Usando video-EEG-ECG-oximetry-capnography simultáneo, desarrollamos una metodología para evaluar la susceptibilidad de los modelos del conejo para desarrollar arritmias y asimientos provocados. Este novedoso sistema de grabación establece una plataforma para probar la eficacia y seguridad de la terapéutica y puede capturar la compleja cascada de eventos multi-sistema que culminan en la muerte súbita.
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Artículo de método
Monitoreo multisistema para la identificación de convulsiones, arritmias y apnea en conejos restringidos conscientes
En este artículo
Resumen
Resumen
Los pacientes con canalopatías iónicas tienen un alto riesgo de desarrollar convulsiones y arritmias cardíacas fatales. Hay una mayor prevalencia de enfermedades cardíacas y arritmias en personas con epilepsia (es decir, corazón epiléptico). Además, los disturbios cardiacos y autonómicos se han divulgado que rodeaban asimientos. 1:1.000 pacientes con epilepsia/año mueren de muerte súbita inesperada en epilepsia (SUDEP). Los mecanismos para SUDEP siguen siendo incompleto entendidos. Los electroencefalogramas (EEG) y los electrocardiogramas (ECG) son dos técnicas utilizadas rutinariamente en el ámbito clínico para detectar y estudiar los sustratos/desencadenantes de las convulsiones y las arritmias. Si bien muchos estudios y descripciones de esta metodología se encuentran en roedores, su actividad eléctrica cardíaca difiere significativamente de la de los humanos. Este artículo proporciona una descripción de un método no invasor para la grabación simultánea video-EEG-ECG-oximetry-capnography en conejos conscientes. Como la función eléctrica cardíaca es similar en conejos y humanos, los conejos proporcionan un excelente modelo de estudios diagnósticos y terapéuticos traslacionales. Además de delinear la metodología para la adquisición de datos, discutimos los acercamientos analíticos para examinar la función eléctrica neuro-cardiaca y la patología en conejos. Esto incluye la detección de arritmias, el análisis espectral de EEG y una escala de convulsiones desarrollada para conejos restringidos.
Introducción
La electrocardiografía (ECG) se utiliza rutinariamente en el ámbito clínico para evaluar la dinámica de la conducción eléctrica cardíaca y el proceso de activación-recuperación eléctrica. El ECG es importante para detectar, localizar y evaluar el riesgo de arritmias, isquemia e infartos. Por lo general, los electrodos se fijan al pecho, los brazos y las piernas del paciente para proporcionar una vista tridimensional del corazón. Una desviación positiva se produce cuando la dirección de la despolarización miocárdica es hacia el electrodo y una desviación negativa se produce cuando la dirección de la despolarización miocárdica está lejos del electrodo. Los componentes e....
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Protocolo
Todos los experimentos se llevaron a cabo de acuerdo con las directrices de los Institutos Nacionales de salud (NIH) y el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Médica del Norte (IACUC). Además, un esquema de este protocolo se proporciona en la figura 1.
1. Preparación del aparato de control
- Conecte la computadora a un amplificador con una caja de cabeza de 64 pines.
NOTA: Cada animal tiene cuatro electrodos de pasador de cuero cabelludo subdérmico recto (7 o 13 mm) para EEGs de los 4 cuadrantes de la cabeza, 3 electrodos de pasador de tórax subdérmico ....
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Resultados
El método descrito anteriormente es capaz de detectar anomalías en el sistema de conducción eléctrica del cerebro y el corazón, así como alteraciones respiratorias. Se utiliza un software de adquisición de datos para evaluar la morfología del ECG y detectar cualquier frecuencia cardíaca anormal, alteraciones de la conducción o ritmos de ECG (latidos ectópicos auriculares/ventriculares y arritmias brady/taqui) (Figura 6). Además de visualizar la morfología del.......
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Discusión
Esta configuración experimental facilita grabaciones y análisis detallados de video-EEG-ECG-oximetría-capnografía simultánea en conejos, particularmente en modelos de enfermedades cardíacas y /o neuronales. Los resultados de este artículo demuestran que este método es capaz de detectar asimientos y arritmias y de distinguirlos de artefactos electrográficos. Los resultados esperados fueron obtenidos al dar a conejos un proconvulsivo, que indujo asimientos. Los datos obtenidos de las grabaciones video-EEG podían ser analiz.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Los autores reconocen que este estudio fue apoyado por subvenciones de la Asociación Americana del Corazón, la Sociedad Americana de Epilepsia y el Departamento de Farmacología del Norte del Estado de SUNY.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Riego con cloruro de sodio al 0,9%, USP - Contenedor flexible | PFIZER (HOSPIRA) | 7983-09 | Jeringa diluyente |
| Luer Lock de 10 cc con aguja de 20 G x 1 " | Sur-Vet | SS-10L2025 | Se utiliza como enjuague después |
| Esponjas de gasa 4x4 | Fisher Scientific | 22-415-469 | Enrollado en un tubo para entablillar la oreja con un angiocatéter |
| Compota de manzana | Kirkland | 897971 | Vehículo para medicamentos orales |
| Ordenador | Dell | Optiplex 5040 | Ordenador de adquisición |
| E-4031 | Tocris | 1808 | Agente conocido por prolongar el intervalo QT |
| Electrodo de ECG | RhythmLink | RLSND116-2.5 | 13 mm Doblado 35 grados (0,4 mm de diámetro) Electrodos de clavija subdérmica |
| Electrodo de EEG | RhythmLink | RLSP513 | Electrodos de clavija subdérmica rectos de 13 mm (0,4 mm de diámetro) de 5 vueltas |
| EEGLAB (2020) | Centro Swartz de Neurociencia Computacional | Acceso | Puede realizar análisis espectrales de EEG |
| Adaptador de Ethernet a Ethernet | Adaptador de USB3G16 Linksys | para conectar la cámara al ordenador | |
| Solución Eutanasia-III Med-Pharmex | ANADA 200-280 | Contiene pentobarbital sódico y fenitoína sódica, sustancia controlada | |
| Acolchado de espuma | Genérico | N/A | Reduce la presión aplicada al cuello de los conejos pequeños por el sujetador para prevenir los efectos cardiorrespiratorios adversos de la compresión del cuello |
| Heparin Lock Flush | Medline | EMZ50051240 | Para mantener la permeabilidad del angiocatéter |
| IR Light | Bosch | EX12LED-3BD-8W | Facilita las grabaciones en la oscuridad |
| LabChart Pro (2019, versión 8.1.16) | ADInstruments | N/A | Análisis de ECG |
| JELCO PROTECTIV Catéteres intravenosos de seguridad, calibre 25 | Smiths Medical | 3060 | Se utiliza para catherizar una vena marginal del oído |
| MATLAB (R2019b, Update 5) | MathWorks | N/A | Necesario para ejecutar EEGLAB |
| Micrófono | Sony Stereo | ECM-D570P | Registro de las manifestaciones sonoras de las convulsiones |
| Micropore Cinta Médica, Papel, Blanco | 3M | 1530-1 | Se utiliza para asegurar cables y crear férulas para los oídos |
| Natus NeuroWorks | Natus | LC101-8 Software de | adquisición y revisión |
| Pentylenetetrazol (1 - 10 mg/kg siempre en volumen de 1 mL) | Sigma-Aldrich | 88580 | Diluciones preparadas en solución salina |
| Estimulador fótico | Hierba | PS22 | Estimulador para controlar la frecuencia, el retardo, la duración, la intensidad de los pulsos de luz |
| Organizador / empaquetador de alambre de plástico | 12Vwire.com LM-12-100-BLK | Haz cables para reducir el ruido | |
| PS 22 Estimulador fótico | Instrumentos de hierba | BZA641035 | Luz estroboscópica con frecuencia de destello, retardo e intensidad ajustables |
| Tubo de PVC Genérico | N/A | Evita que los conejos pequeños pateen sus patas traseras y causen lesiones en la columna | |
| vertebral Amplificador cuántico | Natus | 13926 | Amplificador / digitalizador |
| Quantum HeadBox Amplificador | Natus | 22134 | Caja de conexiones de 64 pines |
| Protector | de conejos Plas-Labs | 501-TC | Hay disponibles sujetadores de conejos de varios tamaños. 6" x 18" x 6" en este estudio. |
| Almohadilla de goma (booster) | Genérico | N/A | Cría conejos pequeños en el sujetador para evitar la compresión del cuello |
| Pinza para la oreja de SpO2 | NONIN | 61000 | PureSAT/SpO2 |
| Adaptador de sensor de SpO2 | NONIN | 13931 | XPOD PureSAT/SpO2 |
| SRG-X120 1080p Cámara PTZ con salida HDMI, IP y 3G-SDI | Sony | SRG-X120 | Impela |
| Terumo Sur-Vet Jeringa de Tuberculina 1cc 25G x 5/8" Regular Luer | Sur-Vet | 13882 | Se utiliza para inyectar medicamentos intravenosos |
| Tapón de inyección veterinario Luer Lock | Sur-Vet | SRIP2V | Tapón de inyección para insertar la aguja para la medicación intravenosa |
| Webcol Alcohol Prep, Estéril, Grande, 2 Capas | Covidien | 5110 | Para preparar la vena del oído antes del cateterismo |
Referencias
- Kaese, S., et al. The ECG in cardiovascular-relevant animal models of electrophysiology. Herzschrittmacherther Elektrophysiology. 24 (2), 84-91 (2013).
- Pogwizd, S. M., Bers, D. M. Rabbit models of heart disease. Drug Discovery Today: Disease Models....
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Reimpresiones y permisos
