Evaluación de la función ventricular derecha en modelos experimentales de hipertensión arterial pulmonar

Summary

La presentación de métodos detallados para la evaluación de la función del ventrículo derecho mejorará la calidad y la fiabilidad de la investigación sobre la hipertensión pulmonar, ofreciendo un marco sólido para futuros estudios y mejorando la reproducibilidad en diferentes laboratorios.

Abstract

La hipertensión pulmonar (HP) es una afección crónica asociada con una supervivencia reducida, lo que la convierte en un área crítica de investigación. Los modelos experimentales de la HP han mejorado significativamente nuestra comprensión de su fisiopatología y han facilitado el diseño de pequeños ensayos observacionales y clínicos. Sin embargo, es crucial establecer metodologías estandarizadas para garantizar la comparabilidad entre diferentes estudios experimentales y grupos de investigación. La estandarización no solo mejora la reproducibilidad, sino que también fomenta la colaboración entre los equipos de investigación.

En este video, describimos los pasos metodológicos necesarios para analizar con precisión los parámetros funcionales de la HP. Estos incluyen la evaluación ecocardiográfica, la punción invasiva del ventrículo derecho (VD) y el cálculo del índice de Fulton. En cuanto a la ecocardiografía, se presenta en detalle la medición del tiempo de aceleración arterial pulmonar y la relación de tiempo de eyección pulmonar, así como el cálculo del gasto del VD. En cuanto a las mediciones invasivas, se describen los procedimientos esenciales, incluidos los protocolos de anestesia, la posición óptima de los animales, la configuración de la ventilación mecánica, la apertura precisa de la pared torácica, la visualización del VD y las técnicas de punción del VD.

Se explica en detalle la metodología para la disección ventricular (índice de Fulton), así como el cálculo de la relación VD/ventrículo izquierdo más tabique, corregida por el peso corporal del animal. Creemos que proporcionar una presentación detallada de estos métodos mejorará la calidad y la fiabilidad de la investigación en HP, ofreciendo un marco sólido para futuros estudios y mejorando la reproducibilidad en diferentes laboratorios.

Introduction

La medición funcional adecuada de la función del ventrículo derecho (VD) en animales pequeños se ha vuelto esencial desde el aumento de los estudios que utilizan modelos animales en ciencias respiratorias y cardiovasculares. Existen varios modelos animales de hipertensión pulmonar (HP), que utilizan monocrotalina¹, hipoxia² o Sugen + hipoxia³. Han servido para desentrañar nuevas vías fisiopatológicas ^1,4 y estudiar nuevos posibles tratamientos farmacológicos⁵ y no farmacológicos⁶ para la HP. ....

Protocol

El protocolo del estudio fue aprobado por el Comité de Ética en el Uso de Animales (CEUA) de la Universidad Federal de Río de Janeiro bajo el número de proceso 043/22. Todos los procedimientos cumplieron con los Principios del Cuidado de los Animales de Laboratorio y la Guía de la Academia Nacional de Ciencias de los Estados Unidos para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. El estudio siguió las directrices ARRIVE¹¹.

1. Preparación animal y protocolo experimental

1. Calcule el número de animales según lo informado anteriormente¹².
   NOTA: Teniendo en cuenta qu....

Results

Para los análisis estadísticos, se comprobó la normalidad y la varianza de cada variable mediante la prueba de Shapiro-Wilk. Los datos se presentan como medias ± desviación estándar. Se utilizó la prueba t no apareada para comparar las concentraciones de partículas en los grupos control (CTRL) e hipertensión arterial pulmonar (HAP) (p<0,05).

Alteraciones ecocardiográficas en el modelo animal de HAP
En la Figura 4 se observa que la .......

Discussion

La HAP es una enfermedad progresiva caracterizada por un remodelado vascular excesivo, que promueve un aumento de la resistencia vascular pulmonar, lo que resulta en un aumento de la poscarga del VD¹⁴. En consecuencia, la RVSP representa una variable funcional que se correlaciona directamente con la gravedad de la HAP¹⁵. Con el tiempo, la respuesta adaptativa del VD es la hipertrofia concéntrica compensatoria (medida por el índice de Fulton.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Reactivos
Alcohol 70%	Montenegro	ALC70-001
Gel conductor Mercor		CG-002
Solución salina (NaCl 0,9%)	BioPharma	SAL-009
Instruments
19 G juego	de venas del cuero cabelludoDescarpack	SVS-19G
Pinzas curvas	Kelly ABC instrumentos cirúrgicos	CKF-003
Pinzas	Kelly ABC instrumentos cirúrgicos	KF-004
Agujas (18, 22 y 26 G)	Descarpack	NDL-MIX
Placa de Petri	GlassLab	PD-150
Cuchilla de afeitar	ABC instrumentos cirúrgicos	RB-005
Bisturí	ABC instrumentos cirúrgicos	SC-006
Tijeras	ABC instrumentos cirúrgicos	SCIS-007
Línea de sutura	ABC instrumentos cirúrgicos	SUT-008
Jeringas (1, 3 y 5 ml)	Descarpack	SYR-135
	Pinza MedTech	TC-010
	ABC instrumentos cirúrgicos	TWZ-011
Drugs
dextroketamina 5%	Cristá lia	DXT-005	87,5 mg/kg intraperitoneal
Isoflurano 1 mL/mL 240 mL	Cristá lia	ISO-240	2.5% solución para inhalación
Clorhidrato de lidocaína 1%	Cristá lia	LID-001	400 µ L subcutáneo localmente
Monocrotalina	Sigma-Aldrich	C2401	60 mg/kg intraperitoneal
Bromuro de pancuronio 2 mg/mL	Cristá lia	PAN-002	2 mg/kg heparina sódica intravenosa
5000 UI/mL	Cristá lia	HEP-5000	diluido 1:4 en 1 ml de
clorhidrato de xilacina 2%	Syntec	XYL-002	12,5 mg/kg intraperitoneal
Equipment
GraphPad Prism 9	GraphPad Software, Inc	GP9
Monitor veterinario multiparamétrico en red LifeWindow 9x	Digicare Animal Health	LW9x
Software LabView	National Instruments, Corp.	LV-2019
MATLAB R2019a (Versión) software	The MathWorks, Inc.	MATLAB-2019
Monitor y transductor de señal	MedTech	MST-015
Báscula de precisión	Sartorius	PS-020
R540 Ratones& Máquina de anestesia para animales de rata	RWD Life Schience Co., LTD	R540-ANA
Scale	Ohaus	SCL-025
Servo-i ventilador mecánico	Getinge AB	SERVO-I	FiO2 = 21%; volumen corriente = 8 ml/kg, frecuencia respiratoria = 70 lpm y PEEP = 3 cmH2O
SonoVer software	SONOTEC Ultraschallsensorik Halle GmbH	SV-2020
Sistema UGEO HM70A	Samsung Eletrô nica da Amazô nia LTDA	HM70A
G*Power 3.1.9.7	Universidad de Dü sseldorf, Alemania	gpower