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Artículo de método

Normotérmica Ex Situ corazón perfusión en modo de trabajo: evaluación de la función cardiaca y el metabolismo

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DOI:

10.3791/58430

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12 de enero de 2019

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En este artículo

Resumen

Normotérmica ex situ corazón perfusión (ESHP), conserva el corazón en un estado semi-fisiológico, paliza. Cuando se realiza en un modo de trabajo, ESHP proporciona la oportunidad de realizar evaluaciones sofisticadas de donantes viabilidad de función y órgano de corazón. Aquí, describimos nuestro método para la evaluación del desempeño miocardio durante ESHP.

Resumen

El método estándar actual de preservación de órgano (conservación en cámara frigorífica, CS), expone el corazón a un periodo de isquemia fría que limita el tiempo de conservación segura y aumenta el riesgo de resultados adversos del poste-trasplante. Por otra parte, la naturaleza estática de CS no permite evaluación de órgano o intervención durante el intervalo de preservación. Normotérmica ex situ corazón perfusión (ESHP) es un método novedoso para la preservación del corazón donado que minimiza la isquemia fría proporcionando solución oxigenada, ricos en nutrientes para el corazón. ESHP ha demostrado que no es inferior a CS en la preservación del donante estándar criterios corazones y también ha facilitado el trasplante clínico de los corazones donados después de la determinación circulatoria de la muerte. Actualmente, el dispositivo clínico sólo disponible del ESHP perfuses el corazón en un estado de descarga, no trabajo, limitando las evaluaciones de rendimiento miocardio. Por el contrario, ESHP en modo de trabajo ofrece la oportunidad para la evaluación integral del rendimiento cardiaco por evaluación de parámetros funcionales y metabólicos en condiciones fisiológicas. Por otra parte, antes de los estudios experimentales han sugerido que ESHP en modo de trabajo puede producir mejor preservación funcional. Aquí, describimos el protocolo para ex situ de la perfusión del corazón en un modelo (porcino) de grandes mamíferos, que es reproducible para tamaños de corazón y diferentes modelos animales. El programa de software de este aparato ESHP permite control automatizado y en tiempo real de la velocidad de la bomba para mantener la presión atrial izquierda y aórtica deseada y evalúa una variedad de parámetros funcionales y electrofisiológicas con mínima necesidad de supervisión/manipulación.

Introducción

Relevancia clínica

Mientras que la mayoría de los aspectos del trasplante cardiaco ha evolucionado significativamente desde que el primer centro de trasplante en 1967, almacenamiento en frío (CS) sigue siendo el estándar para la donante corazón conservación1. CS expone el órgano a un periodo de isquemia fría que limita el intervalo de preservación segura (4 – 6 horas) y aumenta el riesgo de fallo primario injerto disfunción2,3,4. Debido a la naturaleza estática del CS, las evaluaciones de la función o las intervenciones terapéu....

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Protocolo

Todos los procedimientos en este manuscrito se realizaron conforme a las directrices del Consejo Canadiense en el cuidado Animal y la guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio. Los protocolos fueron aprobados por el Comité institucional de cuidado animal de la Universidad de Alberta. Este protocolo se ha aplicado en los cerdos de Yorkshire juveniles femeninos entre 35-50 kg. Todas las personas involucradas en los procedimientos de ESHP habían recibido capacitación adecuada bioseguridad.

1. pre-quirúrgicos preparados

  1. Coloque la cámara de órgano correctamente en el carro del aparato e instalar la membrana de soporte de s....

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Resultados

Al inicio de la perfusión (en modo de no trabajo), el corazón reanudará normalmente un ritmo sinusal cuando la temperatura del sistema y la solución acerca a normotermia. Al entrar en el modo de trabajo, como las presiones de LA se aproximan a los valores deseados, debe observarse la eyección en el trazo de la presión de la Ao y el flujo de LA (un reflejo del gasto cardiaco) debe aumentar gradualmente. En un modelo de cerdo Yorkshire (35-50 kg) y un peso inicial de corazón de 180 a 220 gr.......

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Discusión

La perfusión exitosa se define según los objetivos del estudio; sin embargo, esto debe incluir ESHP ininterrumpido para la cantidad deseada de tiempo y completa colección de los datos sobre la función cardiaca durante la perfusión. Para ello, deben seguirse unos pasos críticos en el protocolo.

El corazón es un órgano con altas concentraciones de oxígeno y demanda de energía, y minimizar el tiempo isquémico antes de la canulación y perfusión es un principio importante que debe seguirse. El proc.......

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Divulgaciones

DH tiene patentes en ex situ tecnología de perfusión de órganos y los métodos. DH y JN son fundadores y principales accionistas de Tevosol, Inc.

Agradecimientos

Este trabajo fue apoyado por subvenciones de la canadiense programa nacional de investigación de trasplante. SH es el receptor de una Facultad de medicina y odontología Motyl beca postgrado en Ciencias cardiacas. DH es un receptor de una subvención de proyectos de investigación colaborativa (CHRP) en ayuda de las Ciencias nacionales y Consejo de investigación de ingeniería e institutos canadienses de investigación en salud.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Tijeras de disección Debakey-Metzenbaum Tijeras de disección Pilling342202
tijeras de disección MAYOPilling460420
Pinzas de pulgarPilling465165
Pinzas de tejido vascular rectas Debakey Pilling351808
CUSHING Pinza de gutschdressingPilling466200
Portaagujas JOHNSONPilling510312
Portaagujas DERFPilling443120
Sierra esternalStryker6207
Retractor esternalPilling341162
Pinza para tubos VorsePilling351377
pinza de aorta ascendente MORRISPilling353617
Juego de trampa quirúrgica (torniquete)MedtronicCVR79013
2-0 SILK negro 12" x 18" hebrasETHICONA185H
3-0 PROLENE azul 18" PS-2 corteETHICON8687H
Accionamiento de bomba Biomedicus (modificado)Medtronic540Modificado para permitir el control electrónico remoto de la velocidad de la bomba
Bomba BiomedicusMaquetBPX-80
Oxigenador de membrana D 905SORIN GROUP50513
Módulo de flujo de tuberías   TransonicTs410
PXL
Transductor de presión Transductor de presión Transductor de presión Transonda Transductor de intercepciónVSYPX272Edwards
/8" x 3/32" xX 6'Medtronic3506
Tubo de intercepción 1/4" x 1/16" x 8'Medtronic3108
Calentado/Refrigerado Circulador de baño GrantTX-150
ABL 800 FLEX Analizador de gases en sangreRadiómetro989-963
DLP cánula de cardioplejia (cánula de raíz aórtica)Medtronics20613994495406
5F Ventriculr catéter de coleta rectaCORDIS534550S
5F AVANTI+ Introductor de vainaCORDIS504605A
Emerald Amplatz GuidewireCORDIS502571A
Marcapasos de doble cámaraMedtronic5388
DesfibrilladorCodeMasterM1722B
Bomba de infusiónBaxterAS50
Electrocauterizador quirúrgicoKls MartinME411
Mezclador de gasSECHRIST3500 CP-G
Tanque de oxígeno médicopraxair2014408
Tanque de dióxido de carbonopraxair5823115
Albúmina sérica bovinaMP biomedicals218057791
Sensor de caudal de pinza 3

Referencias

  1. Ardehali, A., et al. Ex-vivo perfusion of donor hearts for human heart transplantation (PROCEED II): a prospective, open-label, multicentre, randomised non-inferiority trial. Lancet. 385 (9987), 2577-2584 (2015).
  2. Collins, M. J., Moainie, S. L., Griffith, B. P., Poston, R. S.

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