Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 4:39 min. • April 30th, 2023
- El ensayo de flujo extracelular ayuda a estudiar el metabolismo celular midiendo las dos principales vías de energía: la glucólisis y la respiración mitocondrial. Durante la glucólisis, las células metabolizan la glucosa y secretan lactato en el espacio extracelular junto con protones, determinado mediante la medición de la tasa de acidificación extracelular o ECAR. Durante la respiración mitocondrial, las células utilizan el oxígeno para la producción de ATP, medido mediante la determinación de la tasa de consumo de oxígeno u OCR.
Las células cancerosas exhiben una alta absorción de glucosa a medida que alteran su tasa metabólica para adaptarse y mantener la proliferación celular no regulada. Para analizar el metabolismo en las células cancerosas, primero ensamble una microplaca de análisis de flujo que contenga una monocapa de células cancerosas adherentes y un cartucho sensor hidratado. Transfiera el conjunto de placas a un analizador de flujo. Dentro del analizador, las sondas del sensor descienden para crear una microcámara transitoria. Para medir el flujo extracelular, el puerto de inyección introduce compuestos de prueba en la microplaca en puntos de tiempo preestablecidos
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