Obtención de amiloides citotóxicos después de la infección bacteriana de las células endoteliales pulmonares de rata
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:14 min. • September 26th, 2025
Tome una monocapa de células endoteliales pulmonares de rata.
Lave las células con tampón. Añadir una suspensión de Pseudomonas aeruginosa e incubar.
Durante la incubación, las bacterias entran en contacto con las células e inyectan proteínas efectoras en el citoplasma.
Estas proteínas efectoras inducen la descomposición de los microtúbulos y la alteración citoesquelética.
La alteración citoesquelética activa las respuestas de estrés celular, lo que lleva a la formación de agregados de proteínas citotóxicas mal plegados: oligómeros amiloides.
Las proteínas efectoras también crean poros en la membrana celular, lo que permite la liberación de oligómeros amiloides en el espacio extracelular.
Además, la alteración citoesquelética altera la morfología celular, creando brechas intercelulares en la monocapa endotelial.
A continuación, observe la monocapa bajo un microscopio óptico. Una vez que las brechas intercelulares se hagan evidentes, termine la incubación.
Luego, recolecte el sobrenadante que contiene amiloides citotóxicos y centrifugue para granular los desechos.
Recoge el sobrenadante y fíltralo para eliminar cualquier bacteria restante.
El sobrenadante cosechado que contiene amiloides cito
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