La utilización de los tumores derivados del paciente en un modelo preclínico subcutánea es una manera excelente para estudiar la eficacia de nuevas terapias, el descubrimiento de biomarcadores predictivos y vías resistentes a los fármacos. Este modelo, en el proceso de desarrollo de fármacos, es fundamental para determinar el destino de muchas nuevas terapias contra el cáncer antes de la investigación clínica.
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Artículo de método
Desarrollo y mantenimiento de un tumor del paciente preclínicos Derivado modelo de xenoinjerto para la Investigación de Novela Anti-Cancer Therapies
En este artículo
Resumen
Resumen
Los modelos de xenoinjerto tumoral derivado del paciente (PDTX) proporcionan una plataforma necesaria para facilitar el desarrollo de fármacos contra el cáncer antes de los ensayos en humanos. Los trozos de tumores humanos se inyectan por vía subcutánea en ratones desnudos atímicos (inmunocomprometidos, deficientes en células T) para crear un banco de tumores y, posteriormente, se pasan a diferentes generaciones de ratones con el fin de mantener estos tumores de los pacientes. Es importante destacar que la heterogeneidad celular del tumor original se emula estrechamente en este modelo, que proporciona un modelo clínicamente más relevante para la evaluación de estudios de eficacia de fármacos (agente único y combinación), análisis de biomarcadores, vías de resistencia y biología de células madre cancerosas. Algunas limitaciones del modelo PDTX incluyen el reemplazo del estroma humano por estroma de ratón después de la primera generación en ratones, la incapacidad de investigar los efectos del tratamiento sobre la metástasis debido a las inyecciones subcutáneas de los tumores y la falta de evaluación de inmunoterapias debido al uso de ratones inmunocomprometidos. Sin embargo, incluso con estas limitaciones, el modelo PDTX proporciona una potente plataforma preclínica en el proceso de descubrimiento de fármacos.
Introducción
El cáncer colorrectal (CCR) es un importante contribuyente a las muertes por cáncer en los Estados Unidos. En 2015, había un estimado de 132.700 nuevos casos de CCR con 49.700 muertes 1. Aunque el pronóstico en pacientes con enfermedad localizada es excelente, los pacientes con enfermedad avanzada tienen resultados pobres, haciendo de esta una de las principales prioridades en el desarrollo de nuevas terapias. A pesar de los regímenes estándar de cuidado quimioterapéuticos y biológicos más nuevos que se implementan contra esta enfermedad, sólo ha habido un aumento gradual en la supervivencia global. En consecuencia, hay un esfuerzo significativo en la comp....
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Protocolo
Declaración de Ética: las muestras de tumor de adenocarcinoma colorrectal derivados de los pacientes se obtuvieron de pacientes que consienten en la Universidad de Colorado Hospital, de acuerdo con un protocolo aprobado por la Junta de Revisión Institucional múltiple Colorado (08 a 0439). Todo el trabajo de los animales se realizó en animales protocolos aprobados por la Universidad de Colorado en Denver Institucional Cuidado de Animales y el empleo Comisión (IACUC, Protocolo # 51412 (06) 1E y 96813 (04) 1E).
1. Recepción y Preparación de la sangre del paciente
- Recoger 1 - 2 ml de sangre en un tubo de separación de sangre / célu....
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Resultados
Similitudes de mutaciones comunes en los modelos CRC PDTX y el TCGA
Hemos investigado si el porcentaje de mutaciones comunes (KRAS, las ANR, BRAF, PIK3CA, APC, CTNNB1 y TP53) en el banco CRC PDTX eran representativas de la frecuencia de mutación se observa en la población de pacientes de CRC. Como se muestra en la Figura 2A (TCGA) y B (CRC banco PDTX), la frecuencia d.......
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Discusión
La plataforma de descubrimiento de fármacos PDTX ofrece un modelo mejorado de las deficiencias de otros modelos preclínicos que son poco fiables para predecir la actividad clínica de nuevos compuestos. Es importante destacar que los tumores en este modelo son biológicamente estable, retener potencial metastásico, y muestran la capacidad de respuesta droga similar de generación en generación. En este modelo, los tumores de pacientes derivada se inyectan en ratones desnudos atímicos, pases, y posteriormente utilizados en .......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este trabajo fue financiado por la subvención 1R01CA152303-01.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| RPMI o DMEM | Corning | 10-040-CV | |
| Penicilina-Estreptomicina | Corning | 30-002-CI | |
| Aminoácidos no esenciales | Corning | 25-025-CI | |
| Suero fetal bovino | Corning | 35-010-CV | Descongelación en -4 & grados; C, luego actívelo durante 30 minutos a 60 ° C Baño de agua |
| CPT tubo de sangre BD | vacutainer | 362761 | |
| Tubo de microcentrífuga | Surelock | A-7002 | |
| solución salina tamponada con fosfato | Corning | 21-040-CV | |
| Viales cirogénicos | Cyroking | C0732901 | |
| plato de plástico para cortar tumores | Trueline | TR4001 | |
| Tijeras | Roboz | Pinzas RS-5881 | |
| Roboz | RS-5135 | ||
| Matrigel (mezcla de proteínas gelatinosas) | Corning | 354234 | Almacenar a -20 o -80 & grados; C, luego descongele en hielo, no deje en RT |
| tazas de formalina al 10% | Protocolo | 032-059 | |
| Almacenamiento de nitrógeno líquido Dewar | Thermolyne | CY50900 | |
| Nitrógeno líquido portátil dewar | Nalgene | 4150-2000 | |
| Dimetilsulfóxido | Fischer | 67-68-5 | |
| Contenedor de congelación: Mr Frosty | Nalgene | 5100-0001 | |
| Alcohol isopropílico | Decon | 64-17-5 | |
| Trocars | Innovative Research of America | MP-182 | |
| Máquina de anestesia | Patterson Caja | ||
| Patterson Isoflurano | |||
| veterinario Vet uno | 1038005 | ||
| Bote de aire F-Air | Bickford Omnicon | 80120 | |
| Meloxicam | Vet one | 5182-90C | |
| Pinzas | Fowler | 54-100-167 | |
| Báscula | Ohaus | Scout Pro SP601 |
Referencias
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. 2015. CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).
- Comprehensive molecular characterization of human colon and rectal cancer. Nature. 487 (7407), 330-337 (2012).
- Arcaroli, J. J., et al.
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Reimpresiones y permisos
