Leucemia

Este video describe la técnica de tinción de células de médula ósea utilizando la tinción de May-Grünwald Giemsa. En el protocolo, teñiremos las células de leucemia mieloide murina, células C149, para analizar la morfología y el recuento diferencial.

Este video describe el enriquecimiento de células T del bazo de un ratón mediante selección negativa utilizando un separador magnético. La técnica consiste en dirigirse a las otras células de la muestra para su agotamiento mediante el uso de anticuerpos o ligandos dirigidos contra antígenos específicos de la superficie celular.

Este video describe la técnica de aislar células c-kit positivas de la médula ósea de un ratón. En el protocolo, aislaremos células c-kit positivas de un ratón transgénico para validar c-Fos y Dusp1 solos o juntos como dianas farmacológicas en la leucemia.

Este vídeo describe el protocolo para la tinción de inmunofluorescencia BrdU. La técnica permite la identificación de células en diferentes fases del ciclo celular. La adición de colorantes de ADN y el marcaje de anticuerpos permite el análisis detallado del destino de las células de la fase S en momentos posteriores.

Este video describe la técnica para aislar las células de leucemia linfocítica crónica (LLC) de la sangre periférica. Con este protocolo, aislaremos células de LLC de muestras de sangre de pacientes humanos para la posterior generación eficiente de fracciones nucleares y citoplasmáticas.

El video explica una forma de purificar las células B mediante la orientación inmunomagnética y la separación de la suspensión de células mononucleares de sangre periférica. El método consiste en etiquetar tipos de células no deseadas con anticuerpos o ligandos específicos (unidos a partículas magnéticas) dirigidos a proteínas específicas de la superficie celular, para ser agotadas de la suspensión celular heterogénea por separación magnética.

Este video describe un método para la separación espacial de tres subpoblaciones de células leucémicas: las células leucémicas suspendidas que flotan libremente en el medio, las células leucémicas brillantes en fase adheridas a la superficie de la monocapa de células estromales mesenquimales, y las células leucémicas en fase diminutas que han migrado debajo de la monocapa de células estromales mesenquimales desde el cocultivo 2D.

Este video describe un protocolo detallado para aislar médula ósea entera fresca de las extremidades traseras del ratón para investigar defectos completos de la MO en pacientes con trastornos sanguíneos como la leucemia.

Este video describe la separación de las células de leucemia linfoblástica aguda de las células estromales de la médula ósea utilizando diez columnas de dextrano G-10 reticulado tipo gel. Este método ayuda a recuperar la población de células tumorales que han migrado por debajo de las células estromales adherentes de la médula ósea, generando una población de células tumorales de "fase diminuta".

El video describe un método de muestreo para la recolección de sangre periférica del seno retroorbitario de un ratón y el posterior aislamiento de células mononucleares de la sangre con centrifugación en gradiente de densidad.

Este video describe la técnica de aspiración de médula ósea de la columna ilíaca y la preparación del frotis para la biopsia. En el ejemplo, realizamos una aspiración de médula ósea de un paciente con leucemia mieloide aguda (LMA) y examinamos las células para comprobar si hay enfermedad residual (ERM) medible, un importante biomarcador pronóstico.

Este video describe un protocolo para la generación de células dendríticas--células presentadoras de antígenos clave que activan las células T-- a partir de la médula ósea de un ratón adulto.

Este video describe el protocolo para aislar HSPCs de la médula ósea y clasificarlas utilizando una técnica de clasificación de células activadas fluorescentes, que es un método para obtener HSPCs clasificadas individualmente. Cultivamos estas células clasificadas para obtener clones de HSPC.

Este protocolo describe la técnica de aislar células tumorales de leucemia linfoblástica aguda (LLA-T) marcadas con fluorescencia de un pez cebra adulto y cuantificarlas utilizando un colorante azul de tripano.

El siguiente protocolo describe un método para aislar la población lateral de células tumorales de leucemia linfoblástica aguda (LLA-T), que consiste en células madre, de un pez cebra adulto. La población lateral carece de marcadores celulares prominentes y, por lo tanto, utilizamos el ensayo de eflujo de colorante Hoechst 33342 para aislarlos.

Este video describe el protocolo para el cizallamiento de la cromatina utilizando la digestión enzimática de nucleasa microcócica. El cizallamiento de la cromatina es un paso esencial en el flujo de trabajo de inmunoprecipitación de cromatina o ChIp, que ayuda a investigar la interacción proteína-ADN en células humanas de leucemia mieloide crónica. En el protocolo de características, el cizallamiento de la cromatina se realiza mediante sonicación.

Este video describe el daño selectivo de las células de leucemia humana mediante el uso de ultrasonido de baja frecuencia. Esta aplicación de ultrasonidos de baja frecuencia en una condición preclínica in vitro demuestra que la destrucción celular puede lograrse para examinar y comparar los efectos de la sonicación en la leucemia y las células normales.

Este artículo describe el protocolo para el ensayo XTT, que es un ensayo colorimétrico para evaluar la viabilidad celular y la actividad mitocondrial.

El video describe el ensayo de marcaje de pulso escalonado de células de mamíferos con bromodeoxiuridina (BrdU) para medir la proliferación celular. La absorción de BrdU permite el seguimiento temporal de las células que estaban en la fase de síntesis en un momento específico, sin necesidad de que las células estén sincronizadas.

Este video describe la técnica para el cocultivo 2D a largo plazo de células de leucemia con células estromales de médula ósea para estudiar su interacción con el microambiente de la médula ósea. El modelo de cocultivo 2D utiliza las células de leucemia linfoblástica aguda y el estroma de la médula ósea u osteoblastos que influyen en el fenotipo de las células tumorales. Este estudio apoyará la investigación de los mecanismos que subyacen a la supervivencia de las células leucémicas apoyadas en...

Este video describe la preparación de fracciones subcelulares a partir de células leucémicas, que es un método para generar fracciones celulares y nucleares a partir de células leucémicas. Las fracciones nuclear y citoplasmática se pueden utilizar para análisis posteriores.

Este protocolo proporciona un enfoque bioquímico para medir la tasa de acidificación extracelular (ECAR) y la tasa de consumo de oxígeno (OCR) de células leucémicas primarias con ensayo de flujo extracelular. La evaluación del perfil metabólico de estas células ayuda a caracterizar sus demandas, lo que conduce a una terapia personalizada.

Este video describe el protocolo para el ensayo de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), que es una técnica clásica para demostrar las interacciones proteína-ADN. Esta técnica se utiliza para identificar genes diana en células de leucemia linfocítica crónica humana.

Este video describe el protocolo para la validación genética mediante la transferencia de genes objetivo utilizando retrovirus en líneas celulares de leucemia mieloide crónica. Los retrovirus actúan como mediadores para transferir material genético a la célula leucémica a través del proceso llamado transducción, que permite la expresión a largo plazo del gen diana. Este método se puede aplicar a cualquier célula diana para su validación genética y desarrollo terapéutico.

Este video describe el protocolo para el ensayo de unidad de formación de colonias basado en metilcelulosa o UFC, que ayuda a identificar y contar el número de colonias formadas por células leucémicas en respuesta al tratamiento con compuestos anticancerígenos.

Este video explica un método cuantitativo de cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa (RP-HPLC) para medir el metabolismo de la adenosina y las purinas asociadas generadas por el consumo de AMP en el entorno extracelular de las células de cáncer leucémico. El protocolo describe un ensayo RP-HPLC sensible, específico, fiable y reproducible desarrollado y validado para la cuantificación de nucleótidos y nucleósidos de purina extracelular producidos por células de leucemia...