Hasta la fecha, el desarrollo de métodos de identificación de la glándula paratiroides (PG) está limitado por la falta de modelos animales en la investigación preclínica. Aquí, establecemos un modelo de rata simple y efectivo para imágenes intraoperatorias de PG y evaluamos su efectividad mediante el uso de nanopartículas de óxido de hierro como un nuevo agente de contraste de PG.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
Establecimiento de un modelo de rata simple y eficaz para la obtención de imágenes intraoperatorias de la glándula paratiroides
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
La identificación de la glándula paratiroides (PG) es una necesidad crítica insatisfecha en la tiroidectomía. La identificación de la PG es un desafío en la cirugía de tiroides, ya que es similar en color a la glándula tiroides. La falta de modelos animales efectivos en la investigación preclínica es una limitación severa para el desarrollo de técnicas de identificación de PG. Este protocolo permite establecer un modelo de rata simple y eficaz para la identificación de PG. En este modelo, las nanopartículas de óxido de hierro negro (IONP) se inyectan localmente en la glándula tiroides y se difunden rápidamente dentro de la glándula tiroides, pero no en el PG. Un PG teñido negativamente y una glándula tiroides teñida positivamente se pueden identificar fácilmente a simple vista sin necesidad de microscopios externos. La posición del PG se puede identificar aumentando el contraste de color entre la glándula tiroides y el PG, basado en el color de los IONP negros. Este modelo de rata es de bajo costo y conveniente para la identificación de PG, y los IONP son un nuevo agente de contraste de PG.
Introducción
La glándula paratiroides (PG) son pequeñas glándulas endocrinas de forma ovalada ubicadas en el cuello de humanos y otros vertebrados, que producen y secretan hormonas paratiroideas para regular y equilibrar los niveles de calcio y fósforo en la sangre y en los huesos1. Los seres humanos generalmente tienen dos pares de PG ubicados detrás de los lóbulos de la glándula tiroides en ubicaciones variables; el tamaño de la PG humana mide típicamente 6 mm x 4 mm x 2 mm, con un peso de aproximadamente 35-40 mg2. La extirpación o el daño de la PG causa hipoparatiroidismo (HP), un trastorno endocrino caracterizado por hipocalcemi....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Protocolo
Todos los estudios en animales han sido aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) del Instituto de Medicina Básica y Cáncer de la Academia China de Ciencias. Esta es una cirugía de no supervivencia.
1. Animal
- Utilice una rata SD hembra de 6-8 semanas de edad, con un peso de 250 g, para la obtención de imágenes de PG intraoperatorias.
2. Anestesia
- Encienda la máquina de anestesia.
- Antes de comenzar, asegúrese de que el nivel de isoflurano esté lleno en el vaporizador de anestesia. Luego, encienda....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Resultados
En este modelo animal, incisimos quirúrgicamente el cuello de una rata SD para exponer la tráquea, la laringe y los tejidos circundantes. Luego, la glándula tiroides se ubicó visualmente a ambos lados de la tráquea; Tiene forma de mariposa y mide aproximadamente 3 mm x 5 mm. Un par de PG generalmente se encuentran en la parte superior de la glándula tiroides, y su color es muy similar al de los lóbulos de la glándula tiroides, lo que hace extremadamente difícil distinguirlos a simple vista (Figura 1<.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
Demostramos una técnica de imagen negativa guiada por IONPs de PG de rata utilizando IONPs negros, que se inyectaron localmente en el centro de la glándula tiroides y se difundieron dentro de la glándula tiroides pero no en el PG. Permite la identificación clara del PG a simple vista sin la ayuda de ningún microscopio. Aunque se han descrito ratones transgénicos con proteína verde fluorescente expresada selectivamente en el PG13, el modelo descrito en este trabajo es más sencillo de realizar. Solo.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Divulgaciones
P.G. y W.Z. son coinventores de una solicitud de patente presentada por el Hospital del Cáncer de la Universidad de la Academia China de Ciencias (Hospital de Cáncer de Zhejiang) basada en el proyecto. Los demás autores declaran no tener conflictos de intereses.
Agradecimientos
Este estudio fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (NSFC) (82172598), la Fundación de Ciencias Naturales de la provincia de Zhejiang, China (LZ22H310001), el Proyecto de Capacitación de Talentos de Salud 551 de la Comisión de Salud de la provincia de Zhejiang, China, y el Proyecto de Ciencia y Tecnología Médica y de Salud de la provincia de Zhejiang, China (2021KY110).
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| alcohol | Li feng | 9400820067 | |
| máquina de anestesia | RWD Company | R520IE | Máquina número |
| de cuchilla | Daopian | TB-JZ-10# | |
| cilíndrica | hecha por nosotros mismos | ||
| crema depilatoria | Nair | TMG-001 | |
| balanza electrónica | Hong xingda | CN-HXD2 | |
| eosina | Thermo Fisher (Waltham, Estados Unidos). | C0105S-2 | |
| eritromicina | Shuang ji (Pekín, China) | 200409 | |
| gasa | Fulanns | YY0331-2006 | |
| almohadilla térmica | Johon (ShenZhen, China) | JH-36-2006 | |
| hematoxilina | Thermo Fisher (Waltham, EE. UU.). | C0105S-1 | |
| aguja de inyección de insulina | Jiangyin NanquanMacromolécula | 20170702 | |
| bola de algodón yodóforo | HOYON | 19-6007 | |
| solución de nanopartículas de óxido de hierro | Zhongke Leiming Technology (Pekín, China) | Mag9110-05 | |
| isoflurano | Sigma Aldrich (St Louis, EE. UU.). | ||
| portaagujas | Meijun | MH0587 | |
| mesa de operaciones | BioJane | BJ-P-M | |
| de paraformaldehído | Biosharp | 21269333 | |
| caucho | G-CLONE | br/> XT41050 | |
| máquina de escaneo | Olympus | Slideview VS200 | |
| pinza quirúrgica | Suping | SPHC-0676 | |
| mango de bisturí quirúrgico | Aladdin | S3052-06-1EA | |
| retractor quirúrgico | TOCYTO | 18-4010 | |
| tijeras quirúrgicas | Suping | SPHC-0795 | |
| toalla quirúrgica | A lo largo de la tecnología | YCKJ-RJ-036205 | |
| sutura | Ethicon | SA84G | |
| sutura con aguja | Jinhuan (Shanghai, China) | F301 | |
| pinza vascular | a lo largo de la tecnología | YCKJ-RJ-016218 | |
| Baño de agua-Secador de tobogán | Hua su (Jinhua, China) | HS-1145 |
Referencias
- Cope, O., Donaldson, G. A. Relation of thyroid and parathyroid glands to calcium and phosphorus metabolism. Study of a case with coexistent hypoparathyroidism and hyperthyroidism. The Journal of Clinical Investigation. 16 (3), 329-341 (1937).
- Mansberger, A. R., Wei, J. P.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
