Name: La presión de la ventilación controlada para inducir la lesión pulmonar aguda en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-05T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Aprende a inducir lesión pulmonar aguda en ratones mediante ventilación mecánica de alta presión tras traqueotomía. Este modelo in vivo permite recolectar muestras biológicas para estudiar el síndrome de distrés respiratorio agudo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<p class="jove_content"&gt; En el presente estudio son apoyados por National Heart, Lung, and Blood Institute Grant R01-HL0921, R01-DK083385 y R01HL098294 a HK Eltzschig, el 1K08HL102267-01 a T. Eckle, y la Fundación para la Educación Anestesia y becas de investigación a T. Eckle y HK Eltzschig, y la American Heart Association Grant T. Eckle y Eltzschig HK y Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) beca de investigación de M. Koeppen.</p

Observaciones generales: Todas las operaciones deberán realizarse bajo un microscopio de disección en posición vertical (Olympus, SZX10 con Post manivela del eje Z con STU2 codo ya pie) y utilizando un coagulador quirúrgico (11). Los grupos experimentales deberían ir acompañados de la mejor manera posible en la edad y el peso para asegurar la comparabilidad de los resultados. Administración de la temperatura, la presión arterial, la anestesia y el líquido debe ser estable a lo largo. 1. Anestesia y preparación tráquea <ol><li> Use los ratones C57BL / 6 que son al menos 10 semanas de edad y tener un cuerpo de 22 a 25 g. Inducir la anestesia con pentobarbital sódico a una dosis de 70 mg / kg peso corporal ip (6). Mantenimiento de la anestesia, aproximadamente, con 10 mg / kg / h de sodio pentobarbital. Tenga cuidado con la sobredosis ya que esto podría reducir significativamente la presión arterial. Volver a la dosis de pentobarbital - incluso después de horas-puede conducir a un aumento severo en los niveles plasmáticos. </li><li> Después de la inducción de anestesia, los ratones seguro en una posición supina con las extremidades superiores e inferiores unido a la mesa con una cinta y una sutura sujeta a los tobillos. Haga lo mismo con la cabeza con los dientes. Restricción suficiente es importante para una intubación exitosa y una cirugía bien controlados. Antes de la cirugía, la cubierta del ratón con aceite mineral para reducir el riesgo de alergia del ratón de pelo. A fin de garantizar que la temperatura corporal se mantiene estable cubrir los ratones con una envoltura de los alimentos disponibles en el mercado. </li><li> Ratones a cabo sobre una mesa se calienta a temperatura controlada (RT, Effenberg, Munich, Alemania) con una sonda del termómetro rectal conectado a un controlador de retroalimentación térmica para mantener la temperatura corporal a 37 º C. </li><li> Exponer la tráquea mediante cirugía. Diseccionar los laterales y dorsal de la tráquea del tejido conectivo y el lugar dos 3.0 sutura de seda quirúrgica (Harvard aparato, EE.UU.), cada 10 cm de largo por debajo de la tráquea. Las suturas deben ser de aproximadamente 1 cm de distancia. </li><li> Cuidadosamente la incisión en la tráquea 3-4 mm por debajo de la laringe entre los dos cartílagos circular con una tijera McPherson-Vannas (8 cm, hoja recta, instrumentos de precisión del mundo, EE.UU.). Asegúrese de no causar un sangrado, ya que esto podría confundir a los parámetros de resultado. </li><li> Realizar una intubación traqueal con un objeto contundente de polietileno de cánulas (Insyte 22g, Beckton Dickinson, EE.UU.). Inserte la punta de la cánula de polietileno en un ángulo de 85 grados en la tráquea. A continuación, la inclinación de la cánula por lo que está en consonancia con la luz traqueal. Poco a poco avanzar el tubo más abajo en la tráquea hasta la punta de la cánula ha desaparecido en la apertura del tórax. Se fija el tubo en esta posición con la sutura de seda quirúrgica colocado dos dorsal de la tráquea (ver 1.4). </li></ol> 2. Técnica de la lesión pulmonar inducida por el ventilador <ol><li> Conecte el tubo a un ventilador. Para inducir la lesión pulmonar se utiliza una técnica de ventilación con presión controlada mediante el uso de un Servo 900 C de Siemens (DRE Veterinaria, EE.UU.). Los animales serán ventilados con presión inspiratoria máxima de 45 mbar, la frecuencia de 80 respiraciones / min y una presión espiratoria final positiva de 0-3 mbar con una FiO 2 = 1,0. La inspiración de relación de caducidad debe ser de 1:1. A pesar del hecho de que el Servo 900 C es construido como ventilador para los seres humanos, su uso en un entorno de presión del ventilador controlado excelentes trabajos para la ventilación de los ratones. </li><li> Monitor de ritmo cardíaco con un electrocardiograma (por ejemplo, Hewlett Packard, B blingen, Alemania). Asegúrese de que la frecuencia cardiaca no baja por debajo de 400. Uno debe ver un cambio del eje de corazón a la derecha, cuando la ventilación mecánica se instituye como un signo de aumento de la presión arterial pulmonar posterior a un aumento de la presión intratorácica. Si el ratón desarrolla bradicardia, comprobar la temperatura y la dosis de anestesia / concentración. Xylacin / ketamina induce anestesia el corazón del corazón de 250 / min y por lo tanto no se recomienda. </li><li> Aplicar una adecuada reposición de líquidos. Una infusión de solución salina normal 0,1 ml / hora a través de un catéter arterial o venosa debe realizarse antes de la ventilación para asegurar una presentación venosa suficiente. Debido a las altas presiones de ventilación se deteriora el retorno venoso al corazón, lo que podría conducir a una disminución crítica de la presión arterial media. Además, un bolo de solución salina de 500 l se podría dar ip antes de la cirugía. </li><li> Colocar un catéter en la arteria carótida para la grabación continua de la presión arterial (27). Fije el brazo al cuerpo antes de comenzar la disección de la arteria. La arteria carótida se expone a través de una disección roma de los músculos paratraqueales. Después de la exposición y evitar más cuidadosa de cualquier trauma tisular (en particular del nervio vago), se inserta un catéter en el vaso con dos puntos de sutura y una pequeña abrazadera (37). Esto expondrá un segmento más largo de la arteria. Colocar una ligadura en el extremo de la arteria carótida. Coloque una pinza más grande hasta el final de la sutura para obtener ª tensión o se fijene sutura a la mesa con cinta adhesiva. En otro lugar de sutura alrededor de la arteria y la disección de la arteria hasta el final distal. Aquí, el lugar una pequeña abrazadera. Use las tijeras micro a un pequeño corte diagonal en la arteria. Mantener la apertura con una pinza fina (Dumont, IPM) y el catéter de tamaño adecuado con las manos / pinzas. Hacer un nudo con su segunda sutura y seguro de la arteria. Afloje la abrazadera y el catéter más. Asegure el catéter con varios nudos y cinta adhesiva. Alternativamente, el catéter en la arteria carótida se puede colocar al final del experimento para recoger muestras de sangre arterial para análisis de gases en sangre. </li></ol> 3. Recuperación de muestras de tejido Después de 3 horas de ventilación mecánica, se recogen muestras para evaluar el grado de lesión pulmonar. Se recomienda recoger el líquido de lavado brochnoalveolar (BAL), la sangre arterial y el tejido pulmonar. <ol><li> Obtener el líquido de BAL en el final del experimento. Después de la profundización de la anestesia, a ras del tubo traqueal con fosfato de 1 ml de solución salina (PBS). El líquido debe permanecer en la tráquea / pulmón durante tres segundos antes de que sea a través de la recuperación de la jeringa conectada. El BAL es snap-congelado en nitrógeno líquido y se almacenan a -80 ° C para su posterior análisis. Tenga en cuenta que el volumen recuperado puede ser significativamente inferior a 1 ml. </li><li> Realizar un análisis de gases en sangre al final del experimento. Con el fin de hacer eso, una incisión debe ser justo debajo del esternón. Mantenga el esternón con las pinzas y la extensión de la incisión a lo largo de la caja torácica. A continuación, el diafragma se incide en los bordes y se corta de las costillas. Ahora hay una bella vista en la abertura inferior del tórax. Levantar el esternón con fórceps y abrir el tórax por los recortes de largo en el lado derecho e izquierdo (como lateral como sea posible) para que toda la pared torácica anterior está activado, las salas. Esto se debe hacer, mientras que el animal de experimentación sigue siendo ventilados mecánicamente. El ventrículo izquierdo se pincha con una aguja de 27 G ½ y el análisis de la sangre arterial se realiza mediante el Sistema i-STAT (Abbott, EE.UU.). Si el análisis de gases en sangre arterial se debe realizar, una BAL no se puede obtener, ya que éste será un factor de confusión importante en los resultados. </li><li> Como alternativa al método anterior, las muestras de sangre arterial pueden ser recogidos a través del catéter en la arteria carótida. Sin embargo, esto debe hacerse antes de la BAL se obtiene. </li><li> Sobre consumos específicos de los pulmones en bloque tirando hacia arriba el corazón y cortar la tráquea. Tiene un pedazo de tejido preparado para absorber la sangre, por lo que el lugar de la cirugía es visible. Tire el corazón en la dirección del abdomen y corte con cuidado a lo largo de la columna vertebral para movilizar a todos los órganos torácicos. Cortar la aorta, extraer los órganos torácicos y colocarlos en una mesa de cirugía limpia. </li><li> Cortar el corazón y el vaso principal de la muestra de tejido. Asegúrese de que no hay tejido del timo todavía conectado a los pulmones. Aparte de los pulmones con una tijera y colocar en tubos individuales y complemento de congelación. Almacenar a -80 ° C para su posterior análisis. </li></ol> 4. Medición de la lesión pulmonar Se recomienda utilizar los parámetros siguientes resultados para evaluar el grado de lesión pulmonar: Realizar una albúmina ELISA (Bethyl Laboratories, EE.UU.) y mieloperoxidasa (MPO) ELISA (Hycult Biotecnología, EE.UU.) para evaluar el grado de disfunción de la barrera y la cantidad de inflamación las células en el líquido de BAL. Realizar una MPO ELISA también forman el tejido pulmonar. Si está mojado a seco relación se va a medir no se obtiene el líquido de BAL y la circulación pulmonar no se lava (ver 3.3). Medir el peso de los pulmones después de la escisión. A continuación, los pulmones son liofilizadas durante 48 horas y el tejido pulmonar se mide de nuevo. Entonces la relación de húmedo a seco se mide como mg de agua por mg de tejido seco (5). <img src="/files/ftp_upload/2525/2525fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. El contenido de proteína en el BAL, en respuesta a la IVL. Ratones fueron anestesiados con pentobarbital, la ventilación mecánica fue instituido y ratones fueron ventilados con presión controlada-settings (presión inspiratoria de 45 mbar, positiva al final de la presión exspiratory 3 mbar, 100% inspiración concentración de oxígeno). Después de 0, 1 hora, 2 y 3 de la ventilación BAL fue cosechada y el contenido de proteína se cuantificó mediante un ensayo de ácido bicinconínico (BCA). El cambio relativo del contenido de proteínas se muestra normalizada a 0 horas de ventilación (n = 4 por grupo, * indica p &lt;0.05 en comparación con el control, la media ± SEM)

<ol><li>Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Laucher, S., Thompson, L. F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A2B+adenosine+receptor+dampens+hypoxia-induced+vascular+leak%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">A2B adenosine receptor dampens hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 2024-2035 (2008).</li>
<li>Eckle, T., Fullbier, L. G. renz, A,, Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Usefulness+of+pressure-controlled+ventilation+at+high+inspiratory+pressures+to+induce+acute+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Usefulness of pressure-controlled ventilation at high inspiratory pressures to induce acute lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 295, 718-724 (2008).</li>
<li>Eckle, T., Fullbier, L., Wehrmann, M., Khoury, J., Mittelbronn, M., Ibla, J., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+ectonucleotidases+CD39+and+CD73+in+innate+protection+during+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Identification of ectonucleotidases CD39 and CD73 in innate protection during acute lung injury.</a> J Immunol. 178, 8127-8137 (2007).</li>
<li>Eckle, T., Grenz, A., Kohler, D., Redel, A., Falk, M., Rolauffs, B., Osswald, H., Kehl, F., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+evaluation+of+a+novel+model+for+cardiac+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Systematic evaluation of a novel model for cardiac ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291, 2533-2540 (2006).</li>
<li>Eckle, T., Grenz, A., Laucher, S., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A2B+adenosine+receptor+signaling+attenuates+acute+lung+injury+by+enhancing+alveolar+fluid+clearance+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">A2B adenosine receptor signaling attenuates acute lung injury by enhancing alveolar fluid clearance in mice.</a> J Clin Invest. 118, 3301-3315 (2008).</li>
<li>Eckle, T., Krahn, T., Grenz, A., Kohler, D., Mittelbronn, M., Ledent, C., Jacobson, M. A., Osswald, H., Thompson, L. F., Unertl, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardioprotection+by+ecto-5%27-nucleotidase+%28CD73%29+and+A2B+adenosine+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Cardioprotection by ecto-5'-nucleotidase (CD73) and A2B adenosine receptors.</a> Circulation. 115, 1581-1590 (2007).</li>
<li>Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenosine%3A+an+old+drug+newly+discovered%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Adenosine: an old drug newly discovered.</a> Anesthesiology. 111, 904-915 (2009).</li>
<li>Eltzschig, H. K., Eckle, T., Mager, A., Kuper, N., Karcher, C., Weissmuller, T., Boengler, K., Schulz, R., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ATP+release+from+activated+neutrophils+occurs+via+connexin+43+and+modulates+adenosine-dependent+endothelial+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">ATP release from activated neutrophils occurs via connexin 43 and modulates adenosine-dependent endothelial cell function.</a> Circ Res. 99, 1100-1108 (2006).</li>
<li>Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Furuta, G. T., Leonard, M. O., Jacobson, K. A., Enjyoji, K., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coordinated+adenine+nucleotide+phosphohydrolysis+and+nucleoside+signaling+in+posthypoxic+endothelium%3A+role+of+ectonucleotidases+and+adenosine+A2B+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Coordinated adenine nucleotide phosphohydrolysis and nucleoside signaling in posthypoxic endothelium: role of ectonucleotidases and adenosine A2B receptors.</a> J Exp Med. 198, 783-796 (2003).</li>
<li>Eltzschig, H. K., Kohler, D., Eckle, T., Kong, T., Robson, S. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+role+of+Sp1-regulated+CD39+in+hypoxia%2Fischemia+protection%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Central role of Sp1-regulated CD39 in hypoxia/ischemia protection.</a> Blood. 113, 224-232 (2009).</li>
<li>Frick, J. S., MacManus, C. F., Scully, M., Glover, L. E., Eltzschig, H. K., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+adenosine+A2B+receptors+to+inflammatory+parameters+of+experimental+colitis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Contribution of adenosine A2B receptors to inflammatory parameters of experimental colitis.</a> J Immunol. 182, 4957-4964 (2009).</li>
<li>Grenz, A., Eckle, T., Zhang, H., Huang, D. Y., Wehrmann, M., Kohle, C., Unertl, K., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+hanging-weight+system+for+isolated+renal+artery+occlusion+during+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Use of a hanging-weight system for isolated renal artery occlusion during ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Renal Physiol. 292, 475-485 (2007).</li>
<li>Grenz, A., Osswald, H., Eckle, T., Yang, D., Zhang, H., Tran, Z. V., Klingel, K., Ravid, K., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Reno-Vascular+A2B+Adenosine+Receptor+Protects+the+Kidney+from+Ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Reno-Vascular A2B Adenosine Receptor Protects the Kidney from Ischemia.</a> PLoS Medicine. 5, e137-e137 (2008).</li>
<li>Grenz, A., Zhang, H., Eckle, T., Mittelbronn, M., Wehrmann, M., Kohle, C., Kloor, D., Thompson, L. F., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+role+of+ecto-5%27-nucleotidase+%28CD73%29+in+renal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Protective role of ecto-5'-nucleotidase (CD73) in renal ischemia.</a> J Am Soc Nephrol. 18, 833-845 (2007).</li>
<li>Grenz, A., Zhang, H., Hermes, M., Eckle, T., Klingel, K., Huang, D. Y., Muller, C. E., Robson, S. C., Osswald, H., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+E-NTPDase1+%28CD39%29+to+renal+protection+from+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Contribution of E-NTPDase1 (CD39) to renal protection from ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 21, 2863-2873 (2007).</li>
<li>Grenz, A., Zhang, H., Weingart, J., von Wietersheim, S., Eckle, T., Schnermann, J. B., Kohle, C., Kloor, D., Gleiter, C. H., Vallon, V., Eltzschig, H. K., Osswald, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+effect+of+extracellular+adenosine+generation+and+signalling+on+renal+erythropoietin+secretion+during+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Renal+Physiol%22%5BJournal%5D)">Lack of effect of extracellular adenosine generation and signalling on renal erythropoietin secretion during hypoxia.</a> Am J Physiol Renal Physiol. , (2007).</li>
<li>Haeberle, H. A., Durrstein, C., Rosenberger, P., Hosakote, Y. M., Kuhlicke, J., Kempf, V. A., Garofalo, R. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxygen-independent+stabilization+of+hypoxia+inducible+factor+%28HIF%29-1+during+RSV+infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Oxygen-independent stabilization of hypoxia inducible factor (HIF)-1 during RSV infection.</a> PLoS ONE. 3, e3352-e3352 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Robson, S. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SP1-dependent+induction+of+CD39+facilitates+hepatic+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">SP1-dependent induction of CD39 facilitates hepatic ischemic preconditioning.</a> J Immunol. 184, 4017-4024 (2010).</li>
<li>Hart, M. L., Henn, M., Kohler, D., Kloor, D., Mittelbronn, M., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+extracellular+nucleotide+phosphohydrolysis+in+intestinal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Role of extracellular nucleotide phosphohydrolysis in intestinal ischemia-reperfusion injury.</a> FASEB J. 22, 2784-2797 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Jacobi, B., Schittenhelm, J., Henn, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutting+Edge%3A+A2B+Adenosine+receptor+signaling+provides+potent+protection+during+intestinal+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Cutting Edge: A2B Adenosine receptor signaling provides potent protection during intestinal ischemia/reperfusion injury.</a> J Immunol. 182, 3965-3968 (2009).</li>
<li>Hart, M. L., Kohler, D., Eckle, T., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+treatment+of+mouse+or+human+blood+with+soluble+5%27-nucleotidase+inhibits+platelet+aggregation%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Direct treatment of mouse or human blood with soluble 5'-nucleotidase inhibits platelet aggregation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 28, 1477-1483 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Much, C., Gorzolla, I. C., Schittenhelm, J., Kloor, D., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+adenosine+production+by+ecto-5%27-nucleotidase+protects+during+murine+hepatic+ischemic+preconditioning%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Extracellular adenosine production by ecto-5'-nucleotidase protects during murine hepatic ischemic preconditioning.</a> Gastroenterology. 135, 1739-1750 (2008).</li>
<li>Hart, M. L., Much, C., Kohler, D., Schittenhelm, J., Gorzolla, I. C., Stahl, G. L., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+hanging-weight+system+for+liver+ischemic+preconditioning+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Use of a hanging-weight system for liver ischemic preconditioning in mice.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 294, 1431-1440 (2008).</li>
<li>Hartmann, H., Eltzschig, H. K., Wurz, H., Hantke, K., Rakin, A., Yazdi, A. S., Matteoli, G., Bohn, E., Autenrieth, I. B., Karhausen, J., Neumann, D., Colgan, S. P., Kempf, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-independent+activation+of+HIF-1+by+enterobacteriaceae+and+their+siderophores%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-independent activation of HIF-1 by enterobacteriaceae and their siderophores.</a> Gastroenterology. 134, 756-767 (2008).</li>
<li>Heinzelmann, F., Jendrossek, V., Lauber, K., Nowak, K., Eldh, T., Boras, R., Handrick, R., Henkel, M., Martin, C., Uhlig, S., Kohler, D., Eltzschig, H. K., Wehrmann, M., Budach, W., Belka, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Irradiation-induced+pneumonitis+mediated+by+the+CD95%2FCD95-ligand+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Irradiation-induced pneumonitis mediated by the CD95/CD95-ligand system.</a> J Natl Cancer Inst. 98, 1248-1251 (2006).</li>
<li>Koeppen, M., Eckle, T., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+deletion+of+the+A1+adenosine+receptor+abolishes+heart-rate+slowing+effects+of+intravascular+adenosine+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Selective deletion of the A1 adenosine receptor abolishes heart-rate slowing effects of intravascular adenosine in vivo.</a> PLoS One. 4, e6784-e6784 (2009).</li>
<li>Kohler, D., Eckle, T., Faigle, M., Grenz, A., Mittelbronn, M., Laucher, S., Hart, M. L., Robson, S. C., Muller, C. E., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD39%2Fectonucleoside+triphosphate+diphosphohydrolase+1+provides+myocardial+protection+during+cardiac+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">CD39/ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1 provides myocardial protection during cardiac ischemia/reperfusion injury.</a> Circulation. 116, 1784-1794 (2007).</li>
<li>Kuhlicke, J., Frick, J. S., Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+Inducible+Factor+%28HIF%29-1+Coordinates+Induction+of+Toll-Like+Receptors+TLR2+and+TLR6+during+Hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Hypoxia Inducible Factor (HIF)-1 Coordinates Induction of Toll-Like Receptors TLR2 and TLR6 during Hypoxia.</a> PLoS ONE. 2, e1364-e1364 (2007).</li>
<li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Kuhlicke, J., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HIF-1-dependent+repression+of+adenosine+kinase+attenuates+hypoxia-induced+vascular+leak%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">HIF-1-dependent repression of adenosine kinase attenuates hypoxia-induced vascular leak.</a> Blood. 111, 5571-5580 (2008).</li>
<li>Morote-Garcia, J. C., Rosenberger, P., Nivillac, N. M., Coe, I. R., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor-dependent+repression+of+equilibrative+nucleoside+transporter+2+attenuates+mucosal+inflammation+during+intestinal+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor-dependent repression of equilibrative nucleoside transporter 2 attenuates mucosal inflammation during intestinal hypoxia.</a> Gastroenterology. 136, 607-618 (2009).</li>
<li>Reutershan, J., Vollmer, I., Stark, S., Wagner, R., Ngamsri, K. C., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenosine+and+inflammation%3A+CD39+and+CD73+are+critical+mediators+in+LPS-induced+PMN+trafficking+into+the+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Adenosine and inflammation: CD39 and CD73 are critical mediators in LPS-induced PMN trafficking into the lungs.</a> FASEB J. 23, 473-482 (2009).</li>
<li>Schingnitz, U., Hartmann, K., Macmanus, C. F., Eckle, T., Zug, S., Colgan, S. P., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Signaling+through+the+A2B+adenosine+receptor+dampens+endotoxin-induced+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Signaling through the A2B adenosine receptor dampens endotoxin-induced acute lung injury.</a> J Immunol. 184, 5271-5279 (2010).</li>
<li>Thompson, L. F., Eltzschig, H. K., Ibla, J. C., Van De Wiele, C. J., Resta, R., Morote-Garcia, J. C., Colgan, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crucial+role+for+ecto-5%27-nucleotidase+%28CD73%29+in+vascular+leakage+during+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Exp.+Med%22%5BJournal%5D)">Crucial role for ecto-5'-nucleotidase (CD73) in vascular leakage during hypoxia.</a> J. Exp. Med. 200, 1395-1405 (2004).</li>
<li>Aherne, C. M., Kewley, E. M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+resurgence+of+A2B+adenosine+receptor+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">The resurgence of A2B adenosine receptor signaling.</a> Biochim Biophys Acta. , (2010).</li>
<li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+extracellular+adenosine+in+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%28Bethesda%29%22%5BJournal%5D)">Role of extracellular adenosine in acute lung injury.</a> Physiology (Bethesda). 24, 298-306 (2009).</li>
<li>Koeppen, M., Feil, R., Siegl, D., Feil, S., Hofmann, F., Pohl, U., de Wit, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((cGMP-dependent+protein+kinase+mediates+NO-+but+not+acetylcholine-induced+dilations+in+resistance+vessels+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">cGMP-dependent protein kinase mediates NO- but not acetylcholine-induced dilations in resistance vessels in vivo.</a> Hypertension. 44, 952-955 (2004).</li>
</ol>

El presente estudio describe una técnica de llevar a cabo la ventilación lesión pulmonar inducida en ratones. Este modelo demuestra una lesión altamente reproducible debido a la ventilación de alta presión. Los investigadores que consideran que el estudio de la lesión pulmonar aguda en ratones se pueden beneficiar de este modelo.

<table border="1"><tbody><tr><th> Nombre del reactivo </th><th> Empresa </th><th> Número de catálogo </th><th> Comentarios (opcional) </th></tr><tr><td> Pentobarbital sódico (Fatal Plus) </td><td> Ls Vortech Farmacéutica, SA, </td><td> VPL 9372 </td><td> 4mg/mL en solución salina </td></tr><tr><td> Insyte 22 G </td><td> Beckton Dickinson </td><td> n / a </td><td></td></tr><tr><td> Sutura de seda 4.0 </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 517698 </td><td></td></tr><tr><td> Sutura de Prolene 8.0 </td><td> Ethicon, EE.UU. </td><td> M8739 </td><td> reutilizables </td></tr><tr><td> Siemens 900 ° C </td><td> DRE Veterinaria, EE.UU. </td><td> # 336 </td><td> reformado </td></tr><tr><td> microscopio de disección (SZX10) </td><td> Olimpo </td><td> n / a </td><td> considerar la distancia amplia zona de trabajo </td></tr><tr><td> Calefacción Mesa </td><td> Rt, Effenberger, Alemania </td><td> n / a </td><td> único proveedor y una sola </td></tr><tr><td> Dispositivo de presión de la sangre </td><td> El sentido cibernético, Inc </td><td> BPM02 </td><td></td></tr><tr><td> Yo STAT </td><td> Abbott </td><td> n / a </td><td></td></tr></tbody></table>

la presión de la ventilación controlada para inducir la lesión pulmonar aguda en ratones

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Modelos murinos son ampliamente utilizados para investigar las lesiones agudas de los sistemas de los diferentes órganos (1-34). La lesión pulmonar aguda (LPA), que ocurre con la ventilación mecánica prolongada, contribuye a la morbilidad y la mortalidad de la enfermedad crítica, y estudios sobre nuevas dianas genéticas o farmacológicas son zonas de intensa investigación (1-3, 5, 8, 26, 30, 33 -36). ALI se define por la aparición aguda de la enfermedad, lo que lleva a no cardiaca y edema pulmonar consiguiente alteración del intercambio pulmonar de gases (36). Hemos desarrollado un modelo murino de ALI mediante el uso de un sistema de ventilación con presión controlada para inducir el ventilador de la lesión pulmonar inducida (2). Para ello, los ratones C57BL / 6 son anestesiados y una traqueotomía se realiza seguida por la inducción de la LPA a través de la ventilación mecánica. Los ratones son ventilados en un entorno controlado por presión con una presión inspiratoria máxima de 45 mbar durante 1 a 3 horas. Como parámetros de resultado, edema pulmonar (húmedo a seco ratio), el contenido de fluido de albúmina broncoalveolar, líquido broncoalveolar y el contenido de tejido pulmonar mieloperoxidasa y el intercambio de gases pulmonares se evalúan (2). Usando esta técnica podemos demostrar que lo suficientemente induce la inflamación pulmonar aguda y puede distinguir entre los diferentes grupos de tratamiento o genotipos (1-3, 5). Por lo tanto, esta técnica puede ser útil para los investigadores que persiguen los mecanismos moleculares implicados en la LPA con un enfoque genético en ratones con genes específicos eliminación.

Un modelo murino de lesión pulmonar inducida por ventilador es una herramienta importante para el estudio de una lesión pulmonar aguda<em&gt; In vivo</em&gt;. En este sentido, un informe de fácil aplicación<em&gt; In situ</em&gt; Modelo de lesión pulmonar aguda con alta presión de ventilación mecánica para inducir un fallo agudo del pulmón.

La presión de la ventilación controlada para inducir la lesión pulmonar aguda en ratones

Los modelos murinos se utilizan ampliamente para investigar lesiones agudas de diferentes sistemas orgánicos (1-34). La lesión pulmonar aguda (ALI, por sus siglas en inglés), que ocurre tras una exposición prolongada...

El objetivo general de este procedimiento es inducir lesión pulmonar en ratones utilizando un ventilador. Esto se logra realizando una traqueotomía y administrando ventilación mecánica de alta presión. A continuación, se inserta un catéter en la arteria carótida para medir los parámetros hemodinámicos.Después de que el animal haya estado en el ventilador durante el tiempo suficiente para inducir lesión pulmonar, se recogen muestras de sangre arterial y líquido de lavado broncoalveolar. El paso final del procedimiento consiste en extraer el tejido pulmonar para su posterior análisis. En última instancia, se pueden obtener resultados que correlacionen los cambios en las muestras recogidas con la duración de la ventilación mecánica.La principal ventaja de esta técnica frente a métodos existentes como la inhalación de LPS es que induce una lesión pulmonar aguda, que presenta todas las características principales del síndrome de dificultad respiratoria aguda encontrado en humanos. Para comenzar, coloque un ratón anestesiado en posición supina sobre una mesa calefaccionada con control de temperatura, pase material de sutura alrededor de cada extremidad y luego fije las suturas con cinta adhesiva a la mesa. A continuación, asegure la cabeza en su lugar pasando una sutura por debajo de los dientes superiores.Administre un bolo de suero salino de 500 microlitros e inserte una sonda rectal conectada a un controlador de retroalimentación térmica para asegurar que la temperatura corporal se mantenga a 37 grados Celsius. Una vez preparado, se puede cubrir al ratón con aceite mineral para reducir la exposición a alérgenos del pelo. Por último, cubra al animal con una envoltura de alimento disponible comercialmente para ayudar a mantener la temperatura corporal.Para exponer la tráquea, realice una incisión a lo largo del cuello y separe por disección roma el músculo circundante y el tejido conectivo. Coloque dos suturas quirúrgicas de 10 centímetros de largo debajo de la tráquea, aproximadamente a un centímetro de distancia entre sí. Utilice tijeras McPherson y Vanna para incisionar cuidadosamente la tráquea entre dos anillos de cartílago, unos tres a cuatro milímetros por debajo de la laringe.Para completar la intubación, inserte la punta de una cánula de polietileno roma a un ángulo de 85 grados en la tráquea. A continuación, incline la cánula de modo que quede alineada con la luz traqueal. Avance lentamente el tubo hasta que la punta haya desaparecido dentro de la abertura torácica.Fije el tubo en su posición con las dos suturas quirúrgicas que se colocaron previamente bajo la tráquea. Por último, conecte el tubo al ventilador. La lesión pulmonar se induce con un servo 900 C de Siemens.Utilizando una técnica de ventilación controlada por presión, ajuste el pico de presión inspiratoria a 45 milibares con una frecuencia de 80 respiraciones por minuto y una presión positiva al final de la espiración de cero a tres milibares con una fracción de oxígeno inspirado igual a uno; la relación entre inspiración y espiración es de uno a uno. Una vez que el animal esté conectado con éxito al ventilador, se inserta un catéter en la arteria carótida para medir la presión arterial y la frecuencia cardíaca. Se expondrá un segmento más largo de la arteria si primero se fija el brazo al costado del cuerpo.Comience realizando una disección roma de los músculos para traqueales para exponer la arteria carótida; una vez aislada, coloque una sutura en el extremo proximal de la arteria y asegúrela con una pinza o cinta. Coloque una segunda sutura aproximadamente un centímetro de distancia de la primera y ate, pero no apriete la sutura alrededor de la arteria. Diseccione la arteria hasta el extremo más distal y coloque una pinza pequeña para prevenir la pérdida de sangre.Utilice tijeras microquirúrgicas para hacer una pequeña abertura diagonal en la arteria por encima de la segunda sutura. Sostenga la abertura con pinzas finas mientras inserta el catéter y apriete el nudo para mantenerlo en su lugar. A continuación, afloje la pinza y avance el catéter más.Avance el catéter más allá de la segunda sutura. Fije el catéter con varios nudos y cinta adhesiva. Una vez que el catéter esté en su lugar, infunda suero fisiológico a una velocidad de 0,1 mililitro por hora y conéctelo al dispositivo de medición de la presión arterial.Por último, coloque pinzas en las extremidades para monitorear la frecuencia cardíaca. Después de tres horas de ventilación mecánica, se recolectan muestras para medir el grado de lesión pulmonar. Primero, obtenga muestras del catéter de la arteria carótida para el análisis de gases sanguíneos.Después de profundizar el nivel de anestesia, retire la conexión del ventilador e inserte una jeringa cargada con un mililitro de solución salina tamponada con fosfato. Inyecte el contenido de la jeringa y espere tres segundos antes de recoger nuevamente el líquido de lavado broncoalveolar en la jeringa. Cabe señalar que el volumen recuperado debe ser significativamente menor a un mililitro.Flash.Congele el líquido de lavado broncoalveolar en nitrógeno líquido y almacénelo a menos 80 grados Celsius. Para aislar los pulmones, primero realice una incisión justo debajo del esternón. Sujete el esternón con pinzas y extienda la incisión a lo largo de la caja torácica. A continuación, corte el diafragma en los bordes y alejado de las costillas para obtener una vista clara de la abertura inferior del tórax.Levante el estern&oacute;n con pinzas y abra la caja tor&aacute;cica mediante cortes largos en el lado derecho e izquierdo, manteniendo los cortes lo m&aacute;s laterales posible para que toda la pared tor&aacute;cica anterior pueda girarse hacia arriba. Conecte una aguja de calibre 27 y medio a una jeringa llena con cinco mililitros de PBS. Introduzca la aguja en el ventr&iacute;culo derecho y lave la circulaci&oacute;n hasta que los pulmones se vuelvan completamente blancos.Si esto no ocurre, asegúrese de que la punta de la aguja esté correctamente colocada en el ventrículo derecho y reposiciónela si es necesario. Extraiga los pulmones y bloquee tirando hacia arriba del corazón y cortando la tráquea. Utilice tejidos para absorber cualquier sangre que obstruya su vista.Extraiga el corazón en dirección del abdomen y corte cuidadosamente a lo largo de la columna vertebral para movilizar todos los órganos torácicos. Corte la aorta y coloque los órganos torácicos sobre una mesa quirúrgica limpia. Separe el corazón y elimine cualquier vaso importante de la muestra.Asegúrese de que no haya tejido del timo aún adherido al pulmón. Separe los lóbulos de los pulmones, colóquelos en tubos individuales, congélelos rápidamente y almacénelos a menos 80 grados Celsius. Para análisis posteriores.Como se observa aquí, el contenido proteico en el líquido de lavado broncoalveolar aumenta con la duración de la ventilación. El cambio relativo del contenido proteico se muestra normalizado a cero horas de ventilación para evaluar el grado de lesión pulmonar. Se realizan ELISA para albúmina y mieloperoxidasa, y se cuantifican las células inflamatorias en el líquido de BL.

pressure-controlled-ventilation-to-induce-acute-lung-injury-in-mice

Research

Investigación

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Este protocolo induce una lesión pulmonar aguda en un ratón que tiene una estrecha fidelidad a la patogenia de la neumonitis ácida observada en los humanos. Generamos una lesión pulmonar aguda no letal máxima de pH bajo y tenemos en cuenta las diferencias en la estructura respiratoria anatómica entre roedores y humanos utilizando una traqueostomía abierta junto con la liberación de presión circunferencial.

La traqueostomía abierta ácido gástrico aspiración modelo murino de lesión pulmonar aguda Resultados en máxima no letal aguda lesión pulmonar

Aquí se presenta un procedimiento paso a paso para inducir una lesión pulmonar aguda en ratones por instilación directa de lipopolisacáridos intratraqueales y para realizar análisis FACS de muestras de sangre, líquido de lavado broncoalveolar y tejido pulmonar. La mínima invasividad, el manejo simple, la buena reproducibilidad y la valoración de la gravedad de la enfermedad son ventajas de este enfoque.

Inducir lesión pulmonar aguda en ratones por instilación directa de lipopolisacárido intratraal

La instilación selectiva de ácido intrabronal en el pulmón izquierdo en ratones da lugar a una lesión pulmonar aguda unilateral y autolimitada que modela el síndrome de dificultad respiratoria aguda humana (ARDS) inducido por la aspiración de ácido gástrico.

Un modelo de lesión pulmonar aguda autolimitada por la instilación unilateral de ácido intrabronal

Los ratones expuestos al ozono combinado y a las endotoxinas bacterianas muestran una muerte celular muy extendida, incluida la de los neutrófilos. Observamos adaptaciones celulares tales como interrupción del lamellipodia citoesquelético, expresión celular creciente de la subunidad compleja del synthase del ATP de V β y angiostatin en lavado bronco-alveolar, supresión de la inmunorespuesta del pulmón y reclutamiento retrasado del neutrófilo.

Visualización De Las Adaptaciones Celulares Pulmonares Durante La Lesión Pulmonar Aguda Murina Inducida Por Ozono Combinado Y LPS

Una combinación de lavado con surfactante con solución salina al 0,9% (35 ml/kg de peso corporal, 37 °C) y ventilación de alto volumen corriente con PEEP baja para causar lesión pulmonar inducida por ventilador moderado (VILI) da como resultado un síndrome experimental de dificultad respiratoria aguda (SDRA). Este método proporciona un modelo de lesión pulmonar con capacidad de reclutamiento baja / limitada para estudiar el efecto de varias estrategias de ventilación durante períodos...

El agotamiento del surfactante combinado con ventilación perjudicial da como resultado un modelo reproducible del síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA)

La microscopía de fluorescencia intravital se puede utilizar para estudiar las interacciones leucocitario-endotelial y la perfusión capilar en tiempo real. Este protocolo describe métodos para obtener imágenes y cuantificar estos parámetros en la microcirculación pulmonar utilizando un sistema de imágenes pulmonares estabilizadas por vacío.

Microscopía intravital de fluorescencia de campo ancho de la microcirculación pulmonar en la lesión pulmonar aguda experimental utilizando un sistema de imágenes estabilizado por vacío

Este manuscrito describe el establecimiento de un modelo infeccioso de neumonía en ratones y la respectiva caracterización de la resolución de lesiones junto con métodos para el crecimiento de bacterias y la instilación intratraqueal. También se describe un enfoque novedoso que utiliza citometría de flujo de alta dimensión para evaluar el panorama inmunitario.

Modelo experimental para evaluar la resolución de la neumonía

Un modelo quirúrgico de ratón para crear una lesión por isquemia de reperfusión (RI) del pulmón izquierdo mientras se mantiene la ventilación y se evita la hipoxia.

Un modelo de ratón de intubación orotraqueal y cirugía de reperfusión de isquemia pulmonar ventilada

Aquí, proponemos un protocolo para la administración de lipopolisacáridos intratraqueales (LPS) a través de la intubación endotraqueal orofaríngea no invasiva. Este método minimiza el trauma del procedimiento quirúrgico para el animal y administra LPS con precisión a la tráquea y luego a los pulmones.

Instilación intratraqueal no invasiva de lipopolisacáridos en ratones

Este protocolo describe el desarrollo de un modelo de lechón neonatal de lesión pulmonar aguda que modela los eventos patogénicos tempranos que ocurren en el pulmón prematuro, incluida la cantidad de surfactante subadecuada, hiperoxia, ventilación a alta presión e inflamación, para facilitar la comprensión de los desencadenantes moleculares de la displasia broncopulmonar y mejorar la traducción terapéutica.

Desarrollo de un modelo de lesión pulmonar aguda de lechones neonatales que recrea el entorno temprano de los pulmones de los lactantes prematuros

En este estudio, se ha demostrado que una técnica no invasiva de instillación endotraqueal desarrolla AL en ratas utilizando un laringoscopio básico para asegurar una entrega precisa de LPS a los pulmones. El LPS se administra mediante un tubo endotraqueal mediante un laringoscopio. La magnitud de la lesión pulmonar se evalúa en varios momentos.

Administración endotraqueal no invasiva de lipopolisacáridos para inducir daño pulmonar agudo en roedores

Aprende a inducir lesión pulmonar aguda en ratones mediante ventilación mecánica de alta presión tras traqueotomía. Este modelo in vivo permite recolectar muestras biológicas para estudiar el síndrome de distrés respiratorio agudo.

La presión de la ventilación controlada para inducir la lesión pulmonar aguda en ratones

Explorar más videos