Extracción de riñón intacto de ratón: una técnica para obtener riñón sin cápsula renal a partir de modelos murinos

En los roedores, el riñón tiene una cubierta externa fibrosa protectora llamada cápsula renal y una capa de grasa perinefrica sobre ella. Para extraer el riñón murino sin las capas circundantes, comience colocando un ratón sacrificado en posición supina en una cama quirúrgica.

Hacer una incisión en la piel abdominal y las capas musculares. Continúe haciendo incisiones longitudinales hasta que la cavidad abdominal quede expuesta. Luego, ubique los intestinos y levántelos ligeramente. Corta debajo de los intestinos y retíralos del cuerpo del ratón para exponer los riñones.

A continuación, busque el uréter y corte los tejidos conectivos subyacentes para que los riñones se separen de la cavidad abdominal. Extirpar ambos riñones individualmente. Coloque el riñón extraído en un plato que contenga un tampón helado y obsérvelo bajo un microscopio de disección.

Ahora, retire la grasa perinefris del riñón para visualizar la pelvis renal, una parte dilatada del uréter en forma de embudo. Corta una parte de la pelvis renal de la base para eliminar los restos del uréter.

Finalmente, perfore la cápsula renal fibrosa externa superficialmente. Usando la abertura creada, retire con cuidado toda la cápsula renal de la superficie del riñón. Esto ayuda a extirpar la glándula suprarrenal, una glándula endocrina unida a la cápsula renal, y obtener un riñón intacto.

Con pinzas de tejido interno y tijeras de disección interna, pellizque los intestinos y levántelos de la pared abdominal. Simultáneamente, corte la parte inferior de los intestinos para liberarlos del cuerpo en el duodeno proximal y el colon distal para acceder al espacio retroperitoneal que contiene los riñones.

Pellizque y levante suavemente el extremo distal del uréter con pinzas de tejido. Con las tijeras de disección, corte debajo del uréter pellizcado hacia el riñón hasta que se libere del tejido conectivo circundante. Una vez que los riñones estén expuestos, extráigalos individualmente.

Llene un plato recubierto de elastómero de silicona con una solución de KRB helada. Transfiera el riñón a la placa de disección y asegúrese de que esté completamente sumergido. Use tijeras finas de resorte y fórceps internos para eliminar el tejido adiposo de la base del riñón para exponer la pelvis renal distal o RP y el uréter proximal.

Retire el uréter proximal y una parte de la RP distal de la base con tijeras de resorte finas y fórceps. Perfore la cápsula renal externa con pinzas de punta fina, inclinando las puntas lejos del cuerpo renal. Con fórceps con cada mano, pellizque los extremos sueltos de la cápsula y sepárelos hasta que la membrana restante de la cápsula renal se elimine por completo.