Cocultivo 2D de células leucémicas con BMSC: un método para obtener subpoblaciones de células leucémicas

- En un sistema de cocultivo 2D, varios tipos de células crecen juntas en placas de cultivo planas. Este sistema de cultivo facilita el estudio de las interacciones y el comportamiento celular in vitro. Para establecer el cocultivo de células leucémicas con células estromales de médula ósea (BMSC, por sus siglas en inglés), agregue suspensión de células leucémicas a un cultivo monocapa adherente de BMSCs. Incube la placa en condiciones de cultivo adecuadas. Mantener el cocultivo reemplazando el 90% del medio de cultivo cada cuatro días.

Durante este cocultivo en 2D, las células leucémicas interactúan con las BMSC y se localizan en distintas regiones del cultivo, formando tres subpoblaciones. La microscopía de contraste de fase permite diferenciar visualmente las tres subpoblaciones. El primer grupo de células leucémicas que aparece flotando libremente en el medio se clasifica como células en suspensión. El segundo grupo de células leucémicas que se han adherido a la superficie de la monocapa de BMSC parece brillante y se clasifica como células de fase brillante.

El tercer grupo de células leucémicas que han migrado por debajo de la monocapa parece tenue y se clasifica como células