La hemorragia subaracnoidea sigue conllevando una alta carga de mortalidad y morbilidad en el hombre. Para facilitar la investigación adicional sobre la condición y su fisiopatología, se presenta un modelo pre-quiasmático de inyección única.
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Artículo de método
La hemorragia subaracnoidea sigue conllevando una alta carga de mortalidad y morbilidad en el hombre. Para facilitar la investigación adicional sobre la condición y su fisiopatología, se presenta un modelo pre-quiasmático de inyección única.
A pesar de los avances en el tratamiento en las últimas décadas, la hemorragia subaracnoidea (HSA) sigue conllevando una alta carga de morbilidad y mortalidad, afectando en gran medida a una población bastante joven. Se han desarrollado varios modelos animales de HSA para investigar los mecanismos fisiopatológicos detrás de la HSA y para probar intervenciones farmacológicas. El modelo de inyección única pre-quiasmático en la rata presentado en este artículo es un modelo experimental de HSA con un volumen sanguíneo predeterminado. Brevemente, el animal es anestesiado, intubado y mantenido bajo ventilación mecánica. La temperatura se regula con una almohadilla térmica. Se coloca un catéter en la arteria caudal, lo que permite la medición continua de la presión arterial, así como la toma de muestras de sangre. La membrana atlantooccipital se incide y se coloca un catéter para el registro de presión en la cisterna magna para permitir la medición de la presión intracerebral. Este catéter también se puede utilizar para intervenciones terapéuticas intratecales. La rata se coloca en un marco estereotáxico, se perfora un orificio de rebabas anteriormente al bregma, y se inserta un catéter a través del orificio de rebaba y se coloca justo antes del quiasma óptico. La sangre autóloga (0,3 ml) se extrae del catéter de la cola y se inyecta manualmente. Esto resulta en un aumento de la presión intracerebral y una disminución del flujo sanguíneo cerebral. El animal se mantiene sedado durante 30 min y se le administra solución salina subcutánea y analgésicos. El animal es extubado y devuelto a su jaula. El modelo prequiasmático tiene una alta tasa de reproducibilidad y una variación limitada entre animales debido al volumen sanguíneo predeterminado. Imita la HSA en humanos, lo que la convierte en un modelo relevante para la investigación de la HAS.
La hemorragia subaracnoidea no traumática (HSA) es una forma de accidente cerebrovascular, que representa alrededor del 5% de todos los casos. La causa más común de HSA no traumática es la ruptura repentina de un aneurisma (HASA), que representa el 85% de los HSA. Otras causas incluyen la ruptura de una malformación arterio-venosa, coagulopatías y ruptura de venas en hemorragia perimesencefálica1. La tasa de incidencia es de 9 por 100.000 años-persona, con una mortalidad de alrededor de uno de cada tres y otro tercio que requiere el apoyo de la vida diaria después de la HAS 2,3.
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Este procedimiento se realiza de acuerdo con la Directiva 2010/63/UE de la Unión Europea relativa a la protección de los animales utilizados con fines científicos y aprobado por la Inspección Danesa de Experimentación Animal (licencia no. 2016-15-0201-00940). La cirugía se realiza utilizando una técnica aséptica en la mayor medida posible, incluyendo instrumentos estériles, guantes, catéteres y suturas. El estudio utilizó ratas Sprague-Dawley macho y hembra con un peso de 230-350 g, agrupadas en ciclo de luz/oscuridad de 12 h, con temperatura constante de 22 °C (± 2 °C) y humedad del 55% (± 10%). Los animales están provistos de comida estándar y agua ad libitum. Los a....
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Las mujeres tienen un mayor riesgo de aSAH en comparación con los hombres. A pesar de esto, los roedores machos se utilizan principalmente en experimentos debido al posible sesgo de la heterogeneidad del ciclo del estro en las hembras. Los resultados representativos presentados aquí provienen de una publicación reciente que compara ratas hembras y machos, lo que confirma que el modelo produce resultados similares en animales hembras en comparación con machos21. El estudio incluyó 34 ratas Sprague-.......
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El modelo de inyección única prequiasmática de la HSA imita varios elementos importantes de la HSA humana, incluido el aumento de la PIC, la reducción de la CBF, la isquemia global transitoria, la regulación positiva de los marcadores neuroinflamatorios y la MVC 14,15,16,18,19,20. La sonda ICP también se utilizó como puerto p.......
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Los autores no tienen intereses contradictorios que declarar.
El trabajo fue apoyado por la Fundación Lundbeck y la Beca de Excelencia Lundbeck (no. R59-A5404). Los financiadores no tuvieron ningún papel en ninguna parte del manuscrito.
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Catéter de vena periférica de 16 G | BD Venflon | 393229 | Aguja acortada, distal curvada 1 cm. Alas |
| retiradas Campana/cámara de anestesia | Desconocido | ||
| Analizador de gases en sangre | Radiómetro | ABL80 | |
| Monitor de presión arterial (PA) | Adinstruments | ML117 | Se conecta a Powerlab |
| Pinzas curvas, 12 cm x 3 | F.S.T | 11001-12 | Para anestesia |
| Almohada cilíndrica, 28 cm x 4 cm | Hecho | en casa toallas quirúrgicas Hardware de | |
| adquisición de datos | Adinstruments | ML870 Powerlab | |
| Software de adquisición de datos | Adinstruments | LabChart 6.0 | |
| Drill | KMD | 1189 | |
| Controlador de perforación | Silfradent | 300 IN | |
| Luz flexible | Schott | KL200 | |
| Almohadilla térmica | Minco | 1135 | |
| Aguja hipodérmica, 20 G | KD Medical | 301300 | marco estereotáxico |
| Adinstruments | ML117 | Se conecta al | |
| vaporizador de isoflurano | Ohmeda | TEC3 | |
| Laptop | Lenovo | T410 | |
| Monitor láser doppler | Adinstruments | ML191 | |
| Sonda láser doppler | Oxford Optronics MSF100XP | Se conecta al monitor láser Doppler | |
| Portaagujas, 13 cm | F.S.T | 12001-13 | Para anestesia |
| Jeringa de precisión, 0,025 mL | Hamilton | 547407 | |
| Marco estereotáxico | Kopf Instruments | M900 | |
| Microscopio quirúrgico | Carl Zeiss | F170 | |
| Sutura aguja | Allgaier | 1245 | Para anestesia |
| Controlador de temperatura | CWE,INC. | TC-1000 | |
| Transductor x 2 | Adinstruments | MLT0699 | Se conecta al monitor BP e ICP |
| Ventilador | Ugo Basile | 7025 | |
| Cortaúñas | veterinaria Aesculap | GT421 | |
| Retractor Blair de 3 puntas, 13,5 cm | Agnthos | 17022--13 | |
| Retractor romo Alm | F.S.T | 17008-07 | |
| Pinza curva, 12 cm x 2 | F.S.T | 11001-12 | |
| Portaagujas, 13 cm | F.S.T | 12001-13 | |
| Pinza Dumont recta, 11 cm | F.S.T | 11252-00 | |
| Hemostático recto Halsted-Mosquito x 2 | F.S.T | 13008-12 | |
| Tijera de iris recta, 9 cm | F.S.T | 14090-09 | |
| Tijera Vannas recta, 10,5 cm | F.S.T | 15018-10 | |
| Hisopos absorbibles | Kettenbach | 31603 | |
| Hilo de seda negro, 4-0, 5 x 15 cm | Vö mel | 14757 | |
| Cera de hueso | Aesculap | 1029754 | |
| Gel de ojos de carbómero 2 mg/g | Paranova | ||
| Hisopo de algodón | Heinz Herenz | WA-1 | |
| Aplicador con punta de algodón x 4 | Selefa | 120788 | |
| Aguja hipodérmica, 23 G x2 | KD Medical | 900284 | Se conecta a la llave de paso. Retire el extremo distal |
| Aguja hipodérmica, 23 G x3 | KD Medical | 900284 Retire el extremo distal. 2 se conecta a la llave de paso, 1 a la jeringa Sonda | |
| ICP: | Hecho en | de lo siguiente:Tubo de | |
| polietileno, 20 mm | Smiths medical | 800/100/200 | Diámetro interior (ID): 0,58 mm, Diámetro exterior (OD): 0,96 mm. |
| Tubo de silicona, 10 mm | Fisher | 15202710 | ID: 0,76 mm, OD: 2,4 mm. |
| Tubo de silicona, 2 mm | Fisher | 11716513 | ID: 1,0 mm, OD: 3,0 mm. |
| Tubos de micro hematocrito | Marca | 7493 11 | |
| OP-toalla, 45 cm x75 cm | Mö lnlycke | 800430 | |
| Adaptador PinPort, 22 G | Instech | PNP3F22 | |
| Inyector PinPort | Instech | PNP3M | |
| Tubo de polietileno, 2 x 20 cm | Smiths medical | 800/100/200 | Se conecta a la jeringa. Diámetro interior: 0,58 mm, diámetro exterior: 0,96 mm. |
| Goma | elástica Desconocido | ||
| Bisturí, 10 hojas | Kiato | 23110 | |
| Spinalneedle, 25 G x 3.5'' | Braun | 5405905-01 | |
| Sistema de llave de paso, Discofix x 2 | Braun | 16494C | Se conecta al transductor |
| Sutura, 4-0, monofila, no reabsorbible x 3 | Jeringa de EH7145H | ||
| , 1 mL | BD Plastipak | 1710023 | |
| Jeringa, luer-lock, 10 mL x 4 | BD Plastipak | 305959 | Se conecta al transductor |
| Pegamento adhesivo para tejidos | 3M | 1469SB | |
| 0,5% Alcohol de clorhexidina | Faaborg Pharma | 210918 | |
| Carprofeno 50 mg/mL | ScanVet | 43715 | Diluido 1:10 |
| Isoflurano | Baxter | ||
| Suero fisiológico isotónico | Amgros | 16404 | |
| Lidocaína-Adrenalina 10 mg/5 y micro; g/mL | Amgros | 16318 |
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