Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:22 min. • April 30th, 2023
- Para empezar, siembre las células de leucemia humana en un medio de cultivo recién preparado e incube durante el período deseado. Después de la incubación, tiña una pequeña cantidad de esta suspensión celular con azul de tripano y evalúa la viabilidad celular con un portaobjetos de contador de células TC20. Las células muertas son permeables y absorben el tinte cargado negativamente, mientras que las células viables son impermeables.
A continuación, agregue metil beta ciclodextrina al matraz de cultivo para agotar suficientemente el colesterol de la célula, haciéndolas susceptibles a los ultrasonidos. Incubar las células durante el período deseado. Llene el sistema de sonicación celular con agua desionizada y desgasifique durante unos minutos para evitar burbujas de vacío. Transfiera la cantidad deseada de células en el vial de centelleo y conecte el vial al dispositivo de retención del sistema de sonicación celular.
Coloque el dispositivo de sujeción en la parte superior de la bocina y establezca la elevación deseada desde la parte superior de la bocina. Establezca los pulsos necesarios durante la duración deseada para sonicar las celdas. Agregue azul de tripano a la suspensión
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