Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Investigación sobre el cáncer
0 visualizaciones • 4:59 min. • April 30th, 2023
- Los retrovirus son virus de ARN que se replican mediante el uso de transcriptasa inversa para convertir su genoma de ARN en ADN bicatenario e integrarse permanentemente en el genoma del huésped. Las nuevas partículas virales salen de la célula y pueden infectar otras células. La terapia génica contra el cáncer emplea vectores retrovirales para introducir genes terapéuticos en las células diana a través de una técnica llamada transducción para regular a la baja el gen mutado o eliminar células.
Para obtener vectores retrovirales de alto título, transfecte las células HEK 293 con una mezcla de transfección que contenga el plásmido retroviral deseado, un plásmido de empaquetamiento y un agente transfector adecuado. Incuba las células. El agente transfecético facilita la entrega de ambos plásmidos en las células.
El plásmido retroviral codifica el genoma viral con el gen diana, mientras que el plásmido de empaquetamiento codifica las proteínas de la envoltura viral. La maquinaria celular de las células de empaquetamiento forma partículas retrovirales y las libera en el medio. Recoja el sobrenadante viral y centrifugue para eliminar las células.
Transfiera la concentración deseada de
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos