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Artículo de método
* These authors contributed equally
Este protocolo muestra que el oxígeno hiperbárico puede mejorar la inhibición de la proliferación y la apoptosis de las células de glioma U251 tratadas con irradiación de rayos X mediante el bloqueo de las células en la fase G2/M. Esto mejora la radiosensibilidad de las líneas celulares de glioma humano.
El objetivo de este estudio fue explorar el uso del oxígeno hiperbárico para mejorar la radiosensibilidad de las células de glioma humano. Las células de glioma humano U251 subcultivadas se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: un grupo de control no tratado, células tratadas solo con oxígeno hiperbárico (HBO), células tratadas solo con irradiación de rayos X (rayos X) y células tratadas con HBO y rayos X. En estos grupos se observó la morfología celular, la actividad de proliferación celular, la distribución del ciclo celular y la apoptosis para evaluar el papel de la HBO en la mejora de la radiosensibilidad de las células de glioma. Con el aumento de las dosis de rayos X (0 Gy, 2 Gy, 4 Gy, 6 Gy, 8 Gy), la fracción de supervivencia (SF) de las células de glioma disminuyó gradualmente.
Se observó una SF significativamente menor para las células tratadas con el HBO y los rayos X juntos que en el grupo de rayos X para cada dosis (todos los P < 0,05). La inhibición de la proliferación fue significativamente mayor en el grupo de HBO combinado con rayos X que en el grupo de rayos X para cada dosis (todos los P < 0,05) para la línea celular U251. El porcentaje de células de fase G2/M fue significativamente mayor en el grupo de HBO combinado con rayos X (2 Gy) (26,70% ± 2,46%) y en el grupo de HBO (22,36% ± 0,91%) que en el grupo de control (11,56% ± 2,01%) y en el grupo de rayos X (2 Gy) (10,35% ± 2,69%) (todos P < 0,05). La apoptosis de las células U251 fue significativamente mayor en el grupo de HBO combinado con rayos X (2 Gy) que en el grupo de HBO, el grupo de rayos X (2 Gy) y el grupo de control (todos los P < 0,05). Concluimos que el HBO puede mejorar la inhibición de la proliferación y la apoptosis de las células de glioma U251 mediante el bloqueo de las células de glioma en la fase G2/M y mejorar la radiosensibilidad de las células de glioma U251.
El glioma es un tumor intracraneal primario que se origina a partir de las células gliales del sistema nervioso central1. La estrategia de tratamiento actual para el glioma es la cirugía combinada con radioterapia y quimioterapia. La radioterapia postoperatoria para el glioma puede proporcionar beneficios de supervivencia (evidencia de grado I), y la radioterapia postoperatoria temprana puede prolongar eficazmente la supervivencia del paciente (evidencia de grado II)2. Para los gliomas de grado superior (grado III o IV), especialmente los glioblastomas altamente malignos e invasivos (evi....
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Todos los métodos de estudio fueron aprobados por la Junta de Revisión Institucional y el Comité de Ética del Segundo Hospital Afiliado a la Universidad de Lanzhou y se realizaron de acuerdo con las directrices y regulaciones pertinentes.
1. Tratamiento de las células de glioma
NOTA: En este experimento se utilizó la línea celular de glioma U251.
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Cultivo de células de glioma U251
Las células de glioma U251 tenían una forma fusiforme de 24 h a 48 h después del cultivo en DMEM y se adherieron. Estas células se utilizaron para estudios posteriores (Figura 1).
Morfología y recuento de células de glioma
Los recuentos celulares de las células de glioma U251 en el grupo de HBO combinado con rayos X (2 Gy) fueron significativamente más bajos que los del grupo de rayos X (2 G.......
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La línea celular de glioma U251 es una de las líneas celulares de glioma humano más clásicas y se utiliza ampliamente como modelo de glioma en muchos estudios.
Efectos del HBO en la proliferación de células de glioma U251
La HBO generalmente se refiere a respirar oxígeno puro (100% de concentración de oxígeno) en una cámara sellada con una presión 1,5-3 veces más alta que la presión atmosférica normal, lo que puede aumentar el contenido de .......
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Los autores no tienen conflictos de intereses que declarar.
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Búfer de enlace | Dickinson and Company | RH10 9RR | |
| CCK-8 | DOJINDO | Ensayo de recuento de células | NJ |
| CELL FIT&NBSP; | análisis del ciclo celular (contenido de ADN) | ||
| CELLQUEST | análisis de células apoptóticas | ||
| DMEM y anexina V-FITC | Citómetro de flujo Gibco BRL | ||
| Glioma de Dickinson | |||
| acelerador lineal médico | Elekta Limited Company | ||
| lector | |||
| MOD FITLT formac v1.01 | análisis celular--tripsina de fase del ciclo celular | ||
| Hyclone Laboratories Inc |
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