Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Un modelo de estenosis valvular aórtica de conejo inducida por lesión directa con balón

2.2K visualizaciones

⸱

DOI:

10.3791/65078

⸱

31 de marzo de 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Se necesita un modelo animal apropiado para comprender los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) y para evaluar la eficacia de las intervenciones terapéuticas. El presente protocolo describe un nuevo procedimiento para desarrollar el modelo de conejo AVS a través de una lesión directa con balón in vivo.

Resumen

Los modelos animales están emergiendo como una herramienta importante para comprender los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) debido a la falta de acceso a fuentes confiables de válvulas aórticas humanas enfermas. Entre los diversos modelos animales, los modelos de conejo AVS son uno de los más utilizados en estudios con animales grandes. Sin embargo, los modelos tradicionales de conejo AVS requieren un período prolongado de suplementación dietética y manipulación genética para inducir una estenosis significativa en la válvula aórtica, lo que limita su uso en estudios experimentales. Para abordar estas limitaciones, se propone un nuevo modelo de conejo AVS, en el que la estenosis es inducida por una lesión directa con balón en la válvula aórtica. El presente protocolo describe una técnica exitosa para la inducción de AVS en conejos blancos de Nueva Zelanda (NZW), con procedimientos paso a paso para la preparación, el procedimiento quirúrgico y el cuidado postoperatorio. Este modelo simple y reproducible ofrece un enfoque prometedor para estudiar el inicio y la progresión de la AVS y proporciona una herramienta valiosa para investigar los mecanismos patológicos subyacentes de la enfermedad.

Introducción

Cada vez se reconoce más que el uso de modelos animales apropiados puede contribuir a una mejor comprensión de los mecanismos patológicos subyacentes a la estenosis de la válvula aórtica (EAV) debido a la falta de acceso a fuentes fiables de válvulas aórticas humanas enfermas asociadas con la progresión de la estenosis aórtica (EA). Entre los diversos modelos animales para el estudio de la AVS, los conejos son uno de los modelos AVS de animales grandes más utilizados, y el modelo de conejo AVS se induce a través de la suplementación con colesterol/vitamina D2 o la manipulación genética 1,2,3,4.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

Todos los procedimientos de investigación con animales fueron aprobados y realizados de acuerdo con la Ley de Bienestar de los Animales de Laboratorio, la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio y las Directrices y Políticas para Experimentos con Animales proporcionadas por el Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC) de la Facultad de Medicina de la Universidad Católica de Corea (número de aprobación: CUMC-2021-0176-05). En el presente estudio se utilizaron conejos blancos machos de Nueva Zelanda (NZW) de 3 meses de edad con un peso de 3,5-4,0 kg, que se mantuvieron en condiciones estándar en jaulas individuales. Los conejos fueron alim....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

Modelo AVS de conejo inducido por lesión valvular aórtica
Para inducir el modelo AVS de conejo, se utilizaron conejos machos NZW con un peso de 3,5-4,0 kg para este estudio. De acuerdo con los procedimientos quirúrgicos descritos en el paso 2 (Figura 2), el modelo AVS se estableció por lesión valvular aórtica, lo que resultó en degeneración mecánica de la válvula aórtica y calcificación. El grupo de control incluyó conejos alimentados con una dieta enriquecida con 0,5% de.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

Los modelos animales de AVS se utilizan comúnmente para estudiar los aspectos patológicos de AVS, incluido el inicio y la progresión de AVS. Este protocolo introduce un nuevo modelo de AVS de conejo inducido por una lesión directa con balón en la válvula aórtica. En este estudio, el modelo de lesión valvular aórtica mostró un engrosamiento y calcificación significativo de las valvas. En comparación con el modelo AVS leve inducido por la suplementación dietética, la válvula aórtica en el modelo de lesión directa con balón.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

Los autores no tienen conflictos de intereses que declarar con este trabajo.

Agradecimientos

Este trabajo contó con el apoyo de una subvención de la Fundación Nacional de Investigación de Corea (NRF) financiada por el gobierno coreano (MSIT) (n.º 2020R1A4A3079570), el Ministerio de Educación (n.º 2021R1I1A1A01051425) y el Programa de Desarrollo Tecnológico Estratégico Industrial (n.º 20014873) financiado por el Ministerio de Comercio, Industria y Energía de la República de Corea.

....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
3-0 Sutura de sedaAILEESK312
4% paraformaldehído (PFA)IntronIBS-BP031-2
Solución de rojo de alizarinaMillporeTMS-008-C
ASAHI SION BLUE Alambre guíaASAHI
Cubierta de la mesa traseraYuhan kimberly80101-30
Dispositivo de inflado de globoDemax MedicalDID30s
Bionet Monitor veterinarioBIONETBM3 VET
C-ArmSIEMENS Healthcare GmbHCios alpha
Certified Rabbit Diet Purina53224.7% Aceite de Coco Hidrogenado, 0.5% Colesterol, & 1% Molasse
Curadle Smart IncubatorAutoelexCS-CV206 Unidad deCuidados Intensivos (UCI)
ErgocalciferolSigma-aldrich E5750Vitamina D2
Pinzas de conjuntiva de Fechtner titanioWORLD PRECISSION InstrumentWP1820
PinzasHEBUHB203
GentamicinaShin Poong
Glicopirrolato SamChunDang
Greenflex NSDAI HAN PHARMSolución salina normal 500 mL
HematoxilinaSigma-aldrich HT1079-1 SET
HeparinaJW farmacéutica25.000 U
perfusión de un solo usoSWOON MEDICAL
YodoGreen farmacéutico
IodixanolGE HealthcareVisipaqueSolución de inflado (agente de contraste)
Catéter intravenoso 22 GBD 
catéter intravenoso 24 GBD382412
KetoprofenoSamChunDang
Jeringa Luer-Lok 10 mLBecton Dickinson Medical
Jeringa Luer-Lok 3 mLBecton Dickinson
OLYMPUSSZ61
MicrotomoThermoFisher ScientificHM 325
MT kit de tinciónSigma-aldrichHT15-1kt
Soporte para agujasSolco009-1304
Portaagujas con bloqueo y suturaJEUNGDO BIO & PLANTAH-1222-18
ParafinaLK LABKOREAH06-660-107
PBSGibco10010-023
Cloruro de potasio 40Daihan PharmKCl
Prelude Vaina hidrofílica idealMERIT MEDICALPID4F11018SSVaina 4F
PTA Catéter de dilatación con balónBoston Scientific H749-3903280208-0Catéter balón 8,0 mm
RompunElancoXilaxina
gasa estérilDAE HAN Medical10 cm x 20 cm 
Guantes quirúrgicosAnsellAlbornoz quirúrgico Ansell
Yuhan Kimberly90002-02
Tijeras quirúrgicasNopa, AlemaniaAC020/16
Cinta quirúrgica3M micopore1530-1
Jeringa 1 mLShin Chang Medical
Jeringa 10 mLShin Chang Medical
Casete de tejidoScilav koreaCas3003
Transductor gel SUNGHEUNGSH102
TridolYuhan Corp.Tramadol HCl
Sistema de ultrasonidoPhilpsAffiniti 50
Von Kossa kit de tinciónAbcamab105689
Zoletil 50Virbac koreaTiletamine & zolazepam
Set de 382423 Microscopio médico

Referencias

  1. Aliev, G., Burnstock, G. Watanabe rabbits with heritable hypercholesterolaemia: A model of atherosclerosis. Histology and Histopathology. 13 (3), 797-817 (1998).
  2. Cimini, M., Boughner, D. R., Ronald, J. A., Aldington, L., Rogers, K. A.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Explorar más artículos

Modelo de conejoModelos animalesCalcificación valvularAnálisis histológicoGuía fluoroscópicaImagen ecocardiográficaAcceso a la arteria carótidaTinción tricrómica de Masson