Transferencia nuclear en ovocitos de ratón

Así que hacemos la transferencia nuclear NU porque nuestro grupo está interesado en la reprogramación. Este es un proceso fascinante en el que el núcleo diferenciado puede ser reprogramado en un estado embrionario. Estos son los reactivos SUM y HCCV y este es la hialuronidasa.

Y primero preparo un plato con, y este irá a las incubadoras para equipararlo con un CO2. Se trata de gotas, son varias gotas para Turing que se cubren con aceite mineral. Por lo tanto, calibran la atmósfera de CO2.

Ahora haz la caída de HCZB. Esto se usará para lavar. Esto es alto en los días y nuevamente cubierto de este aceite mineral.

Este subidón, esto cae con hialuronidasa. Esta parte aquí son solo gotas de HCCP. Estos son para lavar.

Esto es para eliminar las células ulu del lado O. Esta etapa se calienta para que se caliente hasta que regrese y obtenga los signos de aceite de los ratones y cubra todo con aceite mineral. Esto de aquí son gotas PVP para la limpieza de la aguja y para poner las células, y esto es HCCB más Cyla B. Y aquí haré las manipulaciones.

Bien, este es un color de aguja. Lo que estoy haciendo ahora es tirar de una aguja. Muy bien, ahora tengo una aguja muy bonita, muy fina.

Y ahora esto es una micro fragua. Tengo que cortar la aguja en una posición determinada para tener la pipeta de sujeción del tamaño adecuado. Caliento la bola de vidrio, bajo con la aguja derretida y ahora está rota.

Aparto esto. Ves que la aguja rota es perfecta. Ahora voy aquí, subo la temperatura.

Ahora la bola de vidrio se volverá roja, se derretirá, empujará la bola de vidrio y hará una curva. Suficiente. Lo elimino.

Ya ves, entonces inserto la aguja. Acabamos de hacer que la pipeta de sujeción se introduzca en este cabezal. Ahora insértelo de nuevo en el microscopio.

Micro pipeta, capilar y cargada con mercurio. Lo cargué en este consejo. El mercurio carga este capilar aquí con mercurio.

Va hacia adentro. Coloca la aguja aquí en esta cabeza. Atornille fuertemente, tire de él hacia atrás.

Girar en el sentido de las agujas del reloj aquí empujará el mercurio hacia el frente para que puedas verlo. Y ahora la punta en el aceite. ¿Ver? Así que ahora me estoy moviendo hacia abajo en la aguja para obtener la visión.

Expulse algunas gotas de mercurio y aspire algo de QVP. Está bien. Y luego muévelo hacia arriba de nuevo.

Voy al HCCB y me muevo por el hoyo. Mi cabeza, voy a P, que es la pipeta del ratón. Necesito preparar un capilar para insertarlo aquí. Gracias.Ya.Bien.

Así que haz un poco de capilar. Bien. Y en la pipa. Yo soy ley.

Vengo de Suiza y comencé este trabajo hace un año y llegué al laboratorio de K y comencé a aprender transferencia nuclear. Es realmente, es un gran lugar aquí y es genial trabajar aquí. Y, por supuesto, este es un experimento muy complejo y pueden surgir muchos problemas al hacerlo.

Por lo tanto, cuando comienza, puede encontrar problemas como muchas células que se lisan mientras nuclea o mientras realiza la transferencia. O luego descubres que, aunque se transfieren con éxito, no se desarrollan. Y siempre hay, puede haber numerosas razones.

Es decir, se puede empezar desde el sistema de cultivo de todos los sitios. Por lo tanto, siempre se necesitan algunos controles, como las partes del control genético o algunos emperadores fertilizados para probar el sistema de cultivo, las incubadoras. Y luego también necesitas mejorar las habilidades del microscopio.

Por lo tanto, solo se necesita mucha práctica hasta que pueda ingresar de manera confiable al lado y luego transferirlo de regreso. Esto es solo una cuestión de práctica y nos tomaremos unas semanas o meses hasta que seas bueno en eso. Y por lo demás, está listo para largos experimentos.

Así que es bueno reservar un día entero para ello. Y luego, algo complicado al principio también es el pipeteo del mouse. Así que para no hacer burbujas, para controlarlo bien y no perder la supervisión o especialmente también se puede dañar un clon, particularmente porque la capa externa, la parte de lucita está abierta, es posible que cuando se mueva, se dañe ese clon y se escape de esa lucita de sonar.

Por lo tanto, también hay que tener cuidado de no tener aceite en esa tubería. No chupar demasiado y no soplar demasiado, pero esto se adquiere con relativa facilidad, esta habilidad.