La evaluación del desarrollo de tejido en el callo de fractura durante la cura de hueso endocondral es esencial para monitorear el proceso de curación. Aquí, Divulgamos el uso de una resonancia magnética (MRI)-compatible con fijador externo para fémur de ratón para permitir MRI las exploraciones durante la regeneración ósea en los ratones.
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Artículo de método
En Vivo Evaluación del desarrollo del callo de fractura durante la cicatrización ósea en ratones usando un dispositivo de osteosíntesis de MRI-compatible para el fémur de ratón
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En este artículo
Resumen
Resumen
Curación de fractura endocondral es un proceso complejo que involucra el desarrollo de tejido fibroso, cartilaginoso y óseo en el callo de fractura. La cantidad de los diferentes tejidos en el callo proporciona información importante sobre la fractura cura progreso. Disponible en vivo técnicas longitudinalmente, controlar el desarrollo de tejido de callo en estudios preclínicos de la curación de fractura con pequeños animales incluyen radiografía digital y la proyección de imagen de µCT. Sin embargo, ambas técnicas sólo son capaces de distinguir entre el tejido mineralizado y no mineralizado. Por lo tanto, es imposible diferenciar cartílago de tejido fibroso. En cambio, la proyección de imagen de resonancia magnética (RM) visualiza estructuras anatómicas basadas en su contenido en agua y por lo tanto, podrían ser capaces de identificar de forma no invasiva suave del tejido y del cartílago en el callo de fractura. Aquí, Divulgamos el uso de un fijador externo de MRI-compatible para el fémur de ratón para permitir las exploraciones de MRI durante la regeneración ósea en los ratones. Los experimentos demostraron que el fijador y un dispositivo de montaje a medida permiten IRM repetitivas, permitiendo análisis longitudinal del desarrollo de tejido de callo de fractura.
Introducción
Curación de fractura secundaria es la forma más común de cicatrización ósea. Es un proceso complejo que mímico aspectos específicos de ontogenic endocondral osificación1,2,3. El hematoma de fractura temprana consiste en predominante de las células inmunes, granulación y tejido fibroso. Tensión de oxígeno baja alta tensiones biomecánicas dificultan la diferenciación de osteoblastos en el boquete de la fractura, y promoción la diferenciación de células progenitoras en condrocitos4,5,6.....
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Protocolo
animal todos los experimentos cumplen con normas internacionales para el cuidado y uso de animales de laboratorio y fueron aprobados por la autoridad regulatoria regional (no. 1250, competente Tübingen, Alemania). Todos los ratones fueron mantenidos en grupos de dos a cinco animales por jaula en una luz 14-h, 10 h oscuro del ritmo circadiano con agua y comida proporcionados ad libitum.
1. preparación del Material quirúrgico y tratamiento previo de los ratones
- esterilizar todo quirúrgico material. Utilizar una temperatura de esterilización en autoclave de 120-135 ° C por 20-30 min de duración de la esterilización. ....
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Resultados
En primer lugar, el éxito del procedimiento quirúrgico se puede confirmar por el análisis de las exploraciones de MRI (ver ejemplo en figura 2). Todos los cuatro pines deben ser situados en el centro del eje femoral. El tamaño de la brecha de la osteotomía debe ser entre 0.3-0.5 mm. Si el tamaño de la brecha de osteotomía varía mucho de estos valores, el ratón debe excluirse del análisis posterior.
.......
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Discusión
Modificaciones y resolución de problemas:
El objetivo principal de este estudio era describir un protocolo para el uso de un fijador externo de MRI-compatible para la osteotomía del fémur en el ratón con la capacidad para monitorear el desarrollo de tejido de callo longitudinalmente durante el proceso de curación de fractura endocondral. El diseño de un dispositivo de montaje a la medida para la inserción del fijador externo garantiza una posición estandarizada durante los aná.......
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Divulgaciones
El autor Romano Matthys es un empleado de RISystem AG Davos, Suiza, que produce los implantes e implantar instrumentos específicos utilizados en este artículo. Otros autores tienen intereses financieros que compiten.
Agradecimientos
Agradecemos Sevil Essig, Stefanie Schroth, Verena Fischer, Katja Prystaz, Yvonne Hägele y Anne Subgang excelente soporte técnico. También agradecemos a la Fundación alemana de investigación (CRC1149, INST40/499-1) y la Alemania AO Trauma Fundación para la financiación de este estudio.
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| tubo de anestesia | FMI, Seeheim, Alemania | ZUA-82-ANA-TUB-Máquina de anestesia para ratones | |
| FMI, Seeheim, Alemania | ZUA-82-GME-MA | ||
| Pinzas arteriales | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BH104R | |
| Autoclave | Systec, Wettenberg, Alemania | DX-150 | |
| Embalaje de autoclave | Stericlin, Feuchtwangen, Alemania | 2301-04/06/10/12/16 | |
| Avizo software | FEI, Burlington, EE. UU. | - | Versión 8.0.1 |
| BioSpec 117/16 sistema de imágenes por resonancia magnética | Bruker Biospin, Ettlingen, Alemania | 117/16 | |
| Pinza Bulldog | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BH 021R | |
| Bisturí de acero al carbono n.º 11/15 | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BA211/215 | |
| Pasador de montaje cerámico 0,45 mm | RISystem, Davos, Suiza | HS691490 | |
| Clindamicina (300 mg / 2ml) | Ratiopharm, Ulm, | Alemania-Pinza de | |
| vendaje 115 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BD210R | |
| Pinza de vendaje 130 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BD025R | |
| Broca recubierta de 0,45 mm | RISystem, Davos, Suiza | HS820420 | |
| Portaagujas Durogrip 125 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BM024R | |
| Foliodrape | Hartmann, Heidenheim, Alemania | 2513026 | |
| Frekaderm | Fresenius, Bad Homburg, Alemania | 4928211 | |
| Gigli vio 0,44 mm | RISystem, Davos, Suiza | RIS.590.110.25 | |
| Taladro manual | RISystem, Davos, Suiza | RIS.390.130-01 | |
| Placa calefactora | FMI, Seeheim, Alemania | IOW-3704 | |
| Guantes Hygonorm | Hygi, Telgte, Alemania | 2706 | |
| Isoflurano | Abbot, Londres, Reino Unido | Forene | |
| Micro pinzas 155 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BD343R | |
| Micro tijeras 120 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | FD013R | |
| Ratón FixEx L 0.7 mm | RISystem, Davos, Suiza | RIS.611.300-10 | |
| Estuche de agujas para taladros | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BL911R | |
| Portaagujas | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BB078R | |
| Octenisept | Schü lke, Norderstedt, Alemania | 121403 | |
| Osirix software | Pixmeo SARL, Bernex, | Suiza-Versión | 4.0 |
| Oxígeno, grado médico | MTI, Ulm, | Alemania-Resolon | |
| 5/0 | Resorba, Nü rnberg, Alemania | 88143 | |
| Solución salina 0.9% | Braun, Melsungen, Alemania | 3570350 | |
| Mango de bisturí 125 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BB073R | |
| Tijeras 150 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BC006R | |
| Sellador para embalaje de autoclave | Hawo GmbH, Obrigheim, Alemania | HM500 | |
| Sterican 27 G | Braun, Melsungen, Alemania | 4657705 | |
| Cuchillas quirúrgicas estériles n.º 11/15 | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | BB511/515 | |
| Guantes quirúrgicos | Hartmann, Heidenheim, Alemania | Peha-micron 9425712 | |
| Lámpara quirúrgica | Maquet SA, Ardon, Francia | Blue line 80 | |
| Jeringas 5 ml | Braun, Melsungen, Alemania | Injekt 4606051V | |
| Pinza de tejido 80 mm | Aesculap, Tuttlingen, Alemania | OC091R | |
| Tramadol 25 mg/l | Grü nenthal, Aquisgrán, Alemania | 100mg/ml | |
| Vasofix Safety | Braun, Melsungen, Alemania | 4268113S-01 | |
| Vicryl 5-0 | Ethicon, Norderstedt, Alemania | V30371 | |
| Ungüento ocular visdisico | Bausch & Lomb, Berlín, Alemania | 3099559 |
Referencias
- Claes, L., Recknagel, S., Ignatius, A. Fracture healing under healthy and inflammatory conditions. Nat Rev Rheumatol. 8 (3), 133-143 (2012).
- Einhorn, T. A. The cell and molecular biology of fracture healing. Clin Orthop Relat Res. (355), Suppl S7-S21 (1998).
- Einhorn, T. A....
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Reimpresiones y permisos
