El protocolo proporciona un proceso de estandarización detallado de la fórmula de decocción y la técnica de sonda nasogástrica con la decocción de Yiqi Jiedu en el modelo de ratón con osteosarcoma como ejemplo. Describe la protección de los animales y mejora la fiabilidad de los datos de investigación, proporcionando estrategias eficaces para investigar la eficacia terapéutica y los mecanismos moleculares de las fórmulas de decocción in vivo.
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Artículo de método
Estrategia de sonda nasogástrica para la fórmula de decocción de la medicina tradicional china en ratones modelo de osteosarcoma
En este artículo
Resumen
Resumen
La fórmula de decocción es la forma de dosificación más utilizada en la medicina tradicional china y se ha aplicado en la práctica clínica durante miles de años mediante administración transoral, que se caracteriza por un efecto rápido, una fácil absorción y un tratamiento individualizado basado en los síndromes específicos de los pacientes. La calidad de la fórmula de decocción es directamente responsable de la eficacia clínica de la medicina tradicional china; Por lo tanto, el proceso de estandarización de la fórmula de decocción es importante para evitar diferencias en la calidad de la decocción causadas por factores subjetivos. Mientras tanto, debido a las limitaciones de la realización de experimentos clínicos, los pequeños animales portadores de enfermedades humanas, como los ratones, se utilizan a menudo en la investigación médica para explorar la eficacia terapéutica y los mecanismos integrales de diferentes intervenciones, incluida la fórmula de decocción para la medicina tradicional china. En consecuencia, como método importante de administración transoral, la técnica de sonda nasogástrica especializada es particularmente importante para evitar posibles daños en el esófago y derrames de fármacos, lo que garantizará que se administre una cantidad igual de medicamento a cada animal modelo, lo que conducirá a resultados experimentales precisos. Además, el método estandarizado de preparación de la fórmula de decocción y la estrategia de sonda nasogástrica calificada son necesarios para proteger el bienestar animal y minimizar el número de animales utilizados. Aquí, informamos un proceso de estandarización detallado de la fórmula de decocción y la técnica de sonda nasogástrica con la decocción de Yiqi Jiedu en un modelo de ratón con osteosarcoma como ejemplo. La eficacia se evaluó por el volumen tumoral. Este protocolo maximizará la protección animal y mejorará la fiabilidad de los datos de investigación, proporcionando así estrategias eficaces para futuras investigaciones sobre la eficacia terapéutica y los mecanismos moleculares de la fórmula de decocción para la medicina tradicional china in vivo.
Introducción
La fórmula de decocción es la forma de dosificación más utilizada de la medicina tradicional china y los medicamentos líquidos 1,2. La fórmula de decocción de la medicina tradicional china se procesa decociendo las hierbas en agua después de remojarlas, seguidas de un filtrado para desechar las heces.
Debido a que la fórmula de decocción puede individualizarse en función de las necesidades clínicas, especialmente en línea con las características del tratamiento basado en la evidencia en la medicina tradicional china, esta forma farmacéutica por vía transoral se ha aplicado ....
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Protocolo
Este protocolo describe la técnica detallada de sonda nasogástrica en ratones modelo de osteosarcoma utilizando la decocción de Yiqi Jiedu como muestra. En este experimento se utilizaron ratones atímicos machos de cuatro semanas de edad (BALB/c desnudos) y se mantuvieron en la sala de cría de grado SPF del Centro de Animales de Laboratorio de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shanghai. Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité de Manejo de Animales de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shanghái, cumplieron con el Código de Ética para Animales de Laboratorio (Número de Aprobación de Ética Animal: PZSHUTCM2304060007) y....
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Resultados
El efecto inhibidor de la decocción de Yiqi Jiedu sobre el crecimiento del osteosarcoma in vivo se determinó en un modelo de ratón de osteosarcoma de xenoinjerto intratibial, que se preparó inyectando las células de osteosarcoma 143B en la tibia de ratones atímicos. La decocción de Yiqi Jiedu se administró a los ratones del grupo de decocción de Yiqi Jiedu por sonda nasogástrica durante 28 días a partir del segundo día de la inyección de 143B. Se administró solución salina fisiológica a los ratones del grupo de .......
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Discusión
La eficacia clínica de las hierbas prescritas en la medicina tradicional china se asocia en gran medida con la dosis administrada y la forma farmacéutica; Por lo tanto, el establecimiento de una estrategia de decocción estandarizada y un proceso de administración calificado son necesarios en la práctica clínica, así como en la mejora de la confiabilidad de los resultados experimentales.
En este estudio, primero proporcionamos una estrategia detallada para la decocción estandarizada de hierbas .......
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Divulgaciones
Los autores declaran que no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
El trabajo actual cuenta con el apoyo de subvenciones de (1) la Fundación Nacional de Ciencias de la Naturaleza (81973877 y 82174408), (2) el Programa Nacional Clave de Investigación y Desarrollo de China (2020YFE0201600), (3) el proyecto de construcción del Centro de Investigación de Alta Prioridad de Shanghái (2022ZZ01009), (4) el Centro de Innovación Colaborativa de Shanghái de Transformación Industrial de la Preparación de la MTC Hospitalaria y (5) los Proyectos de Investigación dentro del Presupuesto de la Universidad de Medicina Tradicional China de Shanghái (2021LK047).
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Línea celular 143B | ATCC | CRL-8303 | línea celular de osteosarcoma |
| Máquina de anestesia | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | R500IP | El equipo de ratones de anestesia |
| Contador automático de células | Shanghai Simo Biological Technology Co., Ltd | IC1000 | Recuento de células |
| BALB/c ratones atímicos | Shanghai SLAC Laboratory Animal Co, Ltd. | Hierba | |
| escutelaria con púas | Shanghai Yanghetang Tableta de medicina tradicional china Co., Ltd. | 20230606 | Medicamentos listos para la decocción |
| Matriz de membrana basal | Shanghai Uning BioscienceTechnology Co., Ltd | 356234, BD, Matrigel | re-suspender células |
| Tubo de centrífuga (15 mL) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 430790, Corning | Centrífuga de las células |
| Aguja de sonda nasogástrica de codo (calibre 12 / 55 mm) | RWD Life Science Co., Ltd. | C21014-12 | Componente del dispositivo de perfusión gástrica |
| Gasa | Haishi Hainuo Group Co., Ltd. | LC45 | Filtro de decocción |
| Ginseng | Shanghai Wanshicheng Pharmaceutical Co., Ltd. | 20220704-2 | Medicamentos listos para la decocción |
| Hedyotis diffusa | Shanghai Yanghetang Medicina Tradicional China Tableta Co., Ltd. | 2023071107 | Medicamentos listos para la decocción |
| isoflurano | Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd | VETEASY | Anesthesia ratones |
| Jeringa de microvolumen | Shanghai alta paloma industria y comercio Co., Ltd | 0-50 μ L | Inyecte células precisas en la tibia |
| Solución salina tamponada con fosfato | Beyotime Biotechnology | ST447 | lave las células del osteosarcoma humano |
| Bandas elásticas | Shanghai Hengfei Biotechnology Co., Ltd. | XPJ | Gasa de fijación en la taza medidora |
| Jeringa (1 mL ) | Shanghai Mishawa Medical Industry Co., Ltd. | SBM0040 | Componente del dispositivo de perfusión gástrica |
| Tripsina (0.25%) | Shanghai YueNian Biotechnology Co., Ltd | 25200056, Gibco | tratamiento de tripsina de células |
Referencias
- Gao, S. Discussion on advantages and improvement of traditional Chinese medicine decoction. Chinese Community Physicians (Comprehensive Edition). (21), 12(2005).
- Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People's Republic of China. , (2015).
- An, Y., et al. Interpretation on specifi....
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Reimpresiones y permisos
