El murino colina deficientes, suplementada con Ethionine (CDE) dieta de modelo de la lesión hepática crónica

Jully Gogoi-Tiwari; Julia Köhn-Gaone; Corey Giles; Dirk Schmidt-Arras; Francis D. Gratte; Caryn L. Elsegood; Geoffrey W. McCaughan; Grant A. Ramm; John K. Olynyk; Janina E.E. Tirnitz-Parker

doi:10.3791/56138

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Artículo de método

El murino colina deficientes, suplementada con Ethionine (CDE) dieta de modelo de la lesión hepática crónica

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DOI:

10.3791/56138

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21 de octubre de 2017

Jully Gogoi-Tiwari¹ , Julia Köhn-Gaone¹ , Corey Giles² , Dirk Schmidt-Arras³ , Francis D. Gratte¹^,⁴ , Caryn L. Elsegood¹ , Geoffrey W. McCaughan⁵^,⁶^,⁷ , Grant A. Ramm⁸^,⁹ , John K. Olynyk¹⁰^,¹¹ , Janina E.E. Tirnitz-Parker¹^,¹²

¹School of Biomedical Sciences & Curtin Health Innovation Research Institute, Curtin University, ²School of Public Health & Curtin Health Innovation Research Institute, Curtin University, ³Institute of Biochemistry, Christian-Albrechts-University, ⁴School of Veterinary and Life Sciences, Murdoch University, ⁵Centenary Institute of Cancer Medicine and Cell Biology, The University of Sydney, ⁶Royal Prince Alfred Hospital, ⁷A.W. Morrow Gastroenterology and Liver Centre, ⁸QIMR Berghofer Medical Research Institute, ⁹Faculty of Medicine and Biomedical Sciences, The University of Queensland, ¹⁰Fiona Stanley and Fremantle Hospitals, ¹¹School of Medical and Health Sciences, Edith Cowan University, ¹²School of Medicine and Pharmacology, University of Western Australia

En este artículo

Resumen

Aquí describimos un método común para inducir lesión hepática crónica en ratones por la alimentación de una dieta de deficiencia de colina y suplementada con ethionine (CDE). Demostramos la vigilancia de la salud, la perfusión hepática, aislamiento y conservación. Un curso de tiempo de seis semanas puede informar sobre la lesión del higado, pathohistology, fibrosis, inflamación y las respuestas de células progenitoras hepáticas.

Resumen

Enfermedades crónicas del hígado, como hepatitis viral, enfermedad del higado alcohólica o enfermedad del hígado graso no alcohólico, se caracterizan por la inflamación continua, progresiva destrucción y regeneración de la célula progenitora de parénquima hepático, hígado proliferación y fibrosis. La fase final de cada enfermedad crónica del hígado es la cirrosis, principal factor de riesgo para el desarrollo de carcinoma hepatocelular. Para estudiar procesos de regulación de la progresión, el establecimiento y la iniciación de la enfermedad, varios modelos animales se utilizan en laboratorios. Aquí describimos un curso de seis semanas de tiempo del deficiencia de colina y suplementada con ethionine (CDE) ratón modelo, que implica la alimentación de seis semanas de edad ratones C57BL/6J machos deficientes en colina chow y 0.15% DL-ethionine-suplido de agua potable. Vigilancia de la salud animal y una curva de pérdida de peso de cuerpo típicas son explicados. El protocolo demuestra el examen macroscópico de una colección de hígado y la sangre CDE tratados por punción cardiaca para análisis posterior del suero. A continuación, la técnica de perfusión hepática y colección de diferentes lóbulos hepáticos para evaluaciones estándar son evaluaciones de la histología hepática muestra, incluyendo por hematoxilina y eosina o Sirius rojo stainings, detección inmunofluorescente de poblaciones de la célula hepática así como perfiles de transcriptoma del microambiente hepático. Este modelo de ratón es conveniente para estudiar inflamatoria fibrogénicos y células progenitoras hepáticas dinámica inducida por la enfermedad hepática crónica y puede ser utilizado para probar a posibles agentes terapéuticos que pueden modular estos procesos.

Introducción

El hígado es el órgano metabólico glandular más grande del cuerpo y tiene muchas funciones complejas. Funciones clave para el hígado incluyen desintoxicación, digestión, metabolismo, almacenamiento de nutrientes esenciales, producción de componentes de proteína del plasma de la sangre y la inmunidad mediada por células de Kupffer o macrófagos residentes. El hígado tiene una gran capacidad para regenerar incluso si se pierde hasta el 70-90% de su masa total. En caso de lesión del higado aguda, tal como se ve después de una hepatectomía parcial o acetaminophen envenenamiento, proliferan los hepatocitos sanos restantes para reparar el daño en un proceso altamente coordin....