Un método refinado de administración intratraqueal de bleomicina basado en aerosoles para modelos reproducibles y mínimamente invasivos de fibrosis pulmonar en ratones

Yunyi Zhou; Ru Li; Yanli Zhang

doi:10.3791/69131

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Artículo de método

Un método refinado de administración intratraqueal de bleomicina basado en aerosoles para modelos reproducibles y mínimamente invasivos de fibrosis pulmonar en ratones

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DOI:

10.3791/69131

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16 de enero de 2026

Yunyi Zhou^*¹ , Ru Li^*¹ , Yanli Zhang¹

¹State Key Laboratory of Common Mechanism Research for Major Diseases, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Institute of Basic Medical Sciences, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Aquí presentamos un protocolo para modelar la fibrosis pulmonar en ratones utilizando bleomicina aerosolizada administrada a través de la tráquea. Este método optimizado permite una administración uniforme, cuantitativa y precisa sin incisión quirúrgica, mejorando la reproducibilidad y fiabilidad de la fibrosis inducida por bleomicina.

Resumen

La fibrosis pulmonar se caracteriza por la deposición progresiva de tejido cicatricial fibrótico dentro del parénquima pulmonar, lo que conduce a un intercambio gaseoso gravemente deteriorado. Está presente en un espectro de enfermedades pulmonares intersticiales crónicas, especialmente la fibrosis pulmonar idiopática, una condición asociada a un pronóstico extremadamente deficiente. Dada la falta de terapias efectivas, los modelos murinos robustos son fundamentales para esclarecer los mecanismos patológicos subyacentes y evaluar intervenciones antifibróticas novedosas. La fibrosis pulmonar inducida por bleomicina sigue siendo el modelo experimental más utilizado. Las vías comunes de administración en ratones incluyen inyecciones intravenosas e intraperitoneales, instillación intraqueal abierta invasiva y goteo traqueal no invasivo. Sin embargo, los métodos quirúrgicos invasivos suelen causar lesiones secundarias en el tejido, lo que puede comprometer la reproducibilidad y estabilidad del modelo. Por el contrario, el goteo traqueal no invasivo suele resultar en una distribución desigual de la bleomicina en los lóbulos pulmonares y supone un riesgo de asfixia, reduciendo así la reproducibilidad y aumentando los desafíos técnicos. Para abordar estas limitaciones, se desarrolla un método refinado de administración intratraqueal basado en aerosoles que es operativamente más simple, mínimamente invasivo, altamente reproducible y éticamente superior, al reducir significativamente el malestar animal. Utilizando un laringoscopio de pequeño animal para visualizar directamente la rima glottidis, se inserta una aguja aerosolizante especializada en la tráquea, notablemente más estrecha que el diámetro tráqueal del ratón. La solución de bleomicina se administra bajo presión controlada con precisión, generando un aerosol fino. Esto garantiza una distribución uniforme y eficiente del agente a lo largo del parénquima pulmonar. Además, se puede seleccionar selectivamente el pulmón izquierdo o derecho dirigiendo la aguja hacia el bronquio correspondiente. La relación dosis-respuesta de este modelo optimizado se caracteriza extensamente por el seguimiento sistemático de cambios en la función pulmonar, manifestaciones histopatológicas y contenido de hidroxiprolina pulmonar. Se prevé que este protocolo experimental refinado facilite la estandarización en laboratorio, acelerando en última instancia el desarrollo y la validación preclínica de nuevas terapias antifibróticas.

Introducción

La fibrosis pulmonar (PF) es un grupo de enfermedades letales caracterizadas por daño progresivo al parénquim pulmonar y reparación anormal, de las cuales la fibrosis pulmonar idiopática (FI) representa entre el 30% y el 40%, siendo la edad mediana de diagnóstico de los pacientes de 65 años, y más del 80% de ellos mayores de 60^años.². A medida que el envejecimiento global se intensifica, la incidencia de IPF aumenta año tras año, con una incidencia mundial de 3-9/100.000/año, y según un estudio en Estados Unidos en personas mayores de 65 años, la incidencia en esta población ....