Creación de dos aneurismas digeridos por elastasa sacular con diferente hemodinámica en un conejo

Summary

Este protocolo describe los pasos para la creación de un modelo de conejo con dos aneurismas digeridos por elastasa con diferente hemodinámica (muñón y constelación de bifurcación). Esto permite probar nuevos dispositivos endovasculares en aneurismas con diferentes condiciones angioarquitectónicas y hemodinámicas dentro de un solo animal.

Abstract

Los modelos animales preclínicos con características hemodinámicas, morfológicas e histológicas cercanas a los aneurismas intracraneales humanos desempeñan un papel clave en la comprensión de los procesos fisiopatológicos y en el desarrollo y prueba de nuevas estrategias terapéuticas. Este estudio tiene como objetivo describir un nuevo modelo de aneurisma de conejo que permite la creación de dos aneurismas saculares digeridos por elastasa con diferentes condiciones hemodinámicas dentro del mismo animal.

Cinco conejos blancos hembras de Nueva Zelanda con un peso medio de 4,0 (± 0,3) kg y una edad media de 25 (±5) semanas se sometieron a la creación de un muñón microquirúrgico y un aneurisma de bifurcación. Un aneurisma (muñón) fue creado por la exposición a la arteria carótida común derecha (CCA) en su origen en el tronco braquiocefálico. Se aplicó un clip temporal en el origen CCA y otro, 2 cm por encima. Este segmento fue tratado con una inyección local de 100 U de elastasa durante 20 min. Se creó un segundo aneurisma (bifurcación) mediante la sutura de una bolsa arterial tratada con elastasa en la anastomosis de extremo a lado del CCA derecho al CCA izquierdo. La permeabilidad se controló mediante angiografía de fluorescencia inmediatamente después de la creación.

La duración promedio de la cirugía fue de 221 min. La creación de dos aneurismas en el mismo animal fue exitosa en todos los conejos sin complicaciones. Todos los aneurismas fueron patentes inmediatamente después de la cirugía, excepto un aneurisma de bifurcación, que mostró una reacción tisular extrema debido a la incubación de elastasa y una trombosis intraluminal inmediata. No se observó mortalidad durante la cirugía y hasta un mes de seguimiento. La morbilidad se limitó a un síndrome vestibular transitorio (un conejo), que se recuperó espontáneamente en un día.

Aquí se demuestra por primera vez la viabilidad de crear un modelo de conejo de dos aneurismas con características hemodinámicas de muñón y bifurcación y condiciones de pared altamente degeneradas. Este modelo permite el estudio del curso natural y las posibles estrategias de tratamiento sobre la base de la biología del aneurisma en diferentes condiciones de flujo.

Introduction

El aneurisma intracraneal es una afección grave con una tasa de mortalidad después de la rotura que alcanza el 50% y discapacidad a largo plazo en el 10-20% de los pacientes¹. La última década ha visto un rápido desarrollo de las opciones de tratamiento endovascular pero, al mismo tiempo, también una tasa creciente de recurrencia con hasta un 33% de recanalización del aneurisma después de enrollar ^2,3. Para comprender mejor la fisiopatología subyacente a la oclusión y recanalización del aneurisma, así como para el desarrollo y prueba de nuevos dispositivos endovasculares, actualmente ex....

Protocol

NOTA: El experimento fue aprobado por el Comité Local para el Cuidado de los Animales del Cantón de Berna, Suiza (Número de solicitud BE108/16), y todos los cuidados y procedimientos de los animales se realizaron de acuerdo con las directrices institucionales y los principios 3R^15,16. Los datos se informan de acuerdo con las directrices ARRIVE. El manejo perioperatorio fue realizado por un anestesiólogo veterinario certificado por la junta. Para el estudio, las hembras de conejos blancos de Nueva Zelanda, con un peso medio de 4,0 (± 0,3) kg y una edad media de 25 (±5) semanas, se alojaron a una temperatura amb....

Results

La creación de un muñón y un aneurisma de bifurcación fue exitosa en los 5 conejos blancos de Nueva Zelanda sin complicaciones intraoperatorias. No se observó mortalidad durante la cirugía o durante el período de seguimiento de 24 ± 2 días. Un conejo experimentó complicaciones postoperatorias con un síndrome vestibular y ceguera del lado derecho. El animal se recuperó completa y espontáneamente después de 24 h. Esta complicación no interfirió con sus actividades normales (movimientos libres, ingesta de agua y alimentos, .......

Discussion

La técnica más común para la creación de aneurismas implica la creación de un aneurisma de muñón en el origen del CCA derecho, ya sea a través de un método abierto o endovascular. El modelo ha sido validado para ser un aneurisma estable no creciente que permanece abierto con el tiempo^20,21. La segunda técnica posible consiste en la creación microquirúrgica de un aneurisma de bifurcación arterial mediante la anastomosación del CCA derecho en el izquierdo y la sutu.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Sutura reabsorbible 4-0	Ethicon Inc., EE. UU.	VCP292ZH
Sutura reabsorbible 4-0	Ethicon Inc., EE. UU.	VCP304H
6-0 sutura no absorbible	B. Braun, Alemania	C0766070
9-0 sutura no absorbible	B. Braun, Alemania	G1111140
Adrenaline	Amino AG	1445419	cualquier genérico
Amiodarone	Helvepharm AG	5078567
máquina de anestesia	Drä ger		cualquier otra
Aspirina	Sanofi-Aventis (Suisse) SA	622693	cualquier Atropina Genérica
	Labatec Pharma SA	6577083	cualquier Filtro de paso de
banda genérico azul	Thorlabs	FD1B	cualquier otro
Filtro de paso de banda verde	Thorlabs	FGV9	cualquier otro
clip de vaso Biemer (2x)	B. Braun Medical AG, Aesculap, Suiza	FD560R	cualquier otro
Pinza			cualquier otro
Índice biespectral (neonatal)			cualquier otro
Manguito de presión arterial (neonatal)		cualquier otro
Bycilces spotlight			cualquier otro
Clamoxyl	GlaxoSmithKline AG	758808	cualquier genérico
Dexmedetomidina	Ever Pharma	136740-1	cualquier genérico
Elastase	Sigma Aldrich	E7885
Electrodos de
Ephedrine	Amino AG	1435734
Esmolol	OrPha Swiss GmbH	3284044
Fentanilo (uso intravenoso)	Janssen-Cilag AG	98683
Fentanilo (transdérmico)	Mepha Pharma AG	4008286
Fluoresceína	Curatis AG	5030376
Fragmin	Pfizer PFE Switzerland GmbH	1906725
Almohadilla térmica o sistema
Solución isotónica de cloruro de sodio (0,9%)	Fresenius KABI	336769
Ketamina	Pfizer PFE Switzerland GmbH	342261
retractor			de tapa Approach
Lidocaína	Streuli Pharma AG	747466
Longuettes
Metacam	Boehringer Ingelheim	P7626406	Medicación
Metadona	Streuli Pharma AG	1084546	Sedaton
Micropinzas  curvo	Ulrich Swiss, Suiza	U52-015-15
Micropinzas  recto 2x	Ulrich Swiss, Suiza	U52-010-15
Microtijeras	Ulrich Swiss , Suiza	U52-327-15
Midazolam	Accord Healthcare AG	7752484
Aguja 23 G			arteriotomía
Portaagujas
O2-Mascarilla
Microscopio de operación	Wild Heerbrugg
Papaverin	Bichsel		aplicación tópica
Povidona yodada	Mundipharma Medical Company		cualquier genérico
Prilocaína-lidocaína crème	Emla
Propofol	B. Braun Medical AG, Suiza		Anestesia general
Oxímetro
Sonda de temperatura rectal (neonatal)
Ringer Lactate	Bioren Sintetica SA		Infusión
Ropivacain	Aspen Pharma Schweiz GmbH	1882249	Anestesia local
Bisturí	Swann-Morton	210
Afeitadora
Pinza
Separador
blandos Cuencos de esponja de
Microhisopos estériles Estetoscopio
Paño			quirúrgico
Tijeras quirúrgicas
Jeringas 1 mL, 2 mL y 5 mL
Tris-Buffer	Sigma Aldrich	93302	Solución de elastasa
Aplicador de clip vascular	B. Braun, Alemania	FT495T
Catéter venoso y arterial
Enfoque
cámara de vídeo o smartphone
Vitarubin	Streuli Pharma AG	6847559
Yasargil titan clip estándar (2x)	B. Braun Medical AG, Aesculap, Suiza	FT242T