Infarto agudo de miocardio en ratas

El modelo de rata con infarto agudo de miocardio (IAM) es útil para estudiar las consecuencias de un infarto de miocardio en la función cardíaca fisiopatológicos y fisiológicos.

El objetivo general de este procedimiento es modelar el infarto agudo de miocardio en ratas para el estudio de los mecanismos de señalización cardíaca asociados con la respuesta inmediata del miocardio a la isquemia cardíaca, seguida de la lesión por reperfusión. Estas respuestas incluyen el tamaño del infarto, el área en riesgo y la muerte celular. El primer paso es exponer el ventrículo izquierdo haciendo una pequeña incisión en el cuarto espacio intercostal del lado izquierdo del tórax y extendiendo las costillas una vez aisladas.

La arteria descendente anterior izquierda, o LAD, se liga transitoriamente durante 30 minutos después del período isquémico. La ligadura de la DA se libera, lo que permite la reperfusión cardíaca después de un período de reperfusión de cuatro horas. El DAA se liga una vez más antes de extirpar el corazón y se examina para determinar el tamaño del área de miocardio infartada en riesgo y no en riesgo.

En última instancia, los resultados de la evaluación histológica del infartado. El miocardio se puede utilizar para explorar estrategias terapéuticas para el tratamiento de la insuficiencia cardíaca. Esta técnica puede proporcionar información sobre los mecanismos de señalización asociados con las respuestas inmediatas a la isquemia, seguidas de lesiones competentes como el tamaño del infarto, el área en riesgo y la muerte celular.

Este modelo se puede utilizar para evaluar nuevas estrategias terapéuticas para el tratamiento de la cardiopatía isquémica. Para demostrar el procedimiento estará un investigador asociado senior y X, un becario postdoctoral senior del laboratorio del Dr. Bradley McConnell en el Departamento de Ciencias Farmacológicas y Farmacéuticas de la Universidad de Houston, miembro institucional del Centro Médico de Texas. Antes de que pueda comenzar el procedimiento quirúrgico, la superficie de operación debe desinfectarse con etanol al 70%.

Esterilice todos los instrumentos quirúrgicos con un esterilizador de perlas calientes antes de cada cirugía individual. Los instrumentos necesarios incluyen dos tijeras quirúrgicas, una pinza, una pinza curva, dos portaagujas y un retractor torácico. Ajuste la temperatura del sistema de mantas homeo-témicas para que mantenga la temperatura corporal del animal a 37 más o menos un grado centígrado.

El tamaño de un infarto depende de la duración de la oclusión, así como de la temperatura corporal. Tenga a mano gasas de algodón y aplicadores para controlar el sangrado. En estos estudios solo se utilizan animales que pasan un examen físico mediante inspección visual, medición de la frecuencia cardíaca, la frecuencia respiratoria, la temperatura corporal y el peso corporal.

Registre el peso y las características de identificación de los animales sanos que se someterán a la cirugía el día antes de la cirugía. Administrar una dosis de mascarillas de buprenorfina. Se deben usar batas y guantes durante todo el procedimiento, y los guantes deben cambiarse entre cirugías individuales.

Para comenzar, anestesia a una rata y prepare el sitio quirúrgico afeitando bien el pelaje de las áreas del cuello y el pecho. Desinfecte las áreas afeitadas con una solución de Betadine, seguida de etanol al 70%. Repita este procedimiento tres veces.

Coloque al animal en un sistema de mantas homeo para el mantenimiento adecuado de la temperatura corporal. Acostado sobre su lado derecho. El biselado de los bordes de un tubo de polietileno facilita la inserción en la laringe.

Inserte el tubo endotraqueal con la ayuda de un microscopio estereoscópico quirúrgico. Manipular suavemente la lengua según sea necesario y mantener la tráquea a la vista. Conecte el tubo endotraqueal a un ventilador con un ciclo de 80 respiraciones por minuto y un volumen corriente de 1,2 mililitros por cada 100 gramos de peso corporal.

Una vez lograda la ventilación mecánica, se coloca un paño estéril sobre la rata dejando solo expuesta la zona quirúrgica. Una vez que se establezca una respiración constante, abra el tórax en el cuarto espacio intercostal izquierdo. Minimice el grado de corte en el tejido para reducir el riesgo de sangrado.

Coloque un retractor torácico dentro del cuarto espacio intercostal y separe las costillas para exponer el ventrículo izquierdo o el ventrículo izquierdo, se debe tener cuidado de no dañar el pulmón. A continuación, abra el pericardio, dejándolo en su lugar. Si es posible, identifique la arteria descendente anterior o LAD proximal izquierda con el uso de un microscopio estereoscópico quirúrgico.

Transitoriamente, ligar o atar con un nudo corredizo el LAD para inducir isquemia. Teniendo cuidado de no exteriorizar el corazón propiamente dicho. La ligadura de la DA se confirma mediante la observación de blanqueamiento del tejido miocárdico distal a la sutura, así como disfunción de la pared anterior durante el período isquémico.

Después de un período isquémico de 30 minutos, se inicia la reperfusión cardíaca cortando o soltando la ligadura alrededor de la DA con tijeras microquirúrgicas. La reperfusión se verifica por el retorno del color rojo al tejido miocárdico y la demostración de cierta recuperación del movimiento de la pared anterior observada inmediatamente después de la liberación de la ligadura de LAD. El procedimiento es idéntico para las ratas de control simuladas, excepto que la LAD no está ligada transitoriamente.

Retire el retractor torácico y junte las costillas con un patrón de sutura interrumpido. Una vez que las costillas estén cerradas, cree una presión torácica negativa para asegurar una respiración adecuada extrayendo aire de la cavidad torácica. Finalmente, cierre la piel con un patrón de sutura continuo Después de la cirugía, coloque a la rata en una jaula con una almohadilla térmica y agua, controle la temperatura corporal con un termómetro rectal, la frecuencia respiratoria mediante inspección visual, la frecuencia cardíaca con palpitaciones y signos anormales de dolor hasta que el animal se vuelva ambulatorio.

Se debe administrar solución salina estéril. Si se observan signos de deshidratación, administre buprenorfina inmediatamente después de la cirugía. Después de un período de reperfusión de cuatro horas, vuelva a colocar la rata reanestesiada en el área quirúrgica.

Visualice el ventrículo izquierdo como se demostró anteriormente y lige el LADA por segunda vez o el nudo corredizo se puede volver a atar. Inyectar un mililitro de azul y solución salina de Evans al 5% en la cámara ventricular derecha y dejar perfundir durante dos minutos. Después de este período, inyecte un mililitro de solución saturada de cloruro de potasio en la cámara ventricular derecha para detener el latido rápido del corazón, extirpe el corazón e insértelo en solución salina tamponada con 2% de agrofosfato calentado.

Una vez que el agro se solidifique a temperatura ambiente, corte el corazón en secciones de uno a dos milímetros. Tiñir el miocardio viable con cloruro de tetra oleum al 2% de trien o TTC durante 20 minutos y capturar una imagen de cada corte observado. Aquí hay una imagen representativa del corazón de rata.

Después de cuatro horas de reperfusión, el área en azul representa el área no ocluida o no perfundida en riesgo. Las áreas rojas indican el área en riesgo de infarto y las áreas blancas y amarillas denotan miocardio infartado dentro del área de riesgo. Después de ver este video, debe tener una buena comprensión de cómo actuar en el infarto agudo de miocardio en ratas y en el modelo animal utilizado para imitar la cardiopatía isquémica humana.

Este modelo se puede utilizar para estudiar las respuestas inmediatas a la isquemia, seguida de una lesión por reperfusión que se produce dentro de las primeras horas, como el tamaño del infarto, el riesgo de área y la muerte celular. Como observas en este video, buena suerte con tus experimentos.