La tasa de filtración glomerular (TFG) es el marcador ideal para evaluar la función renal. Sin embargo, el método de medición estándar que utiliza la inyección de inulina con análisis seriados de sangre y orina no es práctico. Este artículo describe un método práctico para medir la TFG transdérmica en lechones.
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Artículo de método
Medición transdérmica de la tasa de filtración glomerular en lechones ventilados mecánicamente
* These authors contributed equally
En este artículo
Resumen
Resumen
La medición transdérmica de la tasa de filtración glomerular (TFG) se ha utilizado para evaluar la función renal en animales conscientes. Esta técnica está bien establecida en roedores para estudiar la lesión renal aguda y la enfermedad renal crónica. Sin embargo, la medición de la TFG utilizando el sistema transdérmico no se ha validado en cerdos, una especie con un sistema renal similar al de los humanos. Por lo tanto, investigamos el efecto de la sepsis sobre la TFG transdérmica en cerdos neonatos anestesiados y ventilados mecánicamente. La sepsis polimicrobiana fue inducida por ligadura y punción cecal (CLP). El sistema de medición transdérmica de TFG que consiste en un sensor de fluorescencia miniaturizado se conectó a la piel afeitada del cerdo para determinar el aclaramiento de sinistrina conjugada con fluoresceína-isotiocianato (FITC), un trazador de TFG inyectado por vía intravenosa. Nuestros resultados muestran que a las 12 h post-CLP, la creatinina sérica aumentó con una disminución de la TFG. Este estudio demuestra, por primera vez, la utilidad del enfoque transdérmico de TFG para determinar la función renal en cerdos neonatales con ventilación mecánica.
Introducción
Una evaluación práctica y cuantitativa de la función renal es la medición de la tasa de filtración glomerular (TFG), que indica qué tan bien los riñones filtran la sangre según el principio de aclaramiento1. Un método anterior de medición de la TFG implica la inyección intravenosa de compuestos exógenos como la inulina o la sinistrina, realizando mediciones seriadas de los niveles plasmáticos/urinarios para detectar su aclaramiento 2,3. Este método es engorroso y requiere la recolección en serie de muestras de plasma y orina4. Una alternativa es la medición de pr....
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Protocolo
Los procedimientos están escritos de acuerdo con los estándares nacionales para el cuidado y uso de animales de laboratorio y fueron aprobados por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Tennessee (UTHSC).
NOTA: Los lechones en el grupo experimental son sometidos a ligadura cecal y punción, mientras que el grupo simulado sólo se somete a la apertura del abdomen sin ligadura cecal o punción. Los lechones en ambos grupos se mantienen bajo anestesia durante 12 h después del procedimiento para permitir suficiente tiempo para que se produzca sepsis y lesión renal aguda ....
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Resultados
En esta sección, presentamos por primera vez, los datos representativos del uso de TFG transdérmica en cerdos neonatales. Se utilizó un modelo de ligadura y punción cecal que previamente ha demostrado disminuir la función renal28. En consecuencia, planteamos la hipótesis de que en nuestros cerdos CLP, debería haber una caída aguda de la TFG correspondiente a la LRA, y esto debería detectarse en el dispositivo transdérmico de TFG como un aumento del tiempo de aclaramiento (t1/2), validan.......
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Discusión
Este documento describe los pasos prácticos para determinar la función renal en cerdos utilizando los monitores de TFG transdérmicos miniaturizados y FITC-sinistrin en un modelo de cerdo neonatal anestesiado con ventilación mecánica. Artículos anteriores han establecido protocolos experimentales de TFG transdérmica en roedores11,12,14, pero no existen protocolos en cerdos.
Recientemente, ha habido un .......
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Agradecimientos
Este estudio fue apoyado por las subvenciones R01 DK120595 y R01 DK127625 de los Institutos Nacionales de Salud otorgadas al Dr. Adebiyi. El contenido de este documento es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa necesariamente las opiniones oficiales de los Institutos Nacionales de Salud. Gracias al Dr. Daniel Schock-Kusch, director de MediBeacon GmbH, por sus consejos.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Alfa - Cloralosa | Sigma-Aldrich | C0128-25G | Se utiliza para el mantenimiento de la anestesia |
| Seda trenzada negra 3-0 | Especialidades Quirúrgicas | SP117 | Corbata de seda para la tracción y ligadura de vasos sanguíneos |
| Máquina de centrifugación AccuSpin 8C | Fischer Scientific | 75-008-821 | Se utiliza para extraer plasma de una muestra de sangre entera |
| Tubo endotraqueal | 3.0 sin manguitoProgressive Medical International 1109021995 | Insertado a través de traqueostomía | |
| FITC-Sinistrin 1.0 g | MediBeacon Inc. | FTCF S001 | Almacenar a temperatura ambiente y proteger de la luz |
| GEM Premier 3000 Analizador de gases en sangre | Laboratorio de instrumentación | 5700 | Para análisis de gases en sangre a pie de cama |
| Almohadilla térmica de tamaño mediano 20 in x 29 in | Adroit Medical Systems | V029 | Se conecta a la bomba de terapia |
| de calor HTP-Bomba de terapia de calor | Adroit Medical Systems | HTP | Le permite configurar la temperatura según sea necesario. |
| IDEXX Catalyst One | IDEXX Laboratories | 89-92525-00 | Análisis de creatinina plasmática |
| Catéter de presión arterial invasivo 3.5Fr | Millar | SPR-524 | Insertado en la arteria femoral |
| Juego de administración intravenosa con regulador de flujo | True Care | TCRTCBINF033G | Se utiliza para conectar la bolsa de líquido intravenoso al catéter venoso |
| Ketamina | Covetrus | 68317 | Se utiliza para la inducción de la anestesia |
| Software de análisis MediBeacon versión 3.0 | MediBeacon Inc. | N/A Programa | de software utilizado para el análisis de datos para obtener la vida media y curva del aclaramiento de sinistrina |
| Unidad de filtro de jeringa Millex-GV 0,22 y micro; m | Millipore Sigma SLGVR33RS | Filtro de jeringa para inyección de cloralosa | |
| Ventilador para neonatos/lactantes | Sechrist Millennium | 20409 | Conectado al suministro de aire para proporcionar ventilación a través de un tubo endotraqueal |
| Fenobarbital Sodio + Fenitoína Sódica (Euthasol) | Covetrus | 72934 | Utilizado para la eutanasia |
| Ringer Lactato 500 mL bolsa | Baxter | 2B2323Q | Infusión de líquido de mantenimiento |
| Guantes estériles | Henry Schein | 104-5920 | Utilizados por el operador durante la cirugía |
| Bata estéril | Halyard Health | 95021 | Utilizados por el operador durante la cirugía |
| Toalla estéril | Medline | 42131704 | Se utiliza como cortina para mantener el campo estéril durante la operación |
| Suture 3-0 seda aguja de corte inverso | Ethicon NC1842168 | Se utiliza para suturar capas de la pared abdominal | |
| Transdermal Mini GFR Monitor | MediBeacon Inc. | TDM004 | Batería y conector USB incluidos en el paquete |
| Parche adhesivo para monitor transdérmico | MediBeacon Inc. | PTC-SM001 | Parche adhesivo de doble cara para sonda GFR |
| Cinta umbilical de 1/8 pulgadas x 20 yardas | Fisher Scientific | NC9303017 | Para asegurar el tubo endotraqueal |
| Catéter venoso tamaño PE/5 | Tubo micromédico | BB31695 | Para la canulación de la vena femoral |
| Xilacina | Covetrus | 61035 | Se utiliza para la inducción de la anestesia |
Referencias
- Pasala, S., Carmody, J. B. How to use... serum creatinine, cystatin C and GFR. Archives of Disease in Childhood Education and Practice Edition. 102 (1), 37-43 (2017).
- Smith, H. W. The Kidney: Structure and Function in Health and Disease. , Oxford Universit....
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Reimpresiones y permisos
