Dieta de cafetería de estilo occidental palatable como un método confiable para modelar la obesidad inducida por la dieta en roedores

Resumen

Este protocolo describe el uso de una dieta de cafetería de estilo occidental altamente apetecible para modelar la alimentación excesiva y la obesidad en roedores. Aquí, proporcionamos un esquema detallado de la selección, preparación y medición de alimentos, y explicamos factores metodológicos que ayudan a generar un fenotipo robusto y reproducible.

Resumen

La obesidad está aumentando rápidamente en la incidencia en los países desarrollados y en desarrollo y se sabe que induce o exacerba muchas enfermedades. La carga sanitaria de la obesidad y sus condiciones comorbilidades ponen de relieve la necesidad de una mejor comprensión de su patogénesis, pero las limitaciones éticas limitan los estudios en los seres humanos. Con este fin, los modelos de obesidad externamente válidos en animales de laboratorio son esenciales para la comprensión de tener sobrepeso y obesidad. Mientras que muchas especies se han utilizado para modelar la gama de cambios que acompañan a la obesidad en los seres humanos, los roedores se utilizan más comúnmente. Nuestro laboratorio ha desarrollado una dieta de cafetería de estilo occidental que conduce constantemente a un aumento considerable de peso y marcadores de enfermedad metabólica en roedores. La dieta expone a los roedores a una variedad de alimentos altamente apetecibles para inducir la hiperfagia, modelando el ambiente alimentario occidental moderno. Esta dieta induce rápidamente el aumento de peso y la acumulación de grasa corporal en ratas permitiendo el estudio de los efectos de comer en exceso y la obesidad. Si bien la dieta de la cafetería puede no proporcionar el mismo control sobre el perfil de macronutrientes y micronutrientes que las dietas purificadas con alto contenido de grasa o alto contenido en grasas, con alto contenido de azúcar, la dieta de la cafetería normalmente induce un fenotipo metabólico más grave que el observado con dietas y está más en línea con las alteraciones metabólicas observadas en la población humana con sobrepeso y obesidad.

Introducción

La obesidad y sus comorbilidades relacionadas hacen una enorme contribución a la carga sanitaria mundial¹ y representan el 7% de la carga de morbilidad en Australia². Un factor de riesgo principal para la obesidad es el consumo de dietas poco saludables que son altas en grasas saturadas y carbohidratos refinados, y bajos en fibra y micronutrientes³. La identificación de objetivos de intervención terapéutica para la obesidad requiere modelos que puedan evaluar sistemáticamente los efectos en múltiples sistemas bioquímicos y fisiológicos. Nuestra comprensión de la etiología de la obesidad ha avanzad....

Protocolo

El protocolo descrito aquí ha sido optimizado para su uso en ratas. Si bien hemos utilizado la dieta CAF con éxito en ratones^17,18, la molienda de alimentos blandos puede introducir más errores reduciendo la fiabilidad de las medidas de ingesta de alimentos¹⁹. Este protocolo es aprobado por el Comité de Cuidado y Etica Animal de la Universidad de Nueva Gales del Sur y cumple con las directrices australianas para el uso y cuidado de animales con fines científicos (8a Edición) proporcionadas por la Australian National Health y Consejo de Investigación Médica.

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Resultados

Como se muestra en la Figura 2A,la alimentación de la dieta CAF produce un aumento de 2,5 veces en la ingesta de energía en relación con los controles de la coma, basado en datos de tres cohortes de ratas macho Sprague Dawley, que es consistente durante 6 semanas. Otros estudios han confirmado que esta extensión de la hiperfagia se mantiene en más de 10²¹ y 16 experimentos de²² semanas. La curva de peso(Fig.......

Discusión

Al exponer a las ratas a una variedad de alimentos altamente apetecibles ricos en grasas y azúcares, el protocolo de dieta CAF descrito aquí proporciona un modelo confiable y robusto de la llamada "dieta occidental" que consumen muchas personas. La hiperfagia, evaluada como un aumento significativo en la ingesta de energía en relación con los controles, se observa dentro de las primeras 24 horas de exposición, con diferencias de peso corporal estadísticamente significativas observadas en cuestión de semanas. Por lo tanto.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
		de plástico de 2-5 L	Para preparar una solución de sacarosa al 10%, si procede
Se recomienda la tabla			Plástico
Congelador			Para almacenar alimentos CAF
Comida de mantenimiento para roedores	de Gordon's Gordon's Specialty Stockfeeds (Australia)		Dieta de mantenimiento utilizada en nuestro laboratorio (14 kJ/g; 65% de carbohidratos, 13% de grasas y 22% de proteínas, como energía)
Grandes cajas			Todos los artículos anteriores se pueden almacenar en contenedores para facilitar el acceso
Cuchara			para la preparación de la dieta CAF
Microondas			Para la descongelación de la dieta CAF (cuando sea necesario)
Cuchillo			Para la preparación de la dieta CAF
Toalla			de papelImportante para limpiar las superficies de trabajo y el cuchillo durante la preparación de CAF
Recipientes			Estos son para pesar los alimentos de CAF en los días de medición
Embudo de			Para preparar una solución de sacarosa al 10%, si corresponde
Luz			Como la dieta CAF debe refrescarse cerca del inicio de la fase oscura cada día, una luz roja ayudará cuando se trabaje en la oscuridad
Latas de atún			Para presentar los alimentos CAF "más húmedos". Los recipientes de plástico también pueden ser adecuados
Recipiente de pesaje x 3			Se deben usar recipientes separados para pesar ratas, comida y biberones, y alimentos CAF
Báscula			Se recomienda una sensibilidad de hasta 0,1 g
Azúcar			Para una solución de sacarosa al 10%, si corresponde

Botella de cortar de almacenamiento de plástico grande sin dentar de plástico plástico roja de pesaje blanca