Enriquecimiento de células T: una técnica para aislar células T de una población de células mixtas mediante separación magnética

- Las células T, una clase de linfocitos, desempeñan un papel activo en la lucha contra las infecciones. Junto con muchos otros tipos de células sanguíneas, las células T inmunocompetentes están presentes en el bazo y los ganglios linfáticos de los ratones. Para aislar selectivamente las células T, se extraen el bazo y los ganglios linfáticos murinos y se maceran en un colador de células. Enjuague el tejido con un medio apropiado para obtener una suspensión unicelular.

Agregue cloruro de amonio y potasio, o tampón ACK, para lisar los glóbulos rojos. Centrífuga para separar las células sanguíneas intactas del lisado. Deseche el sobrenadante y vuelva a suspender las células en un tampón adecuado. Trate la suspensión con una mezcla de anticuerpos antiratón biotinilados para dirigirse a las células sanguíneas como granulocitos, células B, células NK y cualquier eritrocito restante. Las células T no son objetivo y, por lo tanto, permanecen sin etiquetar.

A continuación, agregue microesferas magnéticas anti-biotina a la suspensión. Todas las células marcadas con biotina se unen a las microperlas. Cuando se mantienen bajo la influencia de un fuerte campo magnético, las células marcadas ma