Entrega de plásmidos de ADN en urotelio de vejiga de ratón: un procedimiento basado en electroporación para administrar de manera eficiente plásmidos de ADN en células uroteliales de vejiga murina para generar modelos de ingeniería genética

Para comenzar, prepare un ratón hembra anestesiado en posición supina. Asegúrese de que su vejiga esté completamente vacía. A través de la abertura uretral, inserte un catéter lubricado. La lubricación ayuda a suavizar el paso uretral para ingresar a la vejiga.

Después del cateterismo, haga una incisión abdominal y diseccione la musculatura interna para exponer la vejiga. A continuación, pipetee una suspensión de plásmidos de ADN mezclados con un tinte adecuado en el extremo exterior del catéter. Estos plásmidos de ADN codifican un gen indicador fluorescente.

Coloque una jeringa en el catéter y empújela para administrar la solución plasmídica en la vejiga. Las moléculas de colorante inyectadas colorean la vejiga, lo que confirma la administración exitosa de la solución plásmida. Retire el conjunto del catéter y apriete el orificio uretral externo para evitar que la solución plásmida salga.

Ahora, pellizque la vejiga con dos electrodos conectados a un generador de electroporación. Aplique pulsos eléctricos de voltaje apropiado durante un período deseado a la vejiga. La exposición del urotelio de la vejiga, el revestimiento más interno de la vejiga, a los campos eléctricos aplicados