Este artículo describe cómo realizar la derivación cardiopulmonar en ratones. Este nuevo modelo facilitará la investigación de los mecanismos moleculares implicados en el daño del órgano.
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Artículo de método
Puente cardiopulmonar en un modelo de ratón: un nuevo enfoque
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En este artículo
Resumen
Resumen
Como bypass cardiopulmonar prolongada se vuelve más esencial durante intervenciones cardiológicas, se presenta una demanda creciente de la clínica para la optimización del procedimiento y para reducir al mínimo daño a los órganos resultantes de la circulación extracorpórea prolongada. El objetivo de este trabajo fue demostrar un modelo completamente funcional y clínicamente relevante de puente cardiopulmonar en un ratón. Divulgamos sobre el diseño del dispositivo de optimización de circuito de perfusión y técnicas microquirúrgicas. Este modelo es un modelo agudo, que no es compatible con la supervivencia debido a la necesidad de múltiples dibujos de sangre. Debido a la gama de herramientas disponibles para los ratones (p. ej., marcadores, agujeros ciegos, etc.), este modelo facilitará la investigación sobre los mecanismos moleculares de daño del órgano y el efecto de puente cardiopulmonar en relación con otros comorbilidades.
Introducción
Desde la introducción en la clínica de puente cardiopulmonar (CPB), jugó un papel esencial en la cirugía cardíaca1. En la cirugía cardiaca moderna, tiempo de CEC prolongado es esencial para llevar a cabo reconstrucciones aórticas extensa y procedimientos combinados. Aunque los avances tecnológicos han sido tremendos, el uso de circulación extracorpórea se asocia con intra y postoperatorias sistémicas y daño de órgano local2,3.
Grandes modelos animales se han desarrollado para investigar el papel de la CPB en procesos fisiológicos4....
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Protocolo
todos los experimentos con animales se realizaron en cumplimiento de la ley de protección Animal (TierSchG) y fueron aprobados por el Comité de bienestar de los animales locales (Baja Sajonia oficina del estado para la protección de los consumidores y seguridad alimentaria, protocolo TSA 14/1556). El peso mínimo del mouse adecuado para este modelo es de 25 g.
1. preparación preoperatoria
Nota: todos los procedimientos se llevan a cabo en condiciones limpias, no estériles, con instrumentos esterilizados.
- Lugar 50-60 8 cm largo propileno hueco fibras en paralelo en un tubo y conecte con un adap....
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Resultados
Este protocolo describe el circuito de perfusión, procedimientos quirúrgicos y el seguimiento de los parámetros fisiológicos durante la CEC de un ratón. Cuando es realizada por un microsurgeon adecuadamente capacitado, los resultados son consistente y reproducible obtenidos.
Para mantener la perfusión adecuada del tejido, la presión arterial media se mantiene siempre entre 40 y 60 mmHg ajustando el flujo de sangre CPB y añadir v.......
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Discusión
Hemos desarrollado un modelo clínico relevante totalmente funcional de CPC en un ratón. Con más de 30 cepas de ratones con enfermedades cardiovasculares, nuestro modelo podría ser un punto de partida para el desarrollo de nuevos protocolos prospectivos relacionados con el CPB. Por otra parte, debido a la gran cantidad de reactivos específicos de ratón y ratones knockout-hacia fuera, este modelo no sólo puede sustituir el actual modelo de rata de CPB pero facilitará la disección de los mecanismos moleculares implicados en.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Los autores no tienen ninguna agradecimientos.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sterofundin | B.Braun Petzold GmbH | PZN: 8609189 | volumen de cebado, 1:1 con Tetraspan |
| Tetraspan 6% HES Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 05565416 | volumen de cebado, 1:1 con Sterofundin |
| Heparin Natrium 25.000 | Ratiopharm GmbH | PZN: 3029843 | 2,5 UI por ml de solución de cebado |
| NaHCO3 8,4% Solution | B. Braun Melsungen AG | PZN: 1579775 | 3% en solución de cebado |
| KCL 7,45 % Solución | B. Braun Melsungen AG | PZN: 2418577 | 0,1 mL para cardioplejia |
| Carprofeno | Zoetis Inc., EE. UU | PZN: 00289615 08859153 | 5 mg/kg/BW |
| 1 Fr Catéter de PU | Instechlabs INC., EE. UU | C10PU-MCA1301 | arteria carótida |
| 2 Fr Catéter de PU | Instechlabs INC., EE. UU | C20PU-MJV1302 | vena yugular |
| Vasofix catéter de seguridad 20G | B.Braun Medical | 4268113S-01 | intubación orotraqueal |
| 8-0 Sutura de seda trenzada | Ashaway Line & Twine Mfg. Co., USA | 75290 | |
| ligadura Isoflurano | Piramal Critical Care Deutschland GmbH | PZN:9714675 | narcosis |
| CLINITUBES capilares sanguíneos Radiomed | GmbH | 51750132 | muestras de sangre 60 - 95 microlitros |
| Tijeras de resorte - Hojas de 6 mm | Fine Science Tools GmbH | 15020-15 | Instrumentos |
| Tijeras de resorte - Hojas de 2 mm Herramientas de | ciencia fina GmbH | 15000-03 | instrumentos |
| Halsted-Mosquito Hemostático | Fine Science Tools GmbH | 13009-12 | instrumentos |
| Dumont #55 Pinzas | Fine Science Tools GmbH | 11295-51 | instrumentos |
| Castroviejo Micro Portaagujas - 9cm | Fine Science Tools GmbH | 12060-02 | instrumentos |
| Micro Serrefines | Fine Science Tools GmbH | 18555-01 | Instrumentos |
| Bulldog Serrefine | Fine Science Tools GmbH | 18050-28 | instrumentos |
| MiniVent Ventilador para ratones (Modelo 845) | Harvard Apparatus | 73-0044 | ventilación mecánica |
| Vaporizador de isoflurano Drager 19.1 | Drä gerwerk AG & Co. KGaA anestesia | 1.3 - 2.5% | |
| Dispositivo de adquisición de datos PowerLab 4/35 | ADInstruments Ltd, Nueva Zelanda | PL3504 | presión invasiva, ECG, temperatura |
| ABL 800 Flex | Radiometer GmbH | análisis de gases en sangre | |
| ratones NMRI | Charles River Laboratories | Crl:NMRI(Han) | macho, 30 - 35 g, 12 semanas de edad, alojado al menos 1 semana antes del experimento |
Referencias
- Edmunds, L. Cardiopulmonary Bypass after 50 Years. N. Engl. J. Med. 351 (16), 1601-1603 (2004).
- Goto, T., Maekawa, K. Cerebral dysfunction after coronary artery bypass surgery. J. Anesth. 28 (2), 242-248 (2014).
- Uysal, S., Reich, D. L.
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Reimpresiones y permisos
