Name: Trasplante ortotópico aórtica: un modelo de rata para estudiar el desarrollo de la enfermedad vascular crónica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-12-04T17:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 32 s
Description: Aprende el trasplante ortotópico aórtico en ratas para estudiar la vasculopatía de trasplante usando la combinación PVG a CI. Este modelo permite investigar la formación de neointima y mejorar los resultados del trasplante.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Los autores agradecen a Christiane Pahrmann por su trabajo histológico. Financiamiento Sonja Schrepfer ha recibido una beca de investigación de la Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) (SCHR992 / 3 1 y SCHR992/4-1).]

Las ratas con un peso aproximado de 250 300 g son adquiridos de Charles River (Sandhofer Weg 7, D-97633 Sulzfeld). Los trasplantes se realizaron con ratas PVG como donantes, y las ratas ACI como receptores. Las ratas son alojados en condiciones convencionales, alimentados estándar de comida de rata y libidum agua ad. Todos los instrumentos quirúrgicos son esterilizados antes de su uso. Preparación de los donantes: Anestesiar la rata con isoflurano (2,5-3%), utilizando una cámara de inducción. <ol><li> Afeitar el vello abdominal y torácica y el lugar de la rata en la espalda y colocar una máscara sobre su nariz y la boca para mantener la anestesia. </li><li> Desinfectar el área abdominal y torácica ampliamente mediante Provo-yodo, el próximo uso etanol al 80%, repetir este paso tres veces. </li><li> Revisar los reflejos pellizcar las patas traseras para asegurarse de que la rata es suficiente anestesiado. </li><li> Exsanguinate la rata abriendo el abdomen y haciendo un agujero en la aorta abdominal. </li><li> Abra cuidadosamente el tórax para encontrar la aorta torácica descendente. </li><li> Disecar la aorta torácica de los tejidos circundantes como nervios de grasa, y el esófago. </li><li> Retirar una pieza de 1,5 cm de la aorta con un couter, sin dañar el tejido de la aorta. </li><li> Perfusión del injerto aórtico a fondo con solución salina estéril fría y guardar el injerto a 4 ° C. </li></ol> Destinatario: Anestesiar la rata con isoflurano (2,5-3%), utilizando una cámara de inducción. La temperatura corporal se mantiene durante el procedimiento quirúrgico. <ol><li> Afeitarse la zona abdominal y aplicar ungüento oftálmico para evitar que los ojos se sequen durante la anestesia. </li><li> Coloque el ratón sobre la espalda y colocar una máscara sobre su nariz y la boca para mantener la anestesia. </li><li> Desinfectar el área abdominal con Provo-yodo, el próximo uso etanol al 80%, repetir este paso tres veces. </li><li> Revisar los reflejos pellizcar las patas traseras para asegurarse de que la rata es suficiente anestesiado. </li><li> Realizar una incisión abdominal que separa la piel y el músculo en dos pasos para abrir el abdomen. </li><li> Lugar de los intestinos en una solución salina caliente guante sin polvo hidratada. Veces el guante de todo el intestino para evitar la pérdida de humedad. </li><li> Eliminar el tejido graso que cubre la aorta abdominal. </li><li> Disecar la aorta infrarrenal forman la región de la bifurcación, cuidado de no causar daños en las ramas de los vasos. </li><li> Si es necesario ligar las ramas de la aorta. </li><li> En primer lugar utilizar una pinza de microcirugía en la parte infrarrenal de la aorta disecada para detener el flujo de sangre. </li><li> Después, coloque una segunda abrazadera cerca de la bifurcación de la aorta. </li><li> Ahora que el flujo de sangre se detiene, cortar un segmento corto de la aorta. </li><li> Tomar el injerto aórtico de los donantes, que se ha mantenido en el 0,9% de solución salina estéril en el hielo, acortar a la longitud adecuada y la posición en la brecha. </li><li> Conectar la aorta de los donantes a la aorta receptor, realizar sutura continua con prolene 8-0 sutura (Ethicon, Norderstedt, Alemania). Comience con el cráneo de extremo a extremo anastomosis. </li><li> Cuando la porción distal de extremo a extremo anastomosis está terminado, abra la pinza distal. </li><li> Cuando no hay sangrado después de la apertura de la pinza distal, abra la pinza del cráneo. En caso de sangrado en los puntos de sutura, cierre la pinza de nuevo, busque la hemorragia y detener la hemorragia con una sola puntada. </li><li> Debe haber un impulso visible en el extremo distal de la aorta. </li><li> Luego mueva el intestino en el abdomen. </li><li> Enjuague bien el abdomen con solución salina estéril precalentada. </li><li> Cerca de la capa muscular de la pared abdominal usando suturas de prolene 6-0 en ejecución (Ethicon, Norderstedt, Alemania). </li><li> Use 5-0 prolene (Ethicon, Norderstedt, Alemania) que se ejecuta suturas para cerrar la piel. </li><li> Mientras que la rata aún está en la anestesia, se inyecta por vía subcutánea 4-5mg/kg Carprofen. </li><li> Para proporcionar una analgesia suficiente para este tipo de procedimiento, el metamizol se añade al agua potable (50 mg Metamizol por cada 100 ml) para medicamentos para el dolor durante 3 días después del trasplante. </li></ol>

<ol><li>Deuse, T., Hoyt, G., Koyanagi, T., Robbins, R. C., Schrepfer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+and+Inhibition+But+Not+Reversion+of+Chronic+Allograft+Vasculopathy+by+FK778%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Prevention and Inhibition But Not Reversion of Chronic Allograft Vasculopathy by FK778.</a> Transplantation. 85, 870-877 (2008).</li>
<li>Mennander, A., Tiisala, S., Halttunen, J., Yilmaz, S., Paavonen, T., Hayry, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+rejection+in+rat+allografts.+An+experimental+model+for+transplant+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Chronic rejection in rat allografts. An experimental model for transplant arteriosclerosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 11, 671-680 (1991).</li>
<li>Ono, K., Lindsey, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+technique+of+heart+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thorac+Cardiovasc+Surg%22%5BJournal%5D)">Improved technique of heart transplantation in rats.</a> J Thorac Cardiovasc Surg. 57, 225-225 (1969).</li>
<li>Poston, R. S., Billingham, M., Hoyt, E. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin+reverses+chronic+graft+vascular+disease+in+a+novel+cardiac+allograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Rapamycin reverses chronic graft vascular disease in a novel cardiac allograft model.</a> Circulation. 100, 67-100 (1999).</li>
<li>Schrepfer, S., Deuse, T., Koch-Nolte, F., Krieger, T., Haddad, M., Schäfer, H., Pelletier, M. P., Robbins, R. C., Reichenspurner, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FK778+in+Experimental+Xenotransplantation%3A+A+Detailed+Analysis+of+Drug+Efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">FK778 in Experimental Xenotransplantation: A Detailed Analysis of Drug Efficacy.</a> J Heart Lung Transplant. 26, 70-77 (2007).</li>
</ol>

Por varias razones hemos encontrado el modelo de la aorta trasplante ortotópico de una manera más precisa para investigar el desarrollo de TVP en comparación con el modelo de trasplante de corazón heterotópico: En cuanto a la técnica quirúrgica, el modelo de trasplante de aorta representa un método fácil de lo posible, que requiere únicamente la realización de extremo a extremo anastomosis, mientras que el modelo de trasplante de corazón heterotópico puede ser considerado como un desafío más complejo y propenso a...

<table><tbody><tr><td>Microscopio quirúrgico (ampliación 25x)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Afeitadora</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Yodo de Provodine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solución salina fría con hielo al 0,9%</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solución salina estéril al 0,9% precalentada</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pomada oftálmica</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Guante</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tijeras microquirúrgicas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinzas</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Clamps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura 8-0 (policloruro de vinilo)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura 6-0 (policloruro de vinilo)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutura 5-0 (policloruro de vinilo)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofeno</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metamizol</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hisopos</td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

trasplante ortotópico aórtica: un modelo de rata para estudiar el desarrollo de la enfermedad vascular crónica

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Modelos de investigación de rechazo crónico son esenciales para investigar los procesos fisiopatológicos patobiológicas y durante el desarrollo de vasculopatía del trasplante (TVP). El modelo animal utilizado para estudios cardiovasculares rechazo crónico es el modelo de trasplante de corazón heterotópico realizado en roedores de laboratorio. Este modelo se utiliza ampliamente en los experimentos ya que Ono y Lindsey (3) publica su técnica. Para analizar los resultados en los vasos sanguíneos, el corazón tiene que ser seccionado y todos los buques tienen que ser medidos. Otro método para investigar el rechazo crónico en cuestionamientos cardiovascular es el modelo de trasplante de aorta (1, 2). En el modelo de trasplante ortotópico de la aorta, la aorta puede ser fácilmente evaluados histológicamente (2). El modelo de PVG a ACI es especialmente útil para los estudios de CAV, ya que el rechazo vascular agudo no es un factor de confusión importante y tratamiento de ciclosporina A (CsA) no impide el desarrollo de la CAV, similar a lo que encontramos en la práctica clínica (4 ). A7 días del período de CsA se requiere en este modelo para prevenir el rechazo agudo y de lograr supervivencia a largo plazo con el desarrollo de TVP. Este modelo también se puede utilizar para investigar el rechazo agudo celular y necrosis en los medios de comunicación modelos xenogénicos (5).

Este video muestra el modelo de trasplante ortotópico de la aorta como un modelo simple para estudiar el desarrollo de vasculopatía del trasplante (TVP) en ratas.

Trasplante ortotópico aórtica: un modelo de rata para estudiar el desarrollo de la enfermedad vascular crónica

Los modelos de investigación del rechazo crónico son esenciales para investigar los procesos patobiológicos y fisiopatológicos durante el desarrollo del trasplante ...

El objetivo general de este procedimiento es establecer un modelo preciso y un método fácilmente factible para investigar el desarrollo de la vasculopatía del trasplante. Esto se logra utilizando la combinación de cepas PVG a CI. El segundo paso del procedimiento consiste en extraer la aorta del donante.El tercer paso del procedimiento consiste en preparar al receptor. El paso final del procedimiento es anastomosar la aorta del donante con la aorta del receptor. En última instancia, se pueden obtener resultados que muestren la formación de neointima mediante histopatología.Hola, soy Sonya Schwefel, profesora de inmunología de trasplantes en el Laboratorio de Ojo TS del Centro Cardíaco Universitario de Hamburgo, Alemania. Y yo soy Manish Duboff, también del Laboratorio de Ojo TS.Nuestro laboratorio se interesa en la inmunología de trasplantes. En este video les presentaremos el modelo de trasplante aórtico ortotópico, un modelo sencillo y válido para estudiar el desarrollo de la vasculopatía de trasplante en ratones. Utilizamos este procedimiento en nuestro laboratorio para investigar el rechazo crónico en afecciones cardiovasculares.En el modelo de trasplante aórtico ortotópico, la aorta puede evaluarse fácilmente mediante histología. Además, el modelo de PVG a CI es especialmente útil para estudios de vasculopatía de trasplante, ya que el rechazo vascular agudo no es un factor de confusión importante y el desarrollo de la vasculopatía es similar a los hallazgos clínicos.Así que comencemos. La rata donante utilizada en este trasplante aórtico ortotópico es una rata PVG que pesa aproximadamente entre 250 y 300 gramos. Después de anestesiar al animal, afeite el vello abdominal y torácico.Coloque la rata en decúbito dorsal y coloque una máscara facial sobre su nariz y boca. Para mantener la anestesia, desinfecte ampliamente la zona abdominal y torácica utilizando yodo de Provodine, seguido de etanol al 80 %. A continuación, verifique los reflejos del animal pellizcando sus patas traseras.Para confirmar que está suficientemente anestetizado. Exsanguine la rata abriendo el abdomen y realizando un orificio en la aorta abdominal. Abra cuidadosamente el tórax para localizar la aorta torácica descendente.Disecar la aorta torácica de los tejidos circundantes, como la grasa, los nervios y el esófago. Extraer un fragmento de 1,5 centímetros de la aorta utilizando acuta sin dañar el tejido de la aorta. Perfundir el injerto aórtico abundantemente con solución salina fría y almacenar el injerto a cuatro grados Celsius.El receptor para este trasplante aórtico ortotópico es una rata A CI que pesa aproximadamente entre 250 y 300 gramos. Para comenzar este procedimiento, afeite el área abdominal de la rata anestesiada y aplique una pomada ocular para prevenir el secado de los ojos durante la anestesia. Coloque la rata boca arriba y coloque una máscara facial sobre su nariz y boca para mantener la anestesia.A continuación, desinfecte el área abdominal utilizando yodo de provo, seguido de etanol al 80 %. Después de pellizcar las patas traseras para confirmar que la rata está suficientemente anestesiada, abra el abdomen realizando una incisión abdominal en línea media y separando la piel y el músculo. Dos pasos.Una vez que el abdomen esté abierto, coloque los intestinos en el guante humedecido con solución salina. Doble el guante alrededor de los intestinos para evitar la pérdida de humedad. Retire el tejido adiposo que recubre la aorta abdominal.Disecar la aorta desde la región infrarrenal hasta la bifurcación, teniendo cuidado de no dañar las ramas de los vasos. Si es necesario, ligar las ramas de la aorta después de disecarla. Primero, utilizar una pinza microquirúrgica en la parte infrarrenal de la aorta para detener el flujo sanguíneo.A continuación, coloque una segunda pinza cerca de la bifurcación de la aorta. Ahora que se ha detenido el flujo sanguíneo, retire un segmento corto de la aorta. Luego tome el injerto aórtico donante que se ha mantenido en solución salina al 0,9 % sobre hielo.Acórtelo a la longitud adecuada y colóquelo en el espacio de la aorta. Conecte la aorta del donante a la aorta del receptor realizando suturas continuas de prolina ocho ceros, comenzando por la anastomosis extremo a extremo craneal. Una vez finalizada la anastomosis extremo a extremo distal, abra cuidadosamente la pinza distal.A continuación, abra cuidadosamente la pinza craneal. Debe observarse un pulso visible en el extremo distal de la aorta. Ahora regrese los intestinos al abdomen y lave la cavidad abdominal con solución salina estéril precalentada.Cierre la capa muscular de la pared abdominal utilizando suturas continuas de prolina seis cero. Luego, utilice suturas continuas de prolina cinco cero para cerrar la piel mientras la rata aún está bajo anestesia. Inyecte cuatro a cinco miligramos por kilogramo de carprofeno por vía subcutánea.Devuelva el animal a su jaula. Añada metimazol al agua de bebida como medicamento para el dolor durante tres días posteriores al trasplante.Los resultados de histopatología después de 120 días se mostrarán en nuestro microscopio de histología. Las imágenes mostrarán claramente el desarrollo de la vasculopatía del injerto. El estrechamiento luminal desarrollado se resaltará mediante animación por computadora.Acabamos de mostrarle cómo realizar un trasplante aórtico heterotópico en ratas. También hemos demostrado el desarrollo exitoso de vasculopatía del injerto después de 120 días mediante histopatología. Este método permite investigar los efectos iniciales de fármacos sobre la vasculopatía crónica del aloinjerto.

orthotopic-aortic-transplantation-rat-model-to-study-development

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Se describe una técnica en la que se trasplanta una sección de la aorta abdominal de un ratón ortotópicamente a justo por debajo de las arterias renales en un receptor alogénico o singénico. Esta técnica puede ser útil en estudios en que se considera el trasplante de las grandes arterias de tamaño uniforme ventajosa.

El trasplante ortotópico aórtica en los ratones para el Estudio de la Enfermedad Vascular

Describimos un protocolo para el injerto de interposición aórtica en ratones. El objetivo del protocolo es proporcionar un modelo con el que estudiar los procesos patológicos y las estrategias terapéuticas relevantes para las reacciones aloinmunes en las arterias y los cambios arteriales resultantes que contribuyen al fracaso del trasplante de órganos.

Modelo de ratón de rechazo vascular inducida por aloinmune y Arteriosclerosis Trasplante

Inserción de catéter de poliuretano en la luz aórtica y ligadura de la sutura de la aorta inducir hipoxia crónica debido a la hipoperfusión de los adventitial de la vasa vasorum. Este artículo describe un nuevo modelo animal de aneurisma aórtico abdominal (AAA) de características similares a los de la AAA en los seres humanos.

Creación de un modelo de roedor del Aneurysm aórtico Abdominal bloqueando Adventitial de la Vasa Vasorum de la perfusión

Aquí, presentamos un protocolo de trasplante aórtico heterotópico en ratones utilizando la técnica del manguito no sutura en un modelo de murina cervical. Este modelo se puede utilizar para estudiar la patología subyacente de la vasculopatía por aloinjerto crónico (CAV) y puede ayudar a evaluar nuevos agentes terapéuticos para prevenir su formación.

Modelo de trasplante de aórtica cervical murino utilizando una técnica de manguito no sutura modificada

Describimos un modelo de trasplante de corazón abdominal heterotópico en ratas, lo que implica modificaciones de las estrategias actuales, que conducen a un enfoque quirúrgico simplificado. Además, describimos un nuevo modelo de rechazo mediante inyección en la oreja de células musculares cardíacas vitales, permitiendo análisis inmunológicos de trasplante adicionales en ratas.

Un modelo inmunológico para el trasplante heterotópico de células musculares cardíacas y cardíacas en ratas

Este trabajo presenta un protocolo de trasplante de colgajo osteomiocutáneo heterotópico parcial en ratas y sus posibles resultados en el seguimiento a medio plazo.

Modelo de trasplante parcial de extremidades posteriores heterotópicas en ratas

Este protocolo describe un método simple y eficiente para el trasplante de valvas de la válvula aórtica debajo de la cápsula renal para permitir el estudio de la alorreactividad de las válvulas cardíacas.

Un modelo simplificado para el trasplante heterotópico de válvulas cardíacas en roedores

Demostramos cómo establecer un modelo murino de implantación de raíz pulmonar en la aorta descendente para simular el procedimiento de Ross. Este modelo permite la evaluación a medio/largo plazo de la remodelación del autoinjerto pulmonar en posición sistémica, representando la base del desarrollo de estrategias terapéuticas para promover su adaptación.

Un modelo de roedor de la operación ross: implantación singénica de injerto de arteria pulmonar en una posición sistémica

El modelo de trasplante renal ortotópico de rata contribuye a investigar el mecanismo de rechazo del aloinjerto renal. El modelo actual aumenta la supervivencia de los receptores sin interferencia con el suministro de sangre y el reflujo venoso de la parte inferior del cuerpo utilizando una anastomosis de extremo a extremo de la implantación renal y un método de "túnel" de extremo a lado de anastomosis uréter-vejiga.

Un modelo de trasplante renal ortotópico de rata para el rechazo del aloinjerto renal

Este estudio demuestra una técnica de trasplante de corazón abdominal heterotópica reproducible en ratas que los principiantes pueden aprender y realizar. Además, se genera un nuevo modelo de regurgitación aórtica en ratas mediante la realización de un trasplante de corazón abdominal heterotópico y el daño de la válvula aórtica del donante utilizando un alambre guía después de la recolección.

Trasplante de corazón abdominal heterotópico modificado y un nuevo modelo de regurgitación aórtica en ratas

En este trabajo se presenta un modelo animal de fibrosis inducida por transición endotelial-mesenquimatosa, como se observa en defectos cardíacos congénitos como la estenosis aórtica crítica o el síndrome del corazón izquierdo hipoplásico, que permite la evaluación histológica detallada del tejido, la identificación de vías de señalización reguladoras y la prueba de opciones de tratamiento.

Un modelo de trasplante de corazón de rata heterotópico neonatal para el estudio de la transición endotelial a mesenquimal

Aprende el trasplante ortotópico aórtico en ratas para estudiar la vasculopatía de trasplante usando la combinación PVG a CI. Este modelo permite investigar la formación de neointima y mejorar los resultados del trasplante.

Trasplante ortotópico aórtica: un modelo de rata para estudiar el desarrollo de la enfermedad vascular crónica

Explorar más videos