Utilización de ultrasonido guiado implantación celular dirigida de tejido para el establecimiento de xenoinjertos de tumores metastásicos biológicamente relevantes

Tina T. Thomas; Sahiti Chukkapalli; Raelene A. Van Noord; Melanie Krook; Mark J. Hoenerhoff; Jonathan R. Dillman; Elizabeth R. Lawlor; Valerie P. Opipari; Erika A. Newman

doi:10.3791/57558

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Utilización de ultrasonido guiado implantación celular dirigida de tejido para el establecimiento de xenoinjertos de tumores metastásicos biológicamente relevantes

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DOI:

10.3791/57558

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25 de mayo de 2018

Tina T. Thomas¹ , Sahiti Chukkapalli¹ , Raelene A. Van Noord¹ , Melanie Krook² , Mark J. Hoenerhoff³ , Jonathan R. Dillman⁴ , Elizabeth R. Lawlor²^,⁵ , Valerie P. Opipari⁵ , Erika A. Newman¹

¹Departments of Surgery, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School, ²Departments of Pathology, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School, ³Unit for Laboratory Animal Medicine, The University of Michigan Medical School, ⁴Departments of Radiology, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School, ⁵Departments of Pediatrics, C.S Mott Children's and Women's Hospital, The University of Michigan Medical School

En este artículo

Resumen

Aquí, presentamos un protocolo utilizar inyección guiada por ultrasonido de las células de (ES) el sarcoma de Ewing y neuroblastoma (NB) (estableció líneas celulares y células tumorales derivados del paciente) en sitios biológicamente relevantes para crear modelos preclínicos fiables para el cáncer investigación.

Resumen

Prueba preclínica de terapias contra el cáncer se basa en modelos de xenoinjerto pertinentes que imitan las tendencias innatas del cáncer. Ventajas de los modelos estándar del flanco subcutánea incluyen facilidad procesal y la capacidad de respuesta sin la proyección de imagen invasiva y monitor la progresión del tumor. Tales modelos son a menudo inconsistentes en ensayos clínicos traslacionales y han limitado características biológicamente relevantes con baja tendencia a producir metástasis, ya que hay una falta de un microambiente nativo. En comparación, han demostrado modelos de xenoinjerto ortotópico en los sitios de tumor nativo imitar el microambiente del tumor y replicar las características de la enfermedad importante como diseminación metastásica distante. Estos modelos requieren a menudo tediosos procedimientos quirúrgicos con periodos prolongados de tiempo y recuperación anestésicas. Para hacer frente a esto, los investigadores del cáncer han utilizado recientemente técnicas de inyección guiada por ultrasonido para establecer modelos de xenoinjerto de cáncer para los experimentos preclínicos, que permite la creación rápida y confiable de modelos murinos dirigida de tejido. Visualización ecográfica también proporciona un método no invasivo para la evaluación longitudinal del engraftment del tumor y crecimiento. Aquí, describimos el método de inyección guiada por ultrasonido de las células de cáncer, utilizando la glándula suprarrenal para NB y cápsula renal sub es. Este acercamiento como mínimo invasor supera implantación tedioso cirugía abierta de las células cancerosas en ubicaciones específicas de tejido para el crecimiento y metástasis y disminuye en períodos de recuperación mórbida. Se describe la utilización de las líneas celulares establecidas y líneas celulares derivadas paciente de orthotopic inyectable. Kits comerciales prefabricados están disponibles para disociación de tumor y luciferasa el marcaje de las células. Inyección de la suspensión celular utilizando la dirección de la imagen proporciona una plataforma mínimamente invasiva y reproducible para la creación de modelos preclínicos. Este método se utiliza para crear modelos preclínicos confiables para otros cánceres tales como vejiga, hígado y ejemplificando su potencial sin explotar para numerosos modelos de cáncer de páncreas.

Introducción

Modelos de xenoinjerto animales son herramientas esenciales para los estudios preclínicos de nuevas terapias contra el cáncer. Xenoinjertos murinos estándar se basan en la implantación subcutánea del flanco de las células, proporcionando un sitio eficaz y accesible para monitorear el crecimiento del tumor. La desventaja de los modelos subcutáneas es su falta de características biológicas tumorales, que pueden limitar su potencial para metastatizar¹. Tales limitaciones se superan mediante el uso de xenoinjertos de orthotopic en cual tumor las células se engrafted en sitios de tejido propio, proporciona un microambiente relevante potencial metast....