Artículo de método

Trypsinizing Siembra y células de mamífero

DOI:

10.3791/755

12 de junio de 2008

En este artículo

Resumen

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Como las células confluyan, deben ser subcultivaron o pasajes. Este vídeo demuestra un procedimiento de subcultivo tanto adherente y células en suspensión.

Resumen

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Como las células confluyan, deben ser subcultivaron o pasajes. La falta de resultados de subcultura células confluentes en el índice mitótico reducción y, finalmente, la muerte celular. El primer paso en el subcultivo es para separar las células de la superficie del recipiente de cultivo primario por tripsinización o por medios mecánicos. La suspensión celular resultante se subdivide, o replantados, en cultivos frescos. Cultivos secundarios son revisados ​​para el crecimiento y alimentar periódicamente, y puede ser posteriormente subcultivo para producir cultivos de tercer nivel. El tiempo entre los pases de las células varía de acuerdo con la línea celular y depende de la tasa de crecimiento.

Protocolo

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El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en protocolos actuales en Biología Celular .

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Divulgaciones

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Los autores no tienen nada que revelar.

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Tripsinizaci nc lulas adherentesc lulas en suspensi npasaje celularlavado con HBSStripsina EDTArecuento con hemocit metrodetecci n de la confluenciacondiciones de la incubadora

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