Murino colostomía distal proporciona un modelo murino para la colitis de la diversión humana, una colitis linfocítica predominante en el segmento de colon excluido de la corriente fecal.
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Artículo de método
Murino colostomía Distal, un modelo novedoso de desvío Colitis en ratones C57BL/6
En este artículo
Resumen
Resumen
Desviación (DC) es una condición clínica frecuente que ocurre en pacientes con segmentos de intestino excluidos de la corriente fecal como resultado de una enterostomía desviar. La etiología de esta enfermedad sigue siendo mal definida pero parece diferir de la de enfermedades de intestino inflamatorias clásicas tales como la enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa. Investigaciones encaminadas a descifrar los mecanismos fisiopatológicos principales en el desarrollo de esta enfermedad ha sido gravemente obstaculizado por la falta de un modelo murino. Este protocolo genera un modelo murino de DC que facilita el estudio del papel del sistema inmune y su interacción con el microbioma en el desarrollo de CC. En este modelo utilizando animales C57BL/6, parte distal del colon se excluye de la corriente fecal al crear una colostomía distal, provocando el desarrollo de leve a moderada inflamación en el segmento intestinal excluido y reproducir las lesiones característica distintiva del ser humano DC con una moderada respuesta inflamatoria sistémica. En contraste con el modelo de la rata, hay un gran número de modelos murinos genéticamente en el fondo de C57BL/6. La combinación de estos animales con nuestro modelo permite que las funciones potenciales de individuales citoquinas, quimiocinas y receptores de moléculas bioactivas (e.g., interleukin (IL) -17; IL-10, chemokine CXCL13, chemokine receptores CXCR5 y CCR7 y el receptor de la esfingosina-1-fosfato 4) a evaluarse en la patogenesia de DC. La disponibilidad de tensiones congenic ratón C57BL/6 fondo facilita en gran medida transferencia experimentos para establecer los roles de distintos tipos de células involucrados en la etiología de DC. Finalmente, el modelo ofrece la oportunidad de evaluar la influencia de las intervenciones locales (p. ej., modificación del microbioma local o terapia antiinflamatoria local) de inmunidad mucosa en los segmentos intestinales afectados y no afectados y en homeostasis inmune sistémica.
Introducción
En los últimos años, un número considerable de entidades colitis no infecciosa diferentes de las enfermedades clásicas inflamatorias intestinales (EII; ej., enfermedad enfermedad o colitis de Crohn) han caracterizado clínico e histopathologically en seres humanos. Los mecanismos fisiopatológicos principales en el desarrollo de estas formas de colitis no se entienden completamente parcialmente porque son escasos los modelos animales apropiados. Colitis de la diversión es una de estas entidades recientemente descritas. Aunque el término fue acuñado en 1980 por Glotzer1, la descripción inicial de un fenotipo similar fue dada en 1972 por M....
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Protocolo
Todos los métodos aquí descritos han sido aprobados por la autoridad veterinaria (Landesamt für Landwirtschaft, und Lebensmittelsicherheit Fischerei Mecklenburg-Vorpommern, LALLF M-V).
1. preoperatorio cuidado y preparación del Animal
- A su llegada a las instalaciones de animales, animales (C57Bl/6) se dividen en grupos de tamaño similar, jaula a cada grupo juntos y mantener constante a lo largo de los experimentos de los grupos.
Nota: Utilizar animales del mismo sexo. Los resultados descritos se obtuvieron con ratones machos.
Nota: Si se utilizan machos, grupos de jaula juntos a partir de cuando tienen 7 semanas de edad para que pueda establecer....
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Resultados
La cirugía se tolera bien tanto en los grupos de sham (colotomy) y experimental (colostomía). Mortalidad perioperatoria no debe superar el 10% cuando se realiza correctamente la cirugía y perioperative management. En la primera semana postoperatoria, pérdida de peso significativa se observa en los grupos experimentales y simulados. Animales del grupo impostor alcanzan su nadir de peso normalmente hacia el cuarto día postoperatorio, pero se da un día más tarde en el grupo experimental. Pér.......
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Discusión
El modelo murino de DC presentada en este protocolo fiable reproduce las características histopatológicas de DC humana (p. ej., desarrollo de novo de los folículos linfoides en la submucosa de segmentos de intestino inflamado, cripta acortamiento y reducción de número de células caliciformes). Aparte de esta ventaja, este modelo es inducida por un factor desencadenante muy similar y presenta un curso clínico de moderado a leve gravedad como es el caso de los seres humanos más afectados.
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Divulgaciones
Todos los autores declaran que no tienen intereses que compiten.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Material de operación | |||
| para la desinfección del campo de operaciones | |||
| Tijera | Aesculap (BRAUN) | BC064R | |
| Atraumatic Pinza DeBakey | Aesculap (BRAUN) | OC021R | |
| Portaagujas | Aesculap (BRAUN) | BM012R | |
| Vasofix Safety i.v. cánula 22G | Braun Melsungen AG, Alemania | 4268091S-01 | |
| VICRYL Plus 4-0 violeta trenzado; V-5 17 m 1/2c; 70 cm | ETHICON, Inc. | ||
| PDS II 6-0 monofil; V-18 13 mm 3/8c; 70 cm | ETHICON, Inc. | Z991H | |
| BD Plastipak 1 mL (Jeringas con aguja con interior estéril) | BD Medical | 305501 | |
| Triacid-N (N-Dodecilpropan-1,3-diamina) | ANTISEPTICA, Alemania | 18824-01 | desinfección de instrumental quirúrgico en baño ultrasónico |
| Medicamentos | |||
| ketamina 10%, 100 mg/mL (clorhidrato de ketamina) | selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH | 9089.01.00 | 87 mg/kg i.p. |
| Xylasel, 20 mg/mL (clorhidrato de xilacina) | selectavet, Dr. Otto Fischer GmbH | 400300.00.00 | 13 mg/kg i.p. |
| NaCl 0,9% | Braun Melsungen AG, Alemania | 6697366.00.00 | |
| Buprenovet 0,3 mg/mL (buprenorfina) | Bayer, Alemania | PZN: 01498870 | 0,1 mg/kg s.c. |
| Tramal Drops, 100 mg/mL (clorhidrato de tramadol) | Grü nenthal GmbH, Alemania | 10116838 | 1 mg/mL de agua potable |
| Ceftriaxon-saar 2 g (ceftriaxona) | Cephasaar GmbH, Alemania | PZN: 08844252 | 25 mg/kg de peso corporal i.p. |
| metronidazol 5 mg/mL | Braun Melsungen AG, Alemania | PZN: 05543515 | 12,5 mg/kg peso corporal i.p. |
| >Food | |||
| ssniff M-Z Ereich | ssniff, Alemania | V1184-3 | |
| Bebida sólida Dehyprev Vit BIO, bolsas | TripleATrading, Países Bajos | SDSHPV-75 | |
| Equipo | |||
| Nikon Eclipse Ci-L | Nikon Instruments Europe BV, Alemania | microscopía óptica | |
| VetScan HM 5 | Abaxis, USA | 770-9000 | Analizador de hematología veterinaria de 50 µ l sangre venosa |
| EDTA-Bandelin SONOREX (Baño ultrasónico) | Bandelin electronics, Alemania | RK 100 H | desinfección de instrumental quirúrgico |
| Software | |||
| NIS-Element BR4 software | Nikon Instruments Europe BV, Alemania | ||
| GraphPad Prism Versión 6 | GraphPad Software, Inc. |
Referencias
- Glotzer, D. J., Glick, M. E., Goldman, H. Proctitis and colitis following diversion of the fecal stream. Gastroenterology. 80, 438-441 (1981).
- Morson, B., Dawson, I. Gastrointestinal Pathology. , Blackwell Scientific Publications. London. (1972).
- Whelan, R. L., Abramson, D., Kim, D. S., Hashmi, H. F.
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Reimpresiones y permisos
