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Artículo de método

La interposición de la vena del modelo: un modelo adecuado para estudiar la permeabilidad del injerto de bypass

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DOI:

10.3791/54839

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15 de enero de 2017

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En este artículo

Resumen

Este video muestra un modelo para estudiar el desarrollo de la hiperplasia miointimal después de la cirugía de interposición venosa en ratas.

Resumen

El injerto de derivación es un método de tratamiento establecido para la enfermedad de las arterias coronarias. La permeabilidad del injerto sigue siendo el talón de Aquiles de los injertos de vena safena. Los modelos de investigación para el fracaso del injerto de derivación son esenciales para una mejor comprensión de los procesos patobiológicos y fisiopatológicos durante la pérdida de permeabilidad del injerto. Los modelos animales grandes, como los cerdos o las ovejas, se asemejan a las estructuras anatómicas humanas, pero requieren instalaciones y equipos especiales. Este video describe un modelo de interposición de venas de rata para investigar la pérdida de permeabilidad del injerto de vena. Las ratas son baratas y fáciles de manejar. En comparación con los modelos de ratón, el tamaño conveniente de las ratas permite una mejor operatividad y permite obtener una cantidad suficiente de material para análisis más diversos. En resumen, se extrae la vena epigástrica inferior de una rata donante y se utiliza para reemplazar un segmento de la arteria femoral. La anastomosis se lleva a cabo a través de puntos individuales y se sella con cola de fibrina. La permeabilidad del injerto se puede monitorizar de forma no invasiva mediante ecografía dúplex. La hiperplasia miointimal, que es la principal causa de pérdida de permeabilidad del injerto, se desarrolla progresivamente con el tiempo y puede calcularse a partir de cortes transversales histológicos.

Introducción

enfermedades de las arterias coronarias y sus complicaciones se encuentran entre las principales causas de muerte en todo el mundo. estrategias terapéuticas actuales se centran en restablecer el flujo de sangre, ya sea mediante la dilatación del vaso estrechado o mediante la creación de un bypass. Cirugía de revascularización coronaria (CABG) usando autoinjertos venosos fue descrita por primera vez en 1968 y ha sido perfeccionado a lo largo de los años. Aparte de la revascularización de la arteria descendente anterior coronaria, conductos de vena safena son los más utilizados 1. Sin embargo, la permeabilidad del injerto sigue siendo el talón de Aquiles de ....

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Protocolo

Los animales recibieron atención humanitaria de conformidad con la Guía para los Principios de Animales de Laboratorio, preparado por el Instituto de Recursos Animales de Laboratorio y publicadas por los Institutos Nacionales de Salud. Todos los animales protocolos fueron aprobados por la autoridad local responsable ( "Amt für Gesundheit und Verbraucherschutz, Hansestadt (Oficina para la Salud y Protección del Consumidor) Hamburgo").

1. Cuidado de Animales

  1. Obtener ratas ratas Lewis (LEW / Crl) y ratas transgénicas ROSA / luciferasa-LEW un peso de 300-350 g en el Instituto de Animales de Laboratorio.
  2. Mantenga las ratas....

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Resultados

El modelo de la interposición de vena rata es adecuado para estudiar el desarrollo de la hiperplasia myointima y el fracaso del injerto venoso. Los animales se recuperan bien de la cirugía y muestran una excelente condición física después de la operación. La Figura 1 muestra los pasos quirúrgicos clave. Después de la incisión de la piel a lo largo de los inguinalis linea, la vena superficial epigástrico y la arteria femoral se identifican (Figura 1A). La recolección del injerto debe rea.......

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Discusión

Este video muestra una vena modelo de interposición de rata para investigar la pérdida del injerto de vena y para permitir la exploración de los procesos patológicos subyacentes y el ensayo de nuevos fármacos u opciones terapéuticas.

La anestesia es un aspecto crucial de los procedimientos quirúrgicos. Se recomienda un sistema de anestesia por inhalación continua, ya que este es un método seguro y fácil, especialmente durante las operaciones prolongadas. Esto puede ser de gran importancia du.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores agradecen a Christiane Pahrmann por su asistencia técnica. Este estudio fue financiado por la Deutsche Stiftung für Herzforschung (F / 28/14). DW fue apoyada por el premio de viaje de la Sociedad Internacional de Trasplante de Corazón y Pulmón. TD recibió el Else Kröner excelencia estipendio del Else-Kröner-Fresenius-Stiftung (2012_EKES.04). SS recibido becas de investigación de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG; DE2133 / 2-1, TD y SCHR992 / 3- 1, SCHR992 / 4-1, SS).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Rata LEW/CrlCharles RiverNúmero de inventario 004
Rata LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor- 1
luc)11Jmsk
Instituto de animales de laboratorio, Universidad de Kioto, JapónNBPR número de rata 0299http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/
PFA 4%Ciencias de la Microscopía Electrónica#157135S20%
cortadora de peloWAHL8786-451A ARCO SE
ForeneAbbViePZN 10182054 Art.Nr.: B506Pinza microquirúrgica de isoflurano
Fine Science Tools18055-04Micro-Serrefine - Aplicador de
pinzaFine Science Tools18056-14
crema depilatoriaRufin cosmético27618
Povidona-YodoBetadine Purdue PharmaNDC:67618-152
10-0 Sutura de EthilonEthicon2814G
5-0 Sutura de proleneEthiconEH7229H
RimadylPfizer400684.00.00Carprofeno
NovaminsulfonRatiopharmPZN 03530402Metamizol
HeparinaRotexmedicaPZN: 386234025.000 I.E./ ml
Xilocaína 1%AstraZenecaPZN: 1137907Lidocaína
EVICELJ& J Med.Ethicon BiosurPZN 7349697 Nº de artículo:EVK01DEcola de fibrina
NaCl 0.9%B.BraunPZN 06063042 Nº de art.: 3570160
sistema de microimagen de alta resolución Vevo 770 in vivoEcografía dúplexVisualSonics
Ecogel 100 gel de ultrasonidoEco-med30GB
D-Luciferin Firefly, sal de potasioBiosynthL-8220
PBS pH 7.4Gibco10010023
Xenogen Ivis 200Perkin ElmerImágenes de bioluminiscencia
Weigerts Kit de hematoxilina de hierroMerck1.15973.0002Tinción tricrómica
Resorcine-Fucsina WeigertWaldeck2.00E-30Tinción tricrómica
Fucsina ácidaSigma-AldrichF8129-25GTinción tricrómica
Solución de Ponceau SServa Electroforesis33427Tinción tricrómica
AzophloxinWaldeck1B-103Tinción tricrómica
Hidrato de ácido molibdatofosfóricoMerck1.00532.0100Tinción tricrómica
Naranja GWaldeck1B-221Tinción tricrmática
Verde Claro SFWaldeck1B-211Tinción tricrómica
Vitro-CludLangenbrinck04-0001
Ácido acético glacialSigma-Aldrich537020
37% HClSigma-AldrichH1758
XilenoTh. Geyer3410
ParafinaLeica biosystemsREF 39602004
Etanol absolutoTh. Geyer2246
Etanol 96%Th. Geyer2295
Etanol 70%Th. Geyer2270
Bandeja deslizanteTed Pella21057
Plato de tinciónTed Pella21075
Bepanthen Pomada para ojos y narizBayer1578675ungüento para los ojos
de 4 mm

Referencias

  1. Sabik, J. F., 3rd, Understanding saphenous vein graft patency. Circulation. 124, 273-275 (2011).
  2. Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary arte....

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