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Artículo de método

Trypsinizing Siembra y células de mamífero

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DOI:

10.3791/755

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12 de junio de 2008

En este artículo

Resumen

Como las células confluyan, deben ser subcultivaron o pasajes. Este vídeo demuestra un procedimiento de subcultivo tanto adherente y células en suspensión.

Resumen

Como las células confluyan, deben ser subcultivaron o pasajes. La falta de resultados de subcultura células confluentes en el índice mitótico reducción y, finalmente, la muerte celular. El primer paso en el subcultivo es para separar las células de la superficie del recipiente de cultivo primario por tripsinización o por medios mecánicos. La suspensión celular resultante se subdivide, o replantados, en cultivos frescos. Cultivos secundarios son revisados ​​para el crecimiento y alimentar periódicamente, y puede ser posteriormente subcultivo para producir cultivos de tercer nivel. El tiempo entre los pases de las células varía de acuerdo con la línea celular y depende de la tasa de crecimiento.

Protocolo

El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en protocolos actuales en Biología Celular .

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Tripsinizacióncélulas adherentescélulas en suspensiónpasaje celularlavado con HBSStripsina EDTArecuento con hemocitómetrodetección de la confluenciacondiciones de la incubadora