La confirmación de la isquemia miocárdica y reperfusión en ratones utilizando electrocardiografía de superficie del cojín

Resumen

Durante la cirugía de isquemia/reperfusión miocárdica murina, la colocación correcta de la ligadura oclusiva suele confirmarse mediante la observación visible de la palidez miocárdica. En este trabajo, se demuestra un método de confirmación electrocardiográfica de la isquemia y la reperfusión, para complementar la palidez miocárdica observada, en ratones machos C57Bl/6.

Resumen

Se han establecido muchos modelos animales para el estudio del remodelado miocárdico y la insuficiencia cardíaca debido a su estatus como la causa número uno de mortalidad en todo el mundo. En los seres humanos, se forma una oclusión patológica en una arteria coronaria y la reperfusión de esa arteria ocluida se considera esencial para mantener la viabilidad del miocardio en riesgo. Aunque es esencial para la recuperación del miocardio, la reperfusión del miocardio isquémico crea su propia lesión tisular. La respuesta fisiológica y la curación de una lesión por isquemia/reperfusión es diferente de una lesión por oclusión crónica. La lesión por isquemia/reperfusión miocárdica está ganando reconocimiento como un modelo clínicamente relevante para los estudios de infarto de miocardio. Por esta razón, los modelos animales paralelos de isquemia/reperfusión son vitales para avanzar en la base de conocimientos sobre la lesión miocárdica. Típicamente, la isquemia del corazón del ratón después de la oclusión de la arteria coronaria descendente anterior izquierda (LAD) se confirma por la palidez visible del miocardio debajo de la oclusión (ligadura). Sin embargo, esto solo ofrece una forma subjetiva de confirmar la colocación correcta o consistente de la ligadura, ya que hay múltiples arterias principales que podrían causar palidez en diferentes regiones miocárdicas. Un método de registro de los cambios electrocardiográficos para evaluar la correcta colocación de la ligadura y la isquemia resultante, así como la reperfusión, para complementar la palidez miocárdica observada, ayudaría a obtener tamaños de infarto consistentes en modelos de ratón. A su vez, esto ayudaría a disminuir el número de ratones utilizados. Además, los cambios electrocardiográficos pueden seguir registrándose de forma no invasiva y dependiendo del tiempo después de la cirugía. En este artículo se demostrará un método para confirmar electrocardiográficamente la isquemia miocárdica y la reperfusión en tiempo real.

Introducción

Las enfermedades del corazón siguen siendo la causa principal de muerte en todo el mundo ^1,2. No sólo es el ventrículo izquierdo (LV) de la cámara de más muscular, responsable de bombear sangre desde el corazón a todo el cuerpo ^3, es un sitio común la lesión cardiaca post-infarto de miocardio ^4. la muerte del tejido del ventrículo izquierdo a menudo resulta en insuficiencia cardíaca sistólica. Los modelos animales de enfermedades del corazón son imprescindibles para el avance de la investigación biomédica cardiovascular. La cepa C57BL / 6 ratones de haber sido una opción popular para los modelos animales debido a su tiempo de reproduc....

Protocolo

Todos los procedimientos quirúrgicos realizados en animales deben llevarse a cabo de conformidad con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio ¹³ u otras directrices éticas apropiadas. Los protocolos deben ser aprobados por el comité de bienestar de los animales en la institución apropiada antes de continuar.

1. Preparación para el ECG

NOTA: Antes de comenzar, se pongan el equipo de protección personal, incluyendo guantes, gafas y bata de laboratorio limpia o bata desechable.

1. Limpie la almohadilla de ECG utilizando un no-alcohol y solución de descontaminación no basado en l....

Resultados

Un ECG normal de murino se muestra en la Figura 2 con los marcadores alfabéticos para eventos eléctricos P, Q, R, S, T. J y P es la despolarización auricular inicial. QRS es la onda de despolarización en los ventrículos. J es la repolarización temprana y T representa la repolarización heterogénea también conocida como la recuperación ^11. Cabe señalar que muchos laboratorios no utilizan la nomenclatura de onda J y en lugar de referirse a la SJT-segmento que el .......

Discusión

El uso de cambios en el ECG como un método complementario para la confirmación de la isquemia miocárdica y la reperfusión asegura la colocación precisa de la ligadura de oclusión. La exactitud de la colocación de ligadura es fundamental para reducir la variabilidad de los datos entre los animales. El LAD en un corazón de ratón es una arteria difícil de visualizar. Por lo tanto, que complementa palidez visual con cambios electrocardiográficos ayudará a asegurar la colocación correcta del daño a los tejidos y ligadura res.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Vevo 1100	Fujifilm Visual Sonics		Máquina de ecocardiografía
Placa de manipulación de ratón	Fujifilm Visual Sonics		Placa de ECG calefactada
Signa-Gel
Gel multielectrodo	Parker	15-25	electrolito de propósito
	3M	1527-0
PI-Spray II	Innovaciones farmacéuticas	NDC 36-2013-25	Agente de limpieza para placa de ECG
C57Bl6 Ratones	The Jackson Laboratory	000664	Hombre, 8 - 12 semanas
IsoThesia-Isoflurano	Henry Schein	NDC 1169-0500-1
Excel	Microsoft
Systane Ungüento Ocular Lubricante Nocturno	Alcon	65050935
7-0 Suturas de seda Perma-Hand	Ethicon	640.O32
5-0 Suturas de seda Perma-Hand	Ethicon	K809. O32
Tijeras quirúrgicas	ROBOZ	RS-5881
Pinzas	Herramientas de ciencia fina	11052-10
Gasa	Bio Nuclear Diagnostics Inc	DIS-022B
Portaagujas	Herramientas de ciencia fina	12565-14
Buprenex CIII	Patterson Veterinary	0-891-9756	Analgésico de clorhidrato de buprenorfina
Productos Betadine	Purdue	67618-150-08
Iglesia de Nair	y Dwight Co.	NRSL-22339-05

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