Láser Doppler: Una herramienta para medir islote pancreático AMPc Microvascular en Vivo

Resumen

Islote pancreático microvascular AMPc regula la distribución de sangre del islote y mantiene la función fisiológica de las células β del islote. Este protocolo describe el uso de un monitor Doppler láser para determinar el estado funcional del islote pancreático AMPc microvascular en vivo y para evaluar las contribuciones de la microcirculación de islotes pancreáticos para enfermedades relacionadas con el páncreas.

Resumen

Como un estado funcional de la microcirculación, AMPc microvascular es importante para el suministro de oxígeno y nutrientes y la eliminación de dióxido de carbono y productos de desecho. La debilitación de la vasomoción microvascular podría ser un paso crucial en el desarrollo de enfermedades relacionadas con la microcirculación. Además, los islotes pancreáticos altamente vascularizado está adaptado para apoyar la función endocrina. En este sentido, parece posible inferir que el estado funcional de islotes pancreáticos microvascular AMPc podría afectar la función de islotes pancreáticos. Analizar los cambios patológicos de la situación funcional de AMPc microvascular islote pancreático puede ser una estrategia factible para determinar las contribuciones que la microcirculación de islote pancreático hace relacionados con enfermedades, como diabetes mellitus, pancreatitis, etcetera. Por lo tanto, este protocolo describe el uso de un monitor de flujo de sangre Doppler de láser para determinar el estado funcional del islote pancreático AMPc microvascular y establecer los parámetros (incluida la perfusión de la sangre media, amplitud, frecuencia y relativa velocidad de AMPc microvascular del islote pancreático) para la evaluación del estado funcional microcirculación. En un modelo de ratón diabético inducida, observamos un estado funcional deterioro de AMPc microvascular del islote pancreático. En conclusión, este enfoque para la evaluación de islote pancreático AMPc microvascular en vivo puede revelar mecanismos relativos a las enfermedades del islote pancreático.

Introducción

Como un parámetro del estado funcional de la microcirculación, AMPc microvascular asume la responsabilidad de la entrega y el intercambio de oxígeno, nutrientes y hormonas y es fundamental para la eliminación de productos metabólicos, tales como dióxido de carbono y residuos celulares ¹. microvascular AMPc también regula la distribución del flujo sanguíneo y la perfusión del tejido, afectando microcirculatoria local de la presión arterial y respuestas a los inflamación, que puede inducir edema en muchas enfermedades. Por lo tanto, es extremadamente importante para mantener la función fisiológica de órganos^2,

Protocolo

Todos los experimentos en animales fueron ejecutados en cumplimiento de todas las directrices pertinentes, regulaciones y agencias reguladoras. El presente Protocolo se demostró fue realizado bajo la dirección y aprobación de la Instituto de microcirculación Animal ética Comité (IMAEC) en el colegio médico Unión de Pekín (PUMC).

1. los animales

1. Antes del inicio del experimento, mantener tres ratones BALB/c por jaula, con temperatura controlada (24 ± 1 ° C) y humedad (55 ± 5%), en un ciclo de luz-oscuridad de 12 h. Permitir que los ratones libre acceso a agua y comida regular.
2. Dividir los ratones, al azar, un grupo de no ....

Resultados

Una fotografía del láser de medición de AMPc microvascular Doppler aparato equipado con un diodo de láser de semiconductor se muestra en la figura 1A. Software de interfaz de usuario se presenta en la figura 1B. Usando el método mencionado anteriormente, los parámetros hemodinámicos de AMPc microvascular islote pancreático fueron detectados de ratones diabéticos y no diabéticos control. Una variedad de técnicas, incluyendo el las.......

Discusión

En los casos que implican la disfunción microvascular (p. ej., diabetes, pancreatitis aguda, enfermedades microvasculares periféricas, etcetera), algunas enfermedades llevan a la reducción del flujo sanguíneo. Aparte de cambios en el flujo de sangre, hay indicadores importantes, como el AMPc microvascular, que reflejan el estado funcional de la microcirculación. El indicador específico, AMPc microvascular, se define generalmente como la oscilación del tono microvascular en lechos microvasculares. En el .......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
MoorVMS-LDF2	Moor Instruments	GI80	PeriFlux 5000 (Perimed Inc.) se puede utilizar como un aparato alternativo para recolectar datos
Software MoorVMS-PC	Moor Instruments	GI80-1	Software de MoorVMS-LDF2
Soporte de calibración	Moor Instruments	calibración	GI-cal
Base de calibración	Moor Instruments	Herramienta de calibración GI-cal
Estándar de flujo de calibración	Moor Instruments	GI-cal	Herramienta de calibración
One Touch UltraEasy glucómetro	Johnson and Johnson	#1955685	Confirmar la hiperglucemia
Tiras One Touch UltraEasy	Johnson and Johnson	#1297006	Confirmar hiperglucemia
Estreptozotocina	Sigma-Aldrich	S0130	Disolver en tampón de citrato de sodio (pH 4,3)
Pentobarbital sódico	Sigma-Aldrich	P3761	Concentración de trabajo 3 %
Etanol	Sinopharm Inc.	200121	Concentración de trabajo 75 %
Sacarosa	Amresco	335	Concentración de trabajo 10 %
Gasa médica	China Health Materials Co.	S-7112	Pinza quirúrgica
de nariz roma	Shang Hai Surgical Instruments Inc.	N-551	Cinta
quirúrgica quirúrgica	3M Company	3664CU
Esponja de gasa	Fu Kang Sen Medical Device CO.	BB5447
Bisturí	Yu Lin Surgical Instruments Inc.	175C	Tijera quirúrgica
la piel	Carent	255-17
Sutura	Ning Bo Surgical Instruments Inc.	3325-77	Jeringa quirúrgica
y aguja de 25 G	MISAWA Inc.	3731-2011	Escala: 1 ml

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