En este artículo, presentamos un protocolo para inducir una lesión pulmonar aguda en el cerdo por inyección venosa central de ácido oleico. Se trata de un modelo animal establecido para estudiar el síndrome de dificultad respiratoria agudo (SDRA).
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Artículo de método
En este artículo, presentamos un protocolo para inducir una lesión pulmonar aguda en el cerdo por inyección venosa central de ácido oleico. Se trata de un modelo animal establecido para estudiar el síndrome de dificultad respiratoria agudo (SDRA).
El síndrome de dificultad respiratoria agudo es una enfermedad de la pertinente unidad de cuidados intensivos con una incidencia que oscila entre 2.2% y 19% de los pacientes de la unidad de cuidados intensivos. A pesar de tratamiento avances durante las últimas décadas, SDRA pacientes sufren todavía las tasas de mortalidad entre 35 y 40%. Todavía hay una necesidad de más investigación mejorar los resultados de los pacientes afectos de SDRA. Un problema es que no hay modelo animal solo puede mímico el pathomechanism complejo del síndrome de distrés respiratorio agudo, pero existen varios modelos para estudiar diferentes partes de la misma. Inyección de ácido oleico (OAI)-lesión pulmonar inducida es un modelo bien establecido para el estudio de estrategias de ventilación, distribución mecánica y ventilación y perfusión pulmonar en animales. OAI conduce al intercambio de gas seriamente deteriorada, deterioro de la mecánica pulmonar y la interrupción de la barrera alveolo-capilar. La desventaja de este modelo es la controvertida importancia mecanicista de este modelo y la necesidad de acceso venoso central, que es un reto especialmente en los modelos animales más pequeños. En Resumen, OAI-inducida del pulmón lesión conduce a resultados reproducibles en animales pequeños y grandes y por lo tanto, representa un modelo adecuado para el estudio de SDRA. Sin embargo, más investigación es necesaria encontrar un modelo que imita todas las partes del SDRA y carece de los problemas asociados con los diversos modelos existentes hoy en día.
El síndrome de dificultad respiratoria agudo (SDRA) es un síndrome de cuidados intensivos que se ha estudiado extensivamente desde su primera descripción hace unos 50 años1. Este cuerpo de investigación condujo a una mejor comprensión de la patofisiología y causa el desarrollo de ARDS resultando en atención al paciente y resultado2,3. Sin embargo, la mortalidad en pacientes con SDRA sigue siendo muy alta con unos 35-40%4,5,6. El hecho de que alrededor del 10% de los ingresos de ICU y 23% de los pacientes de la UCI que requieren ventilación mecánica por SDRA subraya la importancia para futuras investigaciones en este campo.
Los modelos animales son ampliamente utilizados en la investigación para examinar cambios patofisiológicos y posibles modalidades de tratamiento para diferentes tipos de enfermedades. Debido a la complejidad del SDRA, no hay solo animal modelo para imitar esta enfermedad, pero diferentes modelos que representan diferentes aspectos7. Un modelo bien establecido es la inyección de ácido oleico (OAI)-inducida por la lesión pulmonar. Este modelo se ha utilizado en una gran variedad de animales, incluyendo ratones8, ratas9, cerdos10, perros11y12de ovejas. El ácido oleico es un ácido graso insaturado y el ácido graso más común en el cuerpo de los seres humanos sanos13. Está presente en el plasma, las membranas celulares y tejido adiposo humano13. Fisiológicamente, está ligada a la albúmina mientras que se realiza a través de la circulación sanguínea13. Aumento de los niveles de ácidos grasos en el torrente sanguíneo está asociado con diferentes patologías y la severidad de algunas enfermedades se correlaciona con suero ácido graso niveles13. El ácido oleico ARDS-modelo fue desarrollado en un intento de reproducir SDRA causada por embolismo lipídico en pacientes de trauma14. El ácido oleico tiene efectos directos sobre los receptores inmunes innatos en pulmones de acumulación de neutrófilos13 y disparadores15, mediador inflamatorio producción16y célula muerte13. Fisiológico, el ácido oleico induce rápidamente progresiva hipoxemia, aumento de la presión arterial pulmonar y la acumulación de agua pulmonar extravascular. Además, induce hipotensión arterial y depresión miocardio7. Las desventajas de este modelo son la necesidad de acceso venoso central, la cuestionable importancia mecanicista y el potencial avance letal causada por hipoxemia rápida y depresión cardiaca. La ventaja de este modelo en comparación con otros modelos es la facilidad de uso en pequeños y grandes animales, la reproducibilidad válida de los mecanismos patofisiológicos en el SDRA, el inicio agudo del SDRA después de la inyección de ácido oleico, y la posibilidad de estudiar aislado SDRA sin inflamación sistémica como en muchas otra sepsis modelos7. En el siguiente artículo, le damos una descripción detallada de la lesión pulmonar inducida por el ácido oleico en cerdos y proporcionan datos representativos para caracterizar la estabilidad de los compromisos en la función pulmonar. Existen diferentes protocolos para la lesión pulmonar inducida por la OAI. El protocolo proporciona aquí es capaz de inducir confiablemente la lesión pulmonar aguda.
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Todos los experimentos con animales aquí descritos han sido aprobados por el Comité de cuidado institucional y estado de los animales (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz, Koblenz, Alemania; número de homologación G14-1-077) y se llevaron a cabo siguiendo las directrices de la Sociedad Europea y alemana de Ciencias de animales de laboratorio. Los experimentos se realizaron en cerdos anestesiados masculinos (sus scrofa domestica) de edad de 2-3 meses, 27-29 kg de peso.
1. anestesia, intubación y ventilación mecánica
2. instrumentación
3. ultra rápida medición de la presión parcial de oxígeno (pO2)
Nota: La medición de la pO2 con la sonda para ultrarrápida pO2-medición no es obligatoria pero ayuda a visualizar los cambios en tiempo real en la pO2.
4. COLOCACIÓN DE CATÉTER DE ARTERIA PULMONAR
5. inducción de lesión pulmonar
6. final del experimento y la eutanasia
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PaO2/FiO2-proporción disminuye después de la aplicación fraccionada de ácido oleico (figura 1). En el estudio presentado, 0.185 ± 0,01 ml kg-1 ácido oleico era necesario para la inducción de lesión pulmonar. Todos los animales mostraron una deterioro oxigenación después de la inducción de lesión pulmonar, con variedades en el tiempo más curso. En animal 1 y 3, permaneció en un nivel con pocas fluctuaciones; animal 2, observamo...
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Este artículo describe un método de lesión pulmonar inducida por el ácido oleico como modelo para estudiar varios aspectos del SDRA grave. Hay también otros protocolos con emulsiones de diferentes sitios de inyección diferentes y diferentes temperaturas de la emulsión23,24,25,26,27,28 ,29. ...
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Todos los autores no divulgar ningún conflicto de interés financiero o de cualquier otro.
Los autores queremos agradecer Dagmar Dirvonskis excelente soporte técnico.
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Llave de paso de 3 vías azul | Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Suecia | 394602 | |
| llave de paso de 3 vías roja | Becton Dickinson Infusion Therapy AB Helsingborg, Suecia | 394605 | |
| Atracurium | Hikma Pharma GmbH , Martinsried 4262659 | ||
| Canula 20 G | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, España | 301300 | |
| Datex Ohmeda S5 | GE Healthcare Finland Oy, Helsinki, Finlandia | ||
| Esquemas de desinfección | ; LKE & Mayr GmbH, Alemania | 104802 | |
| Tubo endotraqueal | Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malasia | 112482 | |
| Introductor de tubo endotraqueal | Rü sch | 5033062 | |
| Engströ m Carestation | GE Heathcare, Madison EE. UU. | ||
| Fentanilo | Janssen-Cilag GmbH, Neuss | ||
| Gloves | Paul Hartmann, Alemania | 9422131 | |
| Incetomat-line 150 cm | Fresenius, Kabi Germany GmbH | 9004112 | |
| Ketamine | Hameln Pharmaceuticals GmbH | ||
| Laringoscopio | Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malasia | 671067-000020 | |
| Sistema lógico de control de presión | Smith- Medical Germany GmbH | MX9606 | |
| Logicath 7 Fr 3 lúmenes 30cm | Smith- Medical Germany GmbH | MXA233x30x70-E | |
| Masimo Radical 7 Masimo Corporation | Irvine, Ca 92618 USA | ||
| Mascarilla para perros ventilados | Henry Schein, Alemania | 730-246 | |
| Neofox Kit | Ocean optics Largo, FL USA | NEOFOX-KIT-PROBE | |
| Norepinefrina | Sanofi- Aventis, Seutschland GmbH | 73016 | |
| Ácido oleico | Applichem GmbH Darmstadt, Alemania | 1.426.591.611 | |
| Jeringa perfusora original 50ml Luer Lock | B.Braun Melsungen AG, Alemania | 8728810F | |
| PA-Katheter Swan Ganz 7,5 Fr 110cm | Edwards Lifesciences LLC, Irvine CA, EE. UU | 744F75 | |
| Juego de introductores de vaina percutánea 8,5 y 9 Fr, 10 cm con válvula/puerto lateral de hemostasia integrado | Arrow international inc. Reading, PA, EE. UU. | AK-07903 | |
| Perfusor FM Braun | B.Braun Melsungen AG, Alemania | 8713820 | |
| Cloruro de potasio | Fresenius, Kabi Germany GmbH | 6178549 | |
| Propofol 2% | Fresenius, Kabi Alemania GmbH | ||
| Salina | B.Braun Melsungen AG, Alemania | ||
| Sonosite Micromaxx Ultrasoundsystem | Sonosite Bothell, WA, EE. UU. | ||
| Acero inoxidable Macintosh Tamaño 4 | Teleflex Medical Sdn. Bhd, Malasia | 670000 | |
| Sterofundin | B.Braun Melsungen AG, Alemania | ||
| Stresnil 40mg/ml | Lilly Germany GmbH, Abteilung Elanco Jeringa de Salud | ||
| 10 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, España | 309110 | |
| Jeringa 2 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, España | 300928 | |
| Jeringa 20 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, España | 300296 | |
| Jeringa 5 mL | Becton Dickinson S.A. Carretera Mequinenza Fraga, España | 309050 | |
| catéter venoso 22G | B.Braun Melsungen AG, Alemania | 4269110S-01 |
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