Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 3:59 min. • April 30th, 2023
- Comience con una suspensión de células leucémicas que contenga la densidad celular deseada. Centrifugar y resuspender las células en un medio de cultivo que contenga suero. La adición de suero promueve el crecimiento celular continuo y las células se mueven a través de las diferentes fases del ciclo celular. Diluir las células en una solución de marcaje de bromodeoxiuridina, o BrdU, y cultivarlas en condiciones fisiológicas durante el tiempo requerido.
Las células en la fase de síntesis o S absorben BrdU, un análogo de la timidina, que reemplaza a la timidina durante el proceso de replicación del ADN. Centrifugar las células para eliminar el exceso de BrdU y resuspender las células en un medio adecuado. Transfiera las celdas a una placa de pocillos múltiples. Permitir que las células crezcan en condiciones fisiológicas durante diferentes períodos de tiempo.
En varios períodos de tiempo, las células progresan a través del resto de las fases S, G2, mitosis y G1 y entran en el siguiente ciclo celular, lo que permite la estimación de la proliferación celular. Realice la tinción de anticuerpos para marcar BrdU con anticuerpo de fluorocromo y mida la proliferación celular mediante cito
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos