Name: Ecocardiografía murino y la ecografía (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-08-08T19:00:00.000+00:00
Duration: 9 min
Description: Aprende ecocardiografía en ratones anestesiados para evaluar la función cardíaca usando ultrasonido de alta frecuencia. Este método permite analizar cambios morfológicos y funcionales del corazón en modelos de insuficiencia.

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Fuentes de financiamiento: HL084087, HL089885, HL091475, S10RR027946, T32 GM07356

1. Preparación para la imagen <ol><li> Empezar por asegurar un ratón anestesiado isoflurano a una plataforma de manejo de animales en la posición supina. Coloque un cono de la nariz sobre la nariz del animal y la boca para entregar 0,5-1% isoflurano para mantener la anestesia. </li><li> Asegurar las patas del ratón para los electrodos con gel conductor. Garantizar la adecuada ECG, la temperatura corporal a 37 º C y comprobar la frecuencia respiratoria para la evaluación fisiológica durante la exploración. </li><li> Aplicar la crema depilatoria para el tórax y abdomen superior del ratón. </li><li> Después de 2 minutos, utilizar una gasa húmeda eliminar a la crema. </li></ol> 2. Izquierda eje largo paraesternal <ol><li> Una vez que el ratón se ha preparado para la imagen, la inclinación de la parte izquierda de la plataforma para girar la plataforma de manejo de animales de 30 grados sobre el eje anterioposterior. </li><li> Orientar el transductor en la posición vertical y girar 10 grados hacia la izquierda con la muesca apuntando hacia la parte posterior del ratón. </li><li> A continuación, mientras que en las dos dimensiones de visualización / video "B-mode", baje el transductor sobre la línea paraesternal izquierdo hasta que el corazón está a la vista. Una vez que la arteria pulmonar está a la vista, recoge imágenes y almacenarlas. </li><li> Sin embargo en el modo B, mover el transductor a la izquierda oa la derecha hasta la salida de la aorta y el ápice salir a la luz. Algunos de rotación de la sonda puede ser necesaria para asegurar una alineación correcta con el eje longitudinal del corazón. </li><li> Utilice la captura de vídeo para obtener datos para su posterior análisis. Reducir al mínimo el campo de visión para asegurar la tasa de cuadro más elevadas para los análisis posteriores tensión regional. Cada vez que se captura un video, antes de la 100 imágenes se guardan. </li><li> Cambiar al modo Doppler Color, seleccione "Color Doppler". A pesar de Doppler color ha estado disponible por más de 30 años en los seres humanos, esta tecnología sólo ha sido posible en el ultrasonido de roedores. </li><li> De forma rápida monitorear la dirección y velocidad del flujo sanguíneo, la superposición de la ventana Doppler digitaliza el flujo de color rojo, indicando el flujo hacia la sonda, de color azul, lo que indica el flujo de distancia de la sonda. Adquisición de imágenes necesarias por la captura de imágenes. </li><li> Una vez que todos los datos Doppler color se ha obtenido, cambiar el instrumento de la onda de pulso Doppler modo, el punto de vista unidimensional para evaluar digitalmente la dirección del flujo sanguíneo y la velocidad con el tiempo. </li><li> Mover la sonda ligeramente hacia la cabeza del ratón hasta la arteria pulmonar está a la vista. En el contexto de la insuficiencia cardiaca, PW / Color mediciones Doppler de la arteria pulmonar puede ser utilizado como un sustituto de la función del corazón derecho. Capturar imágenes como desee. </li></ol> 3. Izquierda a mediados de papilar eje corto <ol><li> Eje corto ecocardiografía proporciona una vista de toda la izquierda del ventrículo contratación de manera concéntrica, y permite la correcta B y M-modo de evaluación basado en la función cardiaca y su morfología. </li><li> En el modo B, de la vista de eje largo paraesternal, rotar el transductor ortogonal a la izquierda eje largo paraesternal a nivel del músculo papilar. </li><li> Asegurar la ubicación correcta a lo largo del ventrículo izquierdo. Ambos músculos papilares deben ser claramente visibles y separados, dando una sección horizontal de vista. </li><li> Con el modo M, coloque el volumen de la muestra a través del centro del ventrículo y la adquisición de datos. </li><li> Si lo desea, adjuntar, iniciar y utilizar el motor de 3 dimensiones para obtener las imágenes necesarias para completar la reconstrucción en 3 dimensiones. </li><li> Configuración de la fisiología, incluyendo la frecuencia respiratoria y el ECG, se establecen para la captura de imágenes en 3D en gating final de la diástole </li><li> El motor 3D de imágenes para que se inicie la captura de imágenes en el final de la diástole. </li><li> Una vez que la captura 3D final de la diástole es completa, la configuración de la fisiología de la frecuencia respiratoria y el ECG se establecen para conmutar los de captura de imágenes en 3D en el final de la sístole </li><li> El motor 3D de imágenes para que se inicie la captura de imágenes en el final de la sístole. </li></ol> 4. Subcostal (cuatro cámaras) para ver <ol><li> La vista subcostal es el mejor enfoque para la medición de los gradientes de la competencia y presión en la válvula mitral. </li><li> La inclinación de la esquina superior izquierda de la plataforma hasta el fondo. Orientar el transductor hacia el hombro derecho del ratón, manteniendo el eje de rotación corta de la sonda. </li><li> En el modo B, baja el transductor sobre la parte superior del abdomen para que se apoye por debajo del diafragma. Visualizar la válvula mitral con Doppler color como se ha descrito antes. </li></ol> 5. Aórtica vista <ol><li> Girar la plataforma de manejo de animales en la posición de decúbito lateral izquierdo. El lado izquierdo de la plataforma se debe inclinar la medida de lo posible. A continuación, orientar el transductor, se inclinó lo más arriba posible, a lo largo de la longitud del ratón en el ámbito de laescápula. </li><li> Inferior del transductor inferior a la del hombro derecho a lo largo de la línea axilar anterior. Visualizar el arco aórtico, y adquirir las imágenes. </li><li> Levante la cabeza del ratón, y reducir el transductor en la horquilla esternal del ratón. Visualizar el flujo sanguíneo con Doppler color, y la obtención de imágenes. </li></ol> 6. Resultados representante <ol><li> Esta es una vista de eje largo del corazón en el modo B que muestra tanto en el ventrículo izquierdo y una pequeña porción del ventrículo derecho. </li><li> Aquí, una vista a la izquierda del eje corto de otro corazón fue tomada en modo-M. La imagen superior muestra la posición de la línea de volumen de la muestra en amarillo por el centro de la cámara. La imagen de abajo es una traza de una sola dimensión de la línea anterior en el tiempo, así como los cálculos de la morfometría de color cyan </li><li> Esta es una vista del arco aórtico en B-mode. La válvula aórtica cerrada se puede ver a la izquierda y los vasos sanguíneos que irrigan los miembros superiores y la cabeza del ratón se puede ver a la derecha. </li><li> Análisis de la deformación radial se realizó en un ratón antes de desarrollar la disfunción del corazón, que se muestra en la imagen superior, y un ratón con hipocinesia global y la asincronía regional, que se muestra en la imagen inferior. Ambos fenotipos fueron inducidos a través de constricción de la aorta transversa, un modelo de ratón de aumento de la poscarga. </li><li> En la figura, el tiempo se muestra en el eje X y la tensión radial, como un porcentaje, se muestra en el eje. Análisis de las cepas permite la evaluación regional de la función cardiaca que de lo contrario puede pasar desapercibido en las técnicas convencionales, tales como el modo M, que sólo mide directamente la función de la pared libre anterior y la pared posterior. </li><li> La pared libre anterior se muestra en verde. La línea rosa muestra la pared lateral se muestra en color rosa. La pared posterior se muestra en cian. La pared libre inferior se muestra en azul. La pared posterior del tabique se muestra en amarillo. El tabique anterior se muestra en color magenta, y el promedio se muestra en negro. </li></ol><img src="/files/ftp_upload/2100/2100fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. Izquierda eje largo paraesternal en modo-B. <img src="/files/ftp_upload/2100/2100fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Vista izquierda del eje corto en modo-M. <img src="/files/ftp_upload/2100/2100fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Vista del arco aórtico en B-mode. <img src="/files/ftp_upload/2100/2100fig4.jpg" alt="Figura 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 4"> Figura 4. Análisis de la deformación radial de dos ratones 12 semanas post-TAC. Verde = ant. pared libre. Rosa = pared lateral. Cian = pared posterior. Azul = inf. pared libre. Amarillo = mensaje. tabique. Magenta = septum anterior. Negro = promedio A) de ratón con función conservada. B) ratón con hipoquinesia global y la asincronía regional.

<ol><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%3A+development+of+novel+therapies%2C+past+and+present%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Heart+Fail%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).</li>
<li>Li, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+and+MRI+Validation+of+Regional+Contractile+Dysfunction+in+Mice+Post+Myocardial+Infarction+Using+High+Resolution+Ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+%26+Biology%22%5BJournal%5D)">Quantification and MRI Validation of Regional Contractile Dysfunction in Mice Post Myocardial Infarction Using High Resolution Ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine & Biology. 33, 894-904 (2007).</li>
<li>Gardin, J. M., Siri, F. M., Kitsis, R. N., Edwards, J. G., Leinwand, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+Assessment+of+Left+Ventricular+Mass+and+Systolic+Function+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic Assessment of Left Ventricular Mass and Systolic Function in Mice.</a> Circ Res. 76, 907-914 (1995).</li>
<li>JG, S. tevenson, Weiler, T. B. M., EA, H. oward, Eyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+multigate+Doppler+with+color+echo+and+Doppler+display+-+Diagnosis+of+atrial+and+ventricular+septal+defects%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Digital multigate Doppler with color echo and Doppler display - Diagnosis of atrial and ventricular septal defects.</a> Circulation. 60, (1979).</li>
<li>Patten, R. D., Aronovitz, M. J., Bridgman, P., Pandian, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+pulse+wave+and+color+flow+Doppler+echocardiography+in+mouse+models+of+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Use of pulse wave and color flow Doppler echocardiography in mouse models of human disease.</a> J Am Soc Echocardiogr. 15, 708-714 (2002).</li>
<li>Hoit, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+characterization+of+the+cardiovascular+phenotype+in+rodent+models%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Pathol%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic characterization of the cardiovascular phenotype in rodent models.</a> Toxicol Pathol. 34, 105-110 (2006).</li>
</ol>

Pistner, Belmonte, Blaxall: No hay nada que revelar Coulthard es un empleado de tiempo completo de Visualsonics.

La ecocardiografía de serie de alta frecuencia se ha convertido en una herramienta poderosa para no invasivo, de alta resolución de la evaluación de la morfología y la función cardiaca, sobre todo en modelos murinos de enfermedades del corazón. Mantener la temperatura fisiológica del cuerpo, así como las tasas comparables del corazón en ratones mediante el ajuste del nivel de anestesia antes de la obtención de imágenes, es fundamental para el éxito de este método. Todas las imágenes deben ser obtenidas utilizando el mis...

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Burns C. Blaxall
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Burns Blaxall
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Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging
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Murine echocardiography and ultrasound imaging

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Erratum: Murine echocardiography and ultrasound imaging

<table><tbody><tr><td>Sistema de Imagen Vevo 2100 (120 V)</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>VS-11945</td><td></td></tr><tr><td>Estación de Imagen Vevo 2100 1</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>SA-11982</td><td></td></tr><tr><td>Gel de ultrasonido</td><td>Parker Laboratories Inc.</td><td>01-08</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Abbott Laboratories</td><td>05260-05</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Anestesia Dual Compacto Vevo</td><td>VisualSonics, inc.</td><td>SA-12055</td><td></td></tr></tbody></table>

ecocardiografía murino y la ecografía

Murine Echocardiography and Ultrasound Imaging

Modelos de roedores de la fisiopatología cardiaca representa una valiosa herramienta de investigación para investigar el mecanismo de la enfermedad, así como la prueba de nuevas terapias. Una ecocardiografía proporciona una potente herramienta no invasiva para evaluar la morfometría de serie y la función cardiaca en un animal vivo. 2 Sin embargo, con esta técnica en ratones plantea desafíos únicos debido a su reducido tamaño y frecuencia cardíaca rápida de estos animales. 3 Hasta hace poco, pocos sistemas de ultrasonido eran capaces de realizar ecocardiografía de calidad en los ratones, y los que en general carecía de la resolución de imagen y velocidad de fotogramas necesarios para obtener mediciones cuantitativas verdad . Sistemas recién liberados, como el Vevo2100 VisualSonics proporcionar nuevas herramientas para los investigadores a estudiar cuidadosamente y no invasiva la función cardiaca en ratones. Este sistema genera imágenes de alta resolución y proporciona capacidades de análisis similares a los utilizados con los pacientes humanos. A pesar de Doppler color ha estado disponible por más de 30 años en los seres humanos, esta valiosa tecnología sólo ha sido posible en el ultrasonido de roedores. 4,5 Doppler Color tiene amplias aplicaciones de la ecocardiografía, incluyendo la capacidad para evaluar rápidamente la direccionalidad del flujo en los vasos y por medio de válvulas, y para identificar rápidamente la regurgitación de la válvula. Análisis de las cepas es un avance importante que se utiliza para medir cuantitativamente la función miocárdica regional. 6 Esta técnica tiene el potencial para detectar cambios en la patología, o la resolución de la patología, antes que las técnicas convencionales. Junto con la adición de reconstrucción de la imagen en tres dimensiones, la evaluación volumétrica de toda órganos es posible, incluyendo la visualización y evaluación de las estructuras cardíacas y vasculares. Murino compatible con imágenes de contraste también puede permitir mediciones volumétricas y la evaluación de la perfusión tisular.

Este video demuestra el uso de un carril montado en alta frecuencia de la sonda de ultrasonido para realizar un ecocardiograma en un ratón anestesiado. Los métodos de describir tanto las mediciones convencionales de dos dimensiones y en modo M de la función cardíaca, además de nuevos y más potentes herramientas como el color de Doppler, análisis de las cepas, así como imágenes de contraste general y específica.

Ecocardiografía murino y la ecografía

Los modelos de roedores de la fisiopatología cardíaca representan una herramienta de investigación valiosa para investigar los mecanismos de la enfermedad, así como para probar nuevas terapias.1...

La MU en la función cardíaca podría observarse mediante ecocardiografía. Aquí, la función cardíaca se evalúa en ratones normales y se muestran imágenes representativas provenientes del ultrasonido. Evaluación de la función cardíaca.En un modelo quirúrgico de ratón de insuficiencia cardíaca utilizando un vivo 2100 de Visual Sonic, el corazón se visualiza en dos dimensiones. Se capturan imágenes y videos para su análisis mediante imágenes en modo B, doppler de color y de onda de pulso, reconstrucción tridimensional y modo M. Luego, se analizan los videos y se revelan los cambios en la función cardíaca y la morfo a lo largo del tiempo.Hola, soy un pisser del laboratorio de Burns Blackwell en el Departamento de Medicina del Instituto de Investigación Cardiovascular AB en el Centro Médico de la Universidad de Rochester. Soy Steven Belmont, también del Laboratorio Black Salt. Soy Tonya Cohor de Visual Sonics y soy Bris Black Salt.Hoy les mostraremos un procedimiento para ecocardiografía de alta resolución en ratones. Utilizamos este procedimiento en nuestro laboratorio para estudiar la función cardíaca y la morfología. Así que comencemos.Comience por asegurar un ratón anestesiado con isoflurano en una plataforma de manejo de animales. En posición supina, coloque un cono nasal sobre la nariz y la boca del animal para administrar del 0,5 al 1 % de isoflurano. Para mantener la anestesia, sujete las patas del ratón a las almohadillas de los electrodos con gel conductor.Asegúrese de que la temperatura corporal adecuada en el ECG sea de 37 grados Celsius y verifique la frecuencia respiratoria para la evaluación fisiológica. Durante la obtención de imágenes, aplique crema depilatoria en el tórax y la parte superior del abdomen del ratón; después de dos minutos, use gasa húmeda para retirar la crema. Una vez que el ratón esté preparado para la obtención de imágenes, incline el lado izquierdo de la plataforma para rotar la plataforma de manejo del animal 30 grados alrededor del eje anterior-posterior.Oriente el transductor en posición vertical y gírelo 10 grados en sentido antihorario con la muesca orientada hacia la parte posterior del ratón. A continuación, mientras observa en modo B de video bidimensional, baje el transductor sobre la línea paraesternal izquierda hasta que el corazón entre en el campo de visión. Una vez que la arteria pulmonar entre en el campo de visión, capture imágenes y guárdelas en modo B como imágenes fijas; mueva el transductor hacia la izquierda o la derecha hasta que el flujo de salida aórtico y el ápice queden visibles.Puede ser necesario rotar ligeramente la sonda para asegurar una alineación adecuada con el eje largo del corazón. Utilice la captura de video para obtener datos para su análisis posterior. Minimice el campo de visión para garantizar la frecuencia de cuadros más alta posible.Para el análisis regional de deformación posterior. Cada vez que se captura un video, se guardan los 100 fotogramas anteriores. Cambie al modo Doppler en color seleccionando Doppler en color.Aunque el doppler color está disponible desde hace más de 30 años en humanos, esta tecnología solo recientemente ha sido posible en el ultrasonido de roedores. Para monitorear rápidamente la dirección y velocidad del flujo sanguíneo, la superposición de la ventana doppler digitaliza el flujo, mostrando en rojo el flujo hacia la sonda y en azul el flujo alejándose de la sonda. Adquiera las imágenes necesarias mediante la captura de imagen.Una vez que se hayan obtenido todos los datos de Doppler de color, cambie el instrumento al modo de Doppler de onda de pulso. La vista unidimensional utilizada para evaluar digitalmente el flujo sanguíneo, la dirección y la velocidad a lo largo del tiempo. Mueva ligeramente las sondas hacia la cabeza del ratón hasta que la arteria parea aparezca en la vista.En el contexto de la insuficiencia cardíaca, las mediciones con doppler color de onda de pulso en la arteria pulmonar pueden utilizarse como un sustituto de la función del corazón derecho. Capture imágenes en el eje corto según se desee. La ecocardiografía proporciona una vista de todo el ventrículo izquierdo contrayéndose de manera concéntrica y permite una evaluación precisa de la función cardíaca y de la geometría morfológica mediante modos B y M en modo B.Desde la vista del eje pulmonar paraesternal, gire el transductor de forma ortogonal a la vista del eje pulmonar paraesternal izquierdo, al nivel del músculo papilar. Asegúrese de la ubicación correcta a lo largo de la longitud del ventrículo izquierdo. Ambos músculos papilares deben ser claramente visibles y separados, proporcionando una vista transversal horizontal; con el modo M, coloque el volumen de muestra a través del centro del ventrículo y adquiera los datos si se desea.Conecte, inicie y utilice el motor tridimensional para obtener las imágenes necesarias para la reconstrucción tridimensional completa. Los parámetros de fisiología, incluyendo la frecuencia respiratoria y el ECG, se configuran para la adquisición sincronizada de imágenes 3D en diástole final. Una vez completada la captura 3D en diástole final.Los parámetros fisiológicos de frecuencia respiratoria y ECG se ajustan para sincronizar la captura de imágenes 3D en sístole final. La vista subcostal es el enfoque más adecuado para medir la competencia y los gradientes de presión a través de la válvula mitral. Incline completamente hacia abajo la esquina superior izquierda de la plataforma.Oriente el transductor hacia el hombro derecho del ratón, manteniendo la rotación del eje corto de la sonda en modo B; baje el transductor sobre el abdomen superior hasta que descanse por debajo del diafragma. Visualice la válvula mitral utilizando doppler en color como se describió anteriormente. Gire la plataforma de manejo del animal a la posición decúbito lateral izquierdo.El lado izquierdo de la plataforma debe inclinarse lo más posible. A continuación, oriente el transductor inclinado lo más hacia arriba posible a lo largo de la longitud del ratón a la altura de la escápula. Baje el transductor por debajo del hombro derecho a lo largo de la línea axilar anterior.Visualice el arco aórtico y adquiera imágenes. Eleve la cabeza del ratón y baje el transductor hacia la fosa supraesternal del ratón. Visualice el flujo sanguíneo utilizando Doppler color y adquiera imágenes.Esta es una vista del eje largo del corazón en modo B que muestra tanto el ventrículo izquierdo como una pequeña porción del ventrículo derecho aquí. Se obtuvo una vista del eje corto izquierdo de otro corazón en modo M. La imagen superior muestra la posición de la línea del volumen de muestra en color amarillo a través del centro de la cavidad.La imagen inferior es un trazo unidimensional de la línea anterior a lo largo del tiempo, así como los cálculos de morpho en cian. Esta es una vista del arco aórtico en modo B. La válvula aórtica cerrada puede observarse a la izquierda y el vaso sanguíneo que suministra sangre a la cabeza y a las extremidades superiores del ratón puede observarse a la derecha.Se realizó un análisis de deformación radial en un ratón antes de desarrollar disfunción cardíaca, mostrada en la imagen superior, y en un ratón con hipocinesia global y disincronía regional, mostrada en la imagen inferior. Ambos fenotipos se indujeron mediante constricción aórtica transversa. Un modelo de ratón con aumento de la postcarga en la figura.El tiempo se muestra en el eje X y la deformación radial como porcentaje se muestra en el eje Y. El análisis de deformación permite la evaluación regional de la función cardíaca que de otro modo podría pasar desapercibida. En técnicas convencionales como el modo M, que solo mide directamente la función de la pared libre anterior y la pared posterior, la pared libre anterior se muestra en verde.La pared lateral se muestra en rosa. La pared posterior se muestra en cian. La pared inferior libre se muestra en azul.La pared septal posterior se muestra en amarillo. El septo anterior se muestra en magenta y el promedio se muestra en negro. Acabamos de mostrarle cómo realizar ecocardiografía en ratones al realizar este procedimiento.Es importante recordar orientar correctamente la sonda de ultrasonido utilizando los mismos puntos de referencia para garantizar datos confiables. Eso es todo. Gracias por ver este video y buena suerte con sus experimentos.

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Alta frecuencia de alta resolución Ecocardiografía: Primera evidencia sobre la no-invasivo medida repetida de la tensión de miocardio, la contractilidad y la insuficiencia mitral en el corazón por isquemia-reperfusión murino

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