Aquí, describimos una técnica de imagen in vivo utilizando tomografía de coherencia óptica para facilitar el diagnóstico y la medición cuantitativa de la retinopatía en ratones.
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Artículo de método
Aplicación de la tomografía de coherencia óptica a un modelo de retinopatía en ratones
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En este artículo
Resumen
Resumen
La tomografía de coherencia óptica (OCT) ofrece un método no invasivo para el diagnóstico de la retinopatía. La máquina OCT puede capturar imágenes transversales de la retina a partir de las cuales se puede calcular el grosor de la retina. Aunque la OCT es ampliamente utilizada en la práctica clínica, su aplicación en la investigación básica no es tan frecuente, especialmente en animales pequeños como los ratones. Debido al pequeño tamaño de sus globos oculares, es difícil realizar exámenes de imágenes de fondo de ojo en ratones. Por lo tanto, se requiere un sistema especializado de imágenes de retina para acomodar las imágenes de OCT en animales pequeños. Este artículo demuestra un sistema específico de animales pequeños para los procedimientos de examen de la OCT y un método detallado para el análisis de imágenes. Se presentan los resultados del examen de OCT retiniana de ratones knockout con receptor de lipoproteínas de muy baja densidad (Vldlr) y ratones C57BL / 6J. Las imágenes OCT de ratones C57BL / 6J mostraron capas retinianas, mientras que las de ratones knockout Vldlr mostraron neovascularización subretiniana y adelgazamiento de la retina. En resumen, el examen de OCT podría facilitar la detección y medición no invasiva de la retinopatía en modelos de ratón.
Introducción
La tomografía de coherencia óptica (OCT) es una técnica de imagen que puede proporcionar imágenes in vivo de alta resolución y transversales para el tejido 1,2,3,4,5,6,7,8, especialmente para el examen no invasivo en la retina 9,10,11,12 . También se puede utilizar p....
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Protocolo
Las operaciones se realizaron siguiendo la Declaración sobre el uso de animales en la investigación oftálmica y de la visión de la Asociación para la Investigación en Visión y Oftalmología. El diseño experimental fue aprobado por el Comité de Ética Animal institucional (Comité de Ética Médica de JSIEC, EC 20171213(4)-P01). En este estudio se utilizaron ratones C57BL / 6J de dos meses de edad y ratones knockout Vldlr . Había 7 ratones en cada grupo, todos los cuales eran hembras y pesaban de 20 g a 24 g.
1. Condiciones experimentales
- Asigne los ratones a dos grupos: un grupo experimental formado por ratones knockout Vl....
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Resultados
Gracias a los escaneos de alta resolución de OCT, se pueden observar las capas de la retina del ratón y se pueden identificar reflejos anormales y sus ubicaciones exactas. Las imágenes de OCT retiniana de ratones knockout Vldlr y ratones C57BL / 6J se compararon en este estudio. Las imágenes OCT de todos los ratones C57BL / 6J mostraron varias capas retinianas con diferente reflectividad, y la demarcación fue clara (Figura 8D). En contraste, todos los ratones knockout Vldlr.......
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Discusión
En este estudio, se aplicaron imágenes de OCT utilizando un sistema de imágenes de retina de animales pequeños para evaluar los cambios retinianos en ratones knockout Vldlr , que demuestran desprendimiento vítreo posterior incompleto, neovascularización subretiniana y adelgazamiento del grosor de la retina. La OCT es un método de imagen no invasivo para examinar la condición de la retina in vivo. La mayoría de los dispositivos OCT están diseñados para el examen ocular humano. El tamaño del equipo de har.......
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Divulgaciones
Los autores declaran no tener ningún posible conflicto de intereses.
Agradecimientos
Fuente del proyecto: Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Guangdong (2018A0303130306). Los autores desean agradecer al Laboratorio de Investigación Oftalmológica, al Centro Oftalmológico Internacional Shantou Conjunto de la Universidad de Shantou y a la Universidad China de Hong Kong por la financiación y los materiales.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Lente de contacto de 100 Dpt | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | Accesorio perteneciente a la RETImap | |
| Lente de vidrio doble asférica de 60 Dpt | Volk Optical,Inc, Mentor, OH | Accesorio perteneciente a la RETImap | |
| Manta calefactora eléctrica | POPOCOLA | CW-DRT-01 | 50 x 35 cm |
| Jeringa de inyección (1 mL) | Kaile | 0.45 x 16RWLB | |
| Levofloxacino Clorhidrato Gel para Ojos | EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD | 5 g: 0,015 g | |
| Gel médico de hialuronato de sodio | Alcon | 16H01E | |
| Jeringas de microlitros | Shanghai paloma alta industria y comercio co., LTD | Q31/0113000236C001-2017 | 50 µ L |
| Povidona solución de yodo | Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD | 100 mL | |
| RETImap ROLAND | CONSULT | 19-99_50-2.1_1.2E | cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP |
| Aretes de animales pequeños | OSMO POCKET OT110 | INS1005-1S | |
| Tropicamide Fenilefrina Colirio Santen | Pharmaceutical Co.,LTD | 5 mg/mL | |
| Xilacina | Sigma | X1251-5G | 5 g |
| Zoletil 50 | Virbac.S.A | 7FRPA | Tiletamina 125 mg + Zolazepam 125 mg |
Referencias
- Frombach, J., et al. Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers. Pharmaceutics. 12 (9), 862(2020).
- Osiac, E., Săftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R.
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Reimpresiones y permisos
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