nuestro modelo in vitro mostraron que la viabilidad celular después de la disgregación mecánica con este sistema se mantiene en el tiempo para un máximo de siete (7) días de cultivo. También se observó, por citometría de flujo análisis, que el grupo de células obtenidas de desagregación se compone de varios tipos de células, incluyendo células madre mesenquimales, que ejercen un papel clave en los procesos de regeneración y reparación de tejidos, por su alto potencial de regeneración. Por último, hemos demostrado in vitro que este procedimiento mantiene la esterilidad del micro-injertos cuando se cultiva en placas de agar. En resumen, se concluye que este nuevo enfoque regenerativo puede ser una herramienta prometedora para los médicos para obtener en un solo paso viable, estéril y listo para usar micro-injertos que se pueden aplicar solos o en combinación con más Scaffo biológica comúnLDS.

Introduction

En los últimos años, varios métodos nuevos han sido desarrollados en el campo de la biotecnología para obtener suspensiones celulares autólogas durante la cirugía con el fin de proporcionar tratamientos de un solo paso para lesiones de la piel agudas y crónicas. Por otra parte, el tratamiento de las heridas agudas pero sobre todo crónicas que resultan de un traumatismo, diabetes, infecciones y otras causas, sigue siendo un reto. Hay una creciente evidencia de que las heridas crónicas se han convertido en un grave problema de salud mundial, provocando una enorme carga financiera para los sistemas sanitarios en todo el mundo ^1.

Protocol

Declaración de la ética: desde la aplicación clínica del protocolo requiere el uso de tejido autólogo cutánea del paciente, su caracterización in vitro se realizó antes de su uso clínico en el tejido cutáneo homóloga en el Bank Emilia Romagna Regional de la piel siguiendo las directrices de las normas nacionales sobre la recolección, procesamiento y distribución de tejidos para trasplante (CNT 2013).

1. Edificio Bio-complejo para la aplicación clínica

NOTA: Este protocolo se basa en el uso clínico de Rigeneracons (disruptores tejido) y la máquina Rigenera (sistema disruptor de tejidos) (Figura 1....

Results

En este estudio preliminar, el primer objetivo fue investigar la capacidad de las micro-injertos autólogos humanos combinados con un soporte biológico, como el colágeno, para producir bio-complejos listos para usar. Estos bio-complejos fueron implantados en un paciente con una lesión de la pierna causada por un accidente de coche (Figura 2A) y una reepitelización completa asociada con la reparación de tejidos después de 30 días

Discussion

Este estudio preliminar demostró que micro-injertos obtenidos por este protocolo se pueden combinar con esponjas de colágeno, como ya se ha informado en otras aplicaciones clínicas, para optimizar la eficacia de los implantes de micro-injertos ^{9, 10.} En particular, este estudio informó de la capacidad de bio -complexes, constituido por micro-injertos y esponjas de colágeno, el tratamiento adyuvante de la cicatrización de la herida de una lesión de la pierna después de 30 días a partir de la aplicación clínica.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Máquina Rigenera	Onda Cerebral Humana	79210R
Rigeneracons	Onda Cerebral Humana	79450S
MTT	Roche Diagnostic GmbH	11465007001
Medio RPMI	PBI International	733-2292
DMEM medio	PBI International	F 0415
Antibióticos	Biológicos Industrias PBI	03-038-1
Anticuerpos para el análisis de FACS código	eBiosciences	para CD146-P; código 17-0349  para CD34-APC
Columbia agar	BioMerieux Company	43041
Condress®	Abiogen Pharma		utilizada para biocomplejos
DMSO	Bioniche Pharma USA LLC, Lake Forest, IL
Solución de NaCl	Fresenius Kabi, Bad Homburg, Alemania
Xileno	Carlo Erba