Ensayo de UFC basado en metilcelulosa: un método para determinar el efecto de los compuestos anticancerígenos en la formación de colonias en células leucémicas

- A veces, una célula madre o progenitora sufre mutaciones, dando lugar a una célula madre leucémica. En estas células, ciertas proteínas están reguladas al alza, y el uso de compuestos anticancerígenos contra dichas proteínas puede ayudar a controlar el crecimiento de las células. El efecto de estos compuestos anticancerígenos se puede analizar mediante el ensayo de UFC mediante el seguimiento del número y el tamaño de las colonias formadas.

Comience tomando células progenitoras de un ratón leucémico y diluyéndolas en un medio de cultivo adecuado. Agregue esta suspensión celular junto con el compuesto anticancerígeno apropiado a la metilcelulosa que contiene citocinas específicas del ratón y viértala en una placa de Petri. Incuba esta mezcla hasta que aparezcan las colonias. La metilcelulosa es una matriz semisólida químicamente inerte que impide la migración celular, mientras que las citocinas estimulan a las células progenitoras para que se diferencien y formen colonias que contengan una progenie reconocible.

A continuación, tiñe las colonias con cloruro de yodonitrotetrazolio, o INT, e incuba durante la noche hasta que las colonias se vuelvan de color marrón rojizo oscuro. Las